Способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга

ОЮЭ СОВЕТСКИХОЦИАЛИСТИЧЕСКИХЕСПУБЛИК 67 09) 1)5 601 81 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЪСТВУ Изобретение атно ины, а именно к нейр Целью является посится к области медиобиологии.лное выделение мина пириформной доли далевидного комплексмозга,Способ осуществл следующим обраГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР(71) Башкирский государственный университет им, 40-летия Октября(56) Митюшов М.И. и др. Переживающийсрез мозга как объект нейрофиэиологического и нейрохимического исследования, -Л.: Наука, 1986, с. 28. Пириформная доля мозга включает в себя как часть миндалевидный комплекс представляющий собой совокупность поверхностно расположенных структур обонятельной коры и глубинно расположенных ядер.Для удаления этой части мозга предло жен резец с емкостью в форме обьемного образования - эллиптического параболоида, который позволяет получить в комплексе как обонятельную кору. так и глуббино-расположенные ядра миндалевидного комплекса,После декапитации и извлечения мозга иэ черепа его располагают базальной по(54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗОВ ПИРИФОРМНОЙ ДОЛИ МОЗГА(57) Изобретение относится к медицине, а именно к нейробиологии, Целью является получение полного отдела пириформного отдела мозга. Цель достигается тем, что специальным резцом, выполненным в форме эллиптического параболоида, иссекают отдел миндалевидного комплекса. При этом угол иссечения устанавливают от 18 - 20 к продольной оси мозга, Способ позволяет получить пириформную долю мозга с сохраненными нейтральными связями,верхностью кверху. Устройством из пири формной доли мозга иссекают кусочек ткани, имеющий форму эллиптического параболоида с продольным размером, равным 5 мм, Иссечение проводят под углом 18 - 22 (оптимально 20) к продольной оси мозга.Иссеченный кусочек ткани помещают основанием на столик, имеющий охлаждение, и разделяют с помощью вибротома на срезы, толщина которых варьируется в пределах 220-350 мкм.Полученные срезы переносят в первую порцию инкубационной среды, в которой выдерживают 30 мин (преинкубация). В качестве инкубационной среды используют бикарбонатную среду Кребса-Рингера, в состав которой входят следующие компоненты, ммоль.л: йаС 118; КС 1 4,7; СаС 12 2,5; КНРО 41,2; М 93041,2; йаНСОз 25; глюкоза 10. Инкубационную среду при комнатной температуре насыщают газовой смесью, со1679246 3 Составитель Л. СтебаевТехред М.Моргентал Корректор Э. Лончакова Редактор Е, Папп Заказ 3203 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская нэб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 держащей 95% 02 и 5 С 02, С момента извлечения мозга из черепа до перемещения срезов в инкубационную среду должно пройти не более 5 мин,Нейрофиэиологические исследования проводят на срезах, которые после преинкубации помещают в свежую порцию инкубационной среды (" рабочая порция"). Фиксацию срезов (устранение их смещения при перемещении инкубационной среды) обеспечивают с помощью помещения их между двумя нейлоновыми сеточками. Для исследования срезов используют комплекс устройств и приборов, предназначенных как для обеспечения длительного переживания срезов, твк и регистрации электрической активности компонентов нервной ткани. Под контролем микроскопа к различным структурам миндалевидного комплекса вводят стеклянные микроэлектроды с диаметром кончика до 10-20 мкм. Регистрируют вне- и внутри-клеточную активность и фокальные потенциалы в структурах палеокортекса (перивмигдалярная кора, ядро латерального обонятельного тракта) и ряда ядер миндалевидного комплекса (базомедиальное, медильное, кортикальное, базолатеральное, эндопириформные), Полученные результаты характеризуют электрофиэиологические ответы различных структур, а также их своеобра. зие, обусловленное взаимодействием различных образований миндалевидного комплекса, сохраняющих целостность и комплексность в составе срезов.Морфологический контроль эффективности иссечения пириформной доли мозга и констатацию топографии введенного микроэлектрода осуществляют после завершения регистрации электрофизиологиМеских ответов путем окрашивания срезов гистологическими методами (крезиловым фиолетовым и гематоксилином-эозином).Изучение микропрепаратов показало, что способ, реализуемый с помощью специального устройства, обеспечивает изолированное выделение миндалевидного комплекса, а иссекаемые кусочки и срезы этогообразования мозга полностью сохраняютсвою структурную органиэацию.5 П р и м е р. Из мозга после выделенияпредлагаемым устройством иссекали подуглом 20 к продольной оси мозга часть неболее 5 ммз. Предварительно делали разрезпродольно с уровня перекреста зрительных10 трактов вдоль медильной границы комплекса, Далее режущую поверхность, находящуюся на переднем крае резца, приводили всопрокисновение с поверхностью мозга так,чтобы основание резца, стоящего верти-15 кально, прищлось нэ уровень пс 1 зцгэоОастогв. После этого резец погружали вткань мозга на глубину выступа до 1,5 мм.Затем положение резца меняли до 45 кповерхности мозга и устанавливали режу 20 щую кромку до 90 к поверхности мозга.Затем резец вводили наклонно вниз до полного заполнения резца тканью мозга. Избиоптата готовили срезы, которые помеща-.ли в питательную среду. Среды использова 25 ли в дальнейшем для нейробиологическихисследований, Морфологический и физиологический контроль срезов позволил установить наличие сохранных связей нервныхклеток пириформной доли мозга,30 Способ позволяет выделить полностьюминдалевидный комплекс пириформной доли мозга с сохраненными нейтронными связями и использовать переживающие срезыв нейробиологических исследованиях.35Формула изобретения Способ приготовления переживающихсрезов пириформной доли мозга путем ис сечения ткани с последующей инкубацией впитательной среде, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью полного выделения образованияиссечение проводят по форме эл-.липтического параболоида, при этом угол 45 иссечения устанавливают от 18 до 22 кпродольной оси мозга.