Способ дифференциации биоваров холерного вибриона

(5 ЕТЕ Ч, стоегае еаког ивают в течениетингера (рН 7,2).енный до 45 С добавляют полл, Разделяют на рых добавляют асчета 0,1 г/мл. и разливают ваавй3 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Научно-исследовательский противочумный институт Кавказа и Закавказья(56) Инструктивно-методические указанияпо лабораторной диагностике холеры. М.,1984, с, 40,(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ БИОВАРОВ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА Изобретение относится к микробиологии, в частности к дифференциации холерных вибрионов.Цель изобретения - повышение точности дифференциации.П р и м е р 1, Расплавляют и охлаждают до 45-50 С питательный агар (рН 7,0-7,2), в одну часть которого добавляют полимиксин из расчета 30 ед/мл среды, в другую - такое же количество полимиксина и 0,1-0,5 г додецилсульфата натрия на 1 мл среды. После тщательного перемешивания среду разливают в чашки Петри, На застывшие агаровые пластинки наносят обычной бактериологической петлей 3- или 18-часовую бульонную культуру. Посевы инкубируют в течение 18 ч при 37 С, Спустя это время проводят учет результатов,Если на питательной среде, содержащей только полимиксин, регистрируется рост холерного вибриона. то исследуемая культура относится к биовару эльтор, отсутствие роста говорит об отношении микроорганизма к биовару саззса.(57) Изобретение относится к микробиологии, в частности к дифференциации холерных вибрионов. Цель изобретения - повышение точности дифференциации. Изобретение заключается в том, что исследуемые культуры холерных вибрионов высевают на питательную среду, содержащую полимиксин, и на контрольную среду, содержащую полимиксин и додецилсульфат натрия, Дифференциацию проводят путем сравнения наличия роста культур на опытной и контрольной средах. Этот способ повышает достоверность идентификации исследуемых культур холерных вибрионов. 1 табл. Сравнительныи анализ результатов роста на среде с полимиксином и среде, содержащей полимиксин с додецилсульфатом натрия, позволяет выявить специфическое подавление роста Ч. с)оегае саззса именно полимиксином и исключить угнетающее влияние побочных факторов. Полноценный рост биовара саззса на средах с полимиксином и додецилсульфатом натрия подтверждает факт. угнетения роста этого биовара полимиксином на средах, содержащих только антибиотик, при сохраненном росте холерных вибрионов биовара эльтор, Полученные результаты приведены в табли-. це. П р и м е р 2. Культуры и Ч, споегае саззса выращ 3 ч при 37 С на бульоне Хот В расплавленный и охлажд агар Хоттингера (рН 7,2) имиксин из расчета 30 ед/м две порции, в одну из кот додецилсульфат натрия из р Тщательно перемешиваютчашки Петри. Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри:одной с полимиксином (опытной), другой с полимиксином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37 С в течение 18 ч. При учете результатов на первой чашке отмечался только рост культур биовара эльтор, на контрольной чашке выросли культуры как биовара эльтор, так и биовара сазз 1 са.П р и м е р 3. Культуры Ч. стоегае есог и Ч, стоегае с 1 аээ 1 са выращивают в течение 18 ч при 37 С на бульоне Хоттингера (рН 7,2), добавляют полимиксин из расчета 30 ед/мл. Разделяют на две порции, в одну из которых добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,3 г/мл, Тщательно перемешивают, разливают в чашки Петри. Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри: одной с полимиксином (опытной), другой с полимиксином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37 С в твчение 18 ч. При учете результатов на опытной чашке выросли только культуры биовара эльтор, на контрольной - культуры обоих биоваров.П р и м е р 4. Культуры Ч. сйо 1 егае е 11 ог и Ч, сЬо 1 егае саззса выращивают в течение 3 ч при 37 С на бульоне Хоттингера (рН 7,2). Расплавленный и охлажденный до 45 ОС агар Хоттингера (рН 7,2) разделяют на две Части, предварительно внеся в него полимиксин из расчета 30 ед/мл. В одну из Частей добавляют додецилсульфат натрия из расчета 0,5 г/мл, тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри, Культуру после инкубирования наносят бактериологической петлей в виде бляшек на застывший агар двух чашек Петри: одной сполимиксином (опытной), другой с полимик 5 сином и додецилсульфатом натрия (контрольной). Посевы инкубируют при 37 С втечение 18 ч. При учете результатов на опытной чашке обнаружен только рост биовараэльтор на контрольной выросли культуры10 биоваров эльтор и саээ 1 са,Полноценный рост биовара с 1 аэз 1 са насредах, содержащих додецилсульфат натрия и полимиксин, подтверждает факт угнетения роста этого биовара полимиксином15 на средах только с антибиотиком при сохраненном росте в обоих случаях холерных вибрионов биовара эльтор,Таким образом, в результате использования способа контроля определения био 20 вара холерного вибриона повысиласьдостоверность индентификации выделяемых культур за счет исключения влияниянеучтенных побочных факторов, которыемогут дать искаженную картину лаборатор 25 ной диагностики.ф ар мул а из обре те н ияСпособ дифференциации биоваров холерного вибриона путем посева исследуемой бульонной культуры на.питательную30 среду с полимиксином с последующей инкубацией и дифференциацией биовара эльторот биовара с 1 азэ 1 са по наличию роста, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности дифференциации, исследуе 35 мую культуру параллельно сеют на среду сполимиксином, дополнительно содержащую 0,1-0,5 додецилсульфата натрия, ипри наличии роста на обоих средах дифференцируют биовар зльтор.40