Способ выявления кровеносных сосудов матки на гистологическом препарате

СОЮЗ СОВЕТСКИСОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИК 09 ВСф Г 1%САНИЕ ИЭОБРЕТЕНИ ВИДЕТЕПЬСТВ Н АВТОРС мин в теродержащейг м енный лог оли пожн иков,ов ции- ынъе де микро- экспедицины,урналй ме ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫ(22) 29.07,83 (46) 30,11,87, Бюл. Р 44 (71) Витебский государстмедицинский институт (72) П,Ф,Степанов, А.Г.С Б.С.Базеко и В,Г.Сапожни (53) 6 16-0. 88. 8(088. 8) (56) Чилингарян А.М. Калэинтрифосфатный метоц беного выявления интраоргациркуляторного русла.риментальной и клиническ 1977, 17, 5, 19-28.(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ КРОВЕНОСНЫХСОСУДОВ МАТКИ НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМПРЕПАРАТЕ(57) Изобретение относится к области медицины, точнее к гистологии. Цель изобретения - повышение качества окраски путем более полного выявления волокнистых структур стенки сосудов, Для этого материал фиксируют в 43-ном р-ре нейтрального формалина, приготовленного на изотоническом р-реоИаС 1, при 4-8 С не менее суток. Срезы замороженного материала несколько раз промывают в дистиллированной) 4 С 01 И 1/28 А 61 В 10/ воде, инкубируют их 30-120мостате при 37 С в среде, сглицериновый буфер Зеренсенаконцентрации, рН 12,0, дистиллированную воду, 0,1 М р-р уксуснокискальция, 0,1 М р-р двунатриевой саденозин-трифосфорной кислоты,смесь фильтруют. После инкубации ипромывки двухкратно срезов в дистиллированной воде их на 30-45 мин при37 С переносят в следующую среду:2 Ж-ный р-р азотнокислого свинца.1 М р-р уксуснокислого натрия, 1 Мацетатный буфер, рН 6.2. После двух"кратного промывания в дистиллированной воде срезы помещают на 2-5 минв р-р уксусной кислоты и затем двухкратно промывают их в дистиллированной воде. Затем срезы переносят вЗЖ-ный р-р сернистого натрия споследующей многократной промывкойдистиллированной водой, Клеточныеэлементы сосудистой стенки окрашиваются в нежно-желтый цвет, границыэндотелиоцитов - в темно-коричневый.Обработка р-ром уксусной кислотыведется для дифференцировки с цельюустранения окраски несосудистыхструктур и повышения контраста препарата.1355895 ВНИИПИ Заказ 5787/38 Тираж 776 Подписное ФПроизв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицинеа именно к гистологии,Цель изобретения - повышение качества окраски за счет более полноговыявления волокнистых структур стенки сосудов.Способ осуществляют следующимобразом,Материал фиксируют в 4%-ном растворе нейтрального формалина, приготовленного на изотоническом растворехлористого натрия, в холодильнике при4-8 С не менее 24 ч.Материал замораживают и режут насрезы толщиной 10-15 мкм,Срезы промывают в несколькихсменах дистиллированной воды от 3до 24 ч, затем инкубируют их в течение 30-120 мин в термостате при 37 Св среде следующего состава: к 2 млглицинового буйера Зеренсена 1 Мконцентрации рН 12,0 добавляют 5 млдистиллированной воды, к полученномураствору приливают 2 мл 0,1 М раствора уксуснокислого кальция, потом1 мл 0,1 М концентрации свежеприготовленного раствора двунатриевойсоли аденозин-трифосфорной кислоты,Полученную смесь йильтруют,После инкубации срезы промываютв двух сменах дистиллированной водыпо 5 мин в каждой, переносят их на30-45 мин при 37 С в среду следующегосостава: к 100 мл 2 -ного раствораазотнокислого свинца добавляют 10 мл1 М раствора уксуснокислого натрияи 10 мл 1 М ацетатного буйера, рН6,2, Срезы промывают в двух сменахдистиллированной воды по 5 мин в каждой, переносят на 0,5-2 ч в 20 -ныйраствор уксуснокислого натрия, затемих промывают в двух сменах дистиллированной воды по 3 мин в каждой, помещают на 2-5 мин в2,5 -ный раствор уксусной кислоты ипромывают их в двух сменах дистиллированной воды по 3 мин в каждой.Затем срезы переносят в 3%-ный раствор сернистого натрия на 5-30 с (допожелтения среза), промывают в нескольких сменах дистиллированной водыв течение 1-3 ч. Возможна докраскасрезов гематоксилин-эозином с последующим заключением в бальзам-полистирол по известной в гистологии схеме.Клеточные элементы сосудистойстенки окрашиваются в нежно-желтыйцвет, границы эндотелиоцитов - втемно-коричневый. Другие структурыткани и сосудистой стенки окрашива ются гематоксилин-эозином как обычноВозможность более тонкого выявле-.ния внутриклеточных структур достигается введением в состав субстратовазотнокислого свинца и уксуснокисло го натрия, обеспечивающих окраскубазальных мембран эндотелиоцитов. Обработка раствором уксусной кис-. лоты применяется для дифференцировки с целью устранения окраски несосудистых структур и повышения контраста препарата. Формула изобретения25 Способ выявления кровеносных сосудов матки на гистологическом препарате путем фиксации в 4 -ном растворе йормалина, приготовлении срезов,30их инкубации с растворами ЛТФ обработки в среде, содержащей соли свинца, с последующей дополнительной обработкой в растворах с сернистымнатрием и доокраской в красителе,35 о т л и ч а ю щ и й с я тем что,с целью повышения качества окраскиза счет более полного выявления волокнистых структур стенки сосудов,ойиксацию проводят при 4-8 С, при40 этом растворы фиксатора готовят наизотоническом растворе, а в качествесоли свинца применяют азотнокислыйсвинец, нри этом среда дополнительносодержит 1 М раствор уксуснокислого45 натрия и 1 М ацетатный буфер, рН54-62 при соотношении азотнокислого свинца, уксуснокислого натрия иацетатного,буфера 10 : 1 : 11 и далееперед обработкой в растворе сернисто 50 го натрия препараты помещают в20%-ный раствор уксуснокислого натрияна 0,5-2 ч и 2,5 -ный раствор уксусной кислоты на 2-5 мин,