Способ получения культуральной энцефалитной и-: ис tjaвакцины

О П И С А Н И Е 167967ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветсзаСоциалистических Республик Зависимое от авт, свидетельстваЗаявлено 02.1.1964 ( 874015/61.16) Кл. ЗОЬ, 6 с присоединением заявкиПриоритет МГ 1 К А 611 сУД 1( 615.37 (088,8) Государственныйкомитет по деламизобретеиийи открытий СССР Опубликовано 05,11.1965, Бюллетень3 Дата опубликования описания 15.11.1965 Авторыизобретения М, П, Чумаков, А. В. Гагарина, Л. М. Вильнер, М. К. Ханиня и В. И, Лакииа Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССОгОэ 1 АЯ 3 аявител ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЪТУРАЛЬНОЙ ЭНЦЕФАЛИТИОЙ ВАКЦИНЫ СПО одгисная гругпа Л 13 Известны способы получения культуральной энцефалитной вакцины, например вакцины против клещевого энцефалита, инактивированной формалином. Указанные способы предусматривают выращивание вируса в однослойных культурах куриных эмбрионов с последующей инактивацией вирусной жидкости формалином (1:2000) при 37 С в течение трех суток, адсорбцией вируса на гидроокиси алюминия и декантацией 50% нядосадочной жидкости, Такая методика выращивания весьма трудоемка и не обеспечивает удовлетворительной иммуногенности вакцин.Сущность предлагаемого способа заключается в том, что вирус выращивают во взвеси трипсинизированных клеток и инактивируют в присутствии клеток и клеточного детрита. Это упрощает производственный процесс и повышает иммуногенные свойства вакцины.Для изготовления культуральной вакцины против клещевого энцефалита получают первично оттрипсинизированные клетки куриных эмбриональных фибропластов, заражают взвеси клеток вирусом, инкубируют их во взвешенном в среде состоянии в сосудах большой емкости, инактивируют вирус формалином при 37 С и удаляют клетки и клеточный детрит сепарированием с последующей фильтрацией через осветляющие и стерилизующие фильтры.Первично оттрипсинизирова нные клетки фибропластов получают в результате трипсинизации 11-дневных куриных эмбрионов. Сливы оттрипсинизировянных клеток до центрифугирования разбавляют равным количеством 5 среды, состоящей из 0,5% гидролнзата лактальбумина на солевом растворе Эрля с добавлением 3% нормальной бычьей сыворотки.Из оттрипсинизированных клеток составляют взвеси необходимой концентрации (1,5 - 10 2,5 млн. клеток на 1 л г). Для лучшей адсорбции вируса на клетках при заражении счачала готовят взвешенную культуру пятикратной концентрации, а через 2 - 2,5 час инкубации при комнатной температуре ее разводят четы рехкратным объемом среды, Для зараженияклеток используют штаммы Софьин или Пан в виде эмульсии мозговой ткани инфицированных мышей из расчета 10 г 1.Р 50 мл взвешенной культуры.20 Для инкубирования инфицированных взвешенных культур используют среду Паркера199 на растворе Эрля с добавлением 0,1% гидролизата лактальбумина и 5% аминопептида при рН 78,25 Взвешенные культуры получают либо в бутылях нейтрального стекла емкостью 5 л и более, либо в специальных реакторах. В обоих случаях необходимо постоянное перемешивание. Инкубировяние инфицированных культуп 30 производят при 37"С в течение 64 час, Для167967 Предмет изобретения Составитель В. А, Таратута Текред А. А. Кудрявицкая Корректор Л. В. Тюняева Редактор А, И. Байнова Заказ 12/10 Тираж 975 Формат бум. 60 Х 90/з Объем 0,13 пзд. л. Цена 5 коп. ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР Москва, Центр, пр. Серова, д, 4ТипограФия, пр, Сапунова, 2 поддержания равновесия в содержании СО. емкости должны быть герметизированы и над слоем жидкости оставляют прослойку воздуха примерно на /з объема.Во время инкубации до 50 о/о клеток отмирает, и при этом происходит дополнительный выход в жидкую фазу внутриклеточного вируса и веществ, стабилизирующих инфекционные и антигенные свойства вируса, По окончании инкубации непосредственно в инфицированную культуру добавляют формалин до концентрации 1: 2000. Инактивация продолжается 96 час при 37 С в присутствии клеток и клеточного детрита. После инактивации производят сепарацию и фильтрацию инактивированной инфицированной взвешенной культуры для удаления клеток и клеточного детрита,Способ получения культуральной энцефалитной вакцины, например вакцины против клещевого энцефалита, инактивированной 10 формалином, отличающийся тем, что, с цель 1 оповышения иммуногенных свойств вакцины н упрощения производственного процесса, вирус выращивают во взвеси трипсинизированных клеток и инактивируют в присутствии клеток 15 и клеточного детрита.