Питательная среда для выделения энтерококков

(56) Седов В;И, Селективная среда для выделения знтерококка. - Лабораторное дело,1979, М 5, с,280 - 281,(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЭНТЕРОКОККОВ57) Изобретение относится к медицинскоймикробиологии и может быть использованов бактериологической диагностике кишечИзобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике кишечных инфекций.Цель изобретения - повышение селективных свойств среды.Питательную среду готовят следующим образом.П р и м е р 1. 7,5 г триптического гидролизата соевого шрота. 8,5 г агара, 9,5 г глюкозы, 9,0 г цитрата натрия, 5,5 г уклекислого натрия и 0,0008 г кристаллвиолета растворяют в 1 л дистиллированой воды в колбе,Среду кипятят 2-3. мин, охлаждают до 50 С и разливают в стерильные чашки Петри, По мере застывания среды чашки со средой и крышки раздельно подсушивают в термостате до высыхания конценционной влаги на крышках чашек, после чего закрывают крышками, и среда готова для использования, Цвет готовой среды бледно-желтый, рН 9,8 + 0,4,4 ъ Ц 1(она содержит эанных ингреСУДАРСТВЕ ННЫЙ КОМИТЕТ ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМИ ГКНТ СССР ных инфекций. Цель изобретения - повышение селективных свойств среды. Питательная среда содержит, г/л: триптический гидролизат соевого шрота 7,5-8,5; цитрат натрия 9,0-10,5; агар 8,5 - 9,5; глюкоза 9,0- 11,0; углекислый натрий 5,5 - 6,5; кристалл- виолет 0,0008 - 0,0012; дистиллированная вода 1 л, рН среды 9,8 . 0,4, При посеве энтерококков и микробов-ассоциантов рост последних из разведения 10 отсутствует. Чувствительность среды - при посеве 100 м,кл. энтерококков отмечается их рост на среде. Рост энтероккоков через 18-24 ч инкубации при 37 С,П р и м е р 2. В 1 л дистиллированнойводы вносят 8,0 г триптического гидролиэата соевого ш рота, 9,0 г ага ра, 10,0 г глюкозы,10,0 г цитрата натрия, 6,0 г углекислого на-,трия, 0,001 г кристаллвиолета.П р и м е р 3. В 1 л дистиллированнойводы вносят 8,5 г триптического гидролизата соевого шрота, 9,5 г агара, 11,0 г глюкозы,10,5 г цитрата натрия, 6,5 г углекислого натрия, 0,0012 г кристалл виолета.Среду можно получать в сухом виде,П р и м е р 4. В шаровую мельницуемкостью 1 кг загружают 185 г триптического гидролизата соевого шрота, 209,3 г агара,232,5 г глюкозы, 232,5 г цитрата натрия,139,5 г уклекислого натрия, 0,02 г кристаллвиолета. Смесь перемешивают в течение 45мин,Навеску вещества 4,3тимальное количество1652345 Триптический гидролиэатсоевого шротаГлюкозаЦитрат натрияУглекислый натрийКристалл виолетАгарДистиллированная вода 7,5-8,5 9,5 - 11,0 9,0 - 10,5 5,0-6,5 0,0008-0,0012 8,5-9,5 1 л40 Составитель Г.СмирноваТехред М.Моргентал Корректор И,Муска Редактор М.Петрова Заказ 1747 Тираж 370 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 01 диентов) вносят в 1000 мл воды, кипятят 2-3 мин, разливают по 25 мл в чашки Петри.Аналогично получают препараты сухих сред с содержанием миНимальных и максимальных концентраций ингредиентов. При этом навеску составляет 40 и 46 г соответственно на 1 л среды.П р и м е р 5. Для приготовления микробных взвесей суточной культуры тест-штаммов энтерококков, выращенный на скошенном сахарном агаре при 37 С, смывают 0,9 о-ным изотоническим раствором хлористого натрия, доводят взвеси до 10 ед, по оптическому стандарту мутности ГИСК им. Л.А.Тарасевича, что соответствует 109 микробных клеток в 1 мл. Затем серийными десятикратными разведениями доводят до содеркания 10 тыс, (10 5), 1 ты,. (10) микробных клеток в 1 мл взвеси.Готовят также микробные взвеси микробов-ассоциантов: ЯтарЬ 1 ососсиз, Рготеиз, Е. со, Рзеибопопаз. Для этого суточные культуры, выращенные на скошенном питательном агаре при 37 С, смывают 0,9 о-н ым изотоническим раствором хлористого натрия, доводят до 10 ед. по оптическому стандарту мутности ГИСК им. Л.А,Тарасевича, что соответствует 109 микробных клеток в 1 мл,Из разведения 10 и 10 каждой взвеси монокультур энтерококков высевают по 0,1 мл на чашку с испытуемыми и контрольными средами (среды сравнения),Микробы-ассоцианты высевают из разведения 109 по 0,1 мл на чашки с испытуемой и контрольными средамиКонтрольными средами (сравнения) служат среда Седова лабораторного изготовления и сахарный агар на кормовых дрожжах.Учет результатов проводят через 18-24 ч инкубации посевов при 37 С.Чувствительность, стабильность исходных биологических свойств испытуемых тест-штаммов на предлагаемой и контрольных(сравнительных) средах одного порядка(Завеса 1 з 1379, Я.1 аеса 11 з чаг утоцепез 7 з) -отмечается рост при посеве 100 микробных клеток,5 Проверка селективных свойств,При посеве на испытуемую среду тестштаммов микробов-ассоциантов Е.со 0-55,ЯтарЬ 11 ососсиз ацгецз 209 Р, Рзеобоаопазаегоцепоза Е, Рготецз геа 9 ег 4489 из10 разведения 10 рост культур не наблюдается, в то время как на контрольной средеСедова наблюдается рост стафилококков изэтого же разведения. Полная ингибиция стафилококков на контрольной среде наступа 15 ет из разведения 10,Сравнение скорости роста энтерококков показывает, что на предлагаемой соедеэнтерококки вырастаот через 18 - 24 ч, а насреде Седова - через 36-48 ч,20 Таким образом, предлагаемая среда обладает более выраженными селективнымисвойствами. обеспечивающими выделениеэнтерококка в чистом виде и большей скоростью роста выделяемого микроба,25 Формула изобретенияПитательная среда для выделения энтерококков, содержащая источник азота, глюкозу, цитрат натрия, углекислый натрий,селективный агент, агар и дистиллирован 30 ную воду, о тл и ча ю ща я ся тем, что, сцелью повышения селективных свойств среды, она в качестве источника азота содержит триптический гидролизат соевогошрота, а в качестве селективного агента -35 кристаллвиолет при следующем количественном соотношении комонентов, г/л;