Способ определения устойчивости винограда к серой гнили

(21) (22) (46) ельк го72)53) опре серо реком анали гарач(54) СПОС ВИНОГРАДА (57) Изоб му хозяйсно в селе Б ОПРЕДЕК СЕРОЙетение ову и можции раст НИЯ УСТОЙП 1 ВОС ельсконосит спользоваь изобрете т бы ний. В к ярко втов с естве индикаторных аженной устойчивост жно испольэовать со ьон с черной ягодой и с белой ягодой в зобретение относится ельскомуьзовано ю к серойба Кабери Мцвивапериод зяпств и може ыть исп селекции растени Цель изобретены гнили не Со- ускорочности цесса и повьппени и.ю гриб р 1 При ммунололедующи я определени ческих свойств ви ограда а с раз- устой- сприимсполь т индикаторные с )ражением признак вают ич нымивые нно устоичивые и в р-агара, иате привлажностибеспечиваетение паразигриб обраивые.По индикаторнымировочную таблицуой определяют усторм винограда ортам стшкалу),чивость оят тао кото"ругих ОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ 4404136/30-1323.02.8807.12.89. Бюп. Иф 45Всесоюзный научно-исследоватинститут винограда и продуктовереработки "Магарач"П.Я.Голодрига и С.А.й(ербаков631.52(088.8)Волынкин В.А, Лабораторный метоеления устойчивости винограда кгнили. - В кн.: Методическиеендации по современным методамэа и экспериментаВНИИ ВиВ "МаЯлта, 1980. ния - ускорение процесса и повьппение точности определения. Для определения устойчивости винограда к серой гнили ягоды отделяют от гребней с плодоножкой, дезинфицируют путем погружения в 652-ный водный раствор этилового спирта на 4 мин, затем высушивают на воздухе и инфицируют нанесением на каждую ягоду по 0,03 мл споровой суспенэии. Зараженные ягоды помещаютов термостат на б 5 ч при 20 С, обычном освещении и влажности воздуха не ниже 902. После инкубации ягоды измельчают, центрифугируют и в супернатанте определяют количественное содержание лейкоантоцианов. Формы, содержащие 28 и более мг/л данного вещества, относят к устойчивым, от 18 до 28 к среднеустойчивым, 18 и менее к восприимчивым. 1 з.п. ф-лы. техническои зрелостГотовят суспензи а образом.Возбудитель болезни выс чашки Петри на стерилизова ло-агар, содержащее 27 ага выращивают 10 дн в термост 20 С, обычном освещении иовоздуха не ниже 907., что о предварительное приспособл та к хозяину. Через 10 дн1526613 С ос гавит ель Л, Марч енотова Редактор О.Головач Техред М.Ходанич Коррекгор М.ВасильеваЗаказ 7423/2 Тираж 621 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 зует обильный мицелий со спорами, ко. торые собирают и помещают в свежеотжатый сок исследуемого растения, образуя споровую суспенэию с таким рас 5 четом, чтобы в 0,03 мп ее содержалось от 500 до 700 спор гриба.Ягоды исследуемых сортов огделяют от гребней с плодоножкой без нарушения пруинового налета и дезинфицируют путем помещения в 652-ный водный раствор этилового спирта на 4 мин, Затем ягоды высушивают на воздухе и инфицируют путем нанесения на каждую ягоду по 0,03 мл споровой суспензии. Зараженные ягоды помещают в термостат на 65 ч при 20 С, обычном освещении и влажности воздуха не ниже 902.После 65-часовой инкубации ягоды . измельчают с помощью ручного пресса, 20 центрифугируют 15 мин при 3 тыс об/мин и в супернатанте определяют количественное содержание лейкоантоцианов (ЛА). Для этого по 1 мл полученного супернатанта вносят последовательно 25 в две пробирки с 4 мл лейкоантоцианового реактива (смесь Н-бутилового спирта ч.д.а концентрированной соляной кислоты ч.д.а. в соотношении 3:1 и в качестве катализатора серно- кислое железо из расчета 150 мг/л). Одна пробирка без кипячения служит контролем, вторую закрывают пробкой и помещают в кипящую водяную баню на 30 мин. Затем охлаждают проточной водой из крана и проводят фотометрирование обоих растворов при длине волны 540 нм против лейкоантоциановогоФ реактива в кювете с толщиной слоя 1 см. Опыт проводят не менее, чем в 40 двух повторностях. Содержание ЛА рассчитывают по формуле (а-в) 104 мг/л, где а - оптическая плотность раствора после кипячения; в - оптическая плотность раствора без кипячения; 104 - 45 коэффициент пересчета, учитывающий молекулярную экстинцию цианидина. Для сорта Каберне Совиньон содержание ЛА составляет 28,5 мг/л, для Мцвивани кахури 91,4 мг/л1 П р и м е р 2. В качестве индикаторных сортов с ярко выраженной восприимчивостью к патогену используют сорта Пино с черной ягодой и Кумшацкий белый. Исследования проводяг аналогично примеру 1. Для сорта Пино содержание ЛА составляет 18 мг/л, для с сорта Кумшацкий 17,3 мг/лП р и м е р 3. В качестве индикаторных сортов со средней степенью устойчивости используют сорта Эзерио с белой и Оджалеши с черной ягодой. Для сорта Эзерио содержание ЛА составляет 21,7 мг/л, для Оджалеши 22,4 мг/л.Сорта содержащие ЛА 28 мг/л и более относятся к устойчивым, 18 мг/л и менее - к восприимчивым. Среднеустойчивые занимают промежуточное положение - 18-28 мг/л.Способ позволяет более чем в два раза сократить время на определение устойчивости винограда к серой гнили и значительно повысить точность оценки.Формула изобретения1.Способ определения устойчивости винограда к серой гнили, включающий отделение ягод, дезинфицирование, заражение споровой суспензией, термостатирование и определение показателя, по. по которому оценивается устойчивость к болезни, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения процесса и повышения точности определения, после термостатирования ягоды гомогенизируют, отделяют бесклеточный экстракт, в полученный гомогенат добавляют лейкоантоциановый реактив, смесь помещают в термостат и фотометрируют, а в качестве показателя, по которому оценивается устойчивость, используют содержание лейкоантоцианов.2. Способ по п. 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что при оценки винограда к устойчивым относят формы с содержанием лейкоантоцианов 28 и более, к среднеустойчивым - от 18 до 28, к восприимчивым - 18 и менее мг/л.