Способ получения коллагеназы

СОЮЗ СаВЕТСНИ 19) (11) СООИАЛИСТИЧЕСНРЕО )УЬЛИН 51) 5 5/5 ИЯ КОППАГЕИАЗЫэкономичности спохнологии гомогеа крабов Рага 11 сСПОСОБ ПОПУЧЕИДля повышенияи упрощения тегепатопакреас(57 соб ниэ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНЯТ(71) Институт иммунологии и Тихооке анский институт биоорганической кими .(72) И.Ю.Сахаров, А.В.Джунковская, А.А.Артюков Б.В.Сова, О.Г.Саканделидэе и Э.П.Козловская(56) Ье 1 Иег 5., Нагрег Е. - ИесЬод 1 п Еплуио 1 оуу, 1970, ч. 19, р. 613- 635 Ьодеь сапйасЬаг.).са илн Ег 1 осЬе 1 г )йроп 1 са в 8-12-кратном объеме ацетона (А), охлажденного до температуры (-15) - (-20) С, разводят двойным объемом А той же температуры, отстаи" вают, осадок декантируют, промывают охлажденным А (-20 С), центрифугируют в течение 20 мин при 12000 ц, Осадок ресуспендируют В и-бутаноле (-20 С) с центрифугированием в том же режиме затем ресуспендируют в ох" лажденном А, центриугируют в том жео, режиме и сушат в эксикаторе при "20 ; над А 1,1 01. Все операция проводят при 4 С.Д1 3511 зу по Отцгя цию и ки(лоторясглоримому уеоуулугеу Уявля 93 едlмг преутярята. Лктепуност по отношению к эляс"тину и этилольте эФирам 11-уцетуел.-тирозина и И-безоил.-яргееееиеея не об"нярукиляется,П р и м е р 2. Все этапы проводяткак В примере 1, гри этом используетгепатопянкреяс крабов Бг 1 осеуе 1 г Зароту 1 са е гомоге ууизяцеву проводят в .600 млацетона (1; 12 ф).Выход препярята - 5,3 г, удельнаяактивность коллягенязы пб отношениюк кислоторастворимому коллагену93 еД/еег п 1 уепя 1 уятаэП р н м е р 3. Все этапы пройо"дят как в примере 1, при этом температура гомогенизяции составляет20 - 15 С, Вькод препарата " 48 г, удельная активность - 97 едемг препарата,ПУеЕлягаемьууе способ имеет следуюшие преимууцестля по сравнению с прото,ипом:25 1) Позволяет Упростить текуеологиюВуцеления препарата за счет исключе-.ния этапа культивировануя микроорган у тз мо В 0 1 о з 1: г 1 (у 1 оул Н 1 з то 1 у1 с иул.Позволяет удалить из препаратаУЗп неспецифические протеязы. ПрепаратНЕ УР 051 ЛЛЯЕТ ЯКТИЛНО Ти ПО ОТНОШЕНИЮК ЗуЯСТИНУ И ЭТИЛОВЬЕМ ЭФИРЯМ И-ЯЦЕтил.-теро зина и И-б(ензоил:-1-ЯргиН 51 Е.31 озаляет, рясурить сырьевуюбазу производства трепарага Ва счетусу(ользовяуеия у епятоеандреаса крабовагя 11 с 1 Уоаез Сагугзсй в 1 са и Гг 1 рс 1 уе 1 гаропуся .вместо патогенного штаммагу муукууооргянизмол 01 сзегудеЕл Н з 101 у ;Цтт,. Иел(у к кут.слотоууястз(уре .у" у колля 1":.Иу,П р и и е ЕУ у, В6:Уп 1 УЯ Уее Гуу О - Вод 51 т Г(п 1с ( . 0л"Уге(умО(У(УУеуу" ного; ууу,тсуи 11 Кт;зеу.;я 111 Уеубл у;: га 11,. - 11 ое 1 е в с гц зст-, .с я -.-,гру.1511 в б,;еу; - ДЕУ (;ттту,(,я Г Пуялтууу;уУТ 00 МЛ (1;,8) (У,;,етз.(де 11 Ого ацетона -20 С, теПОВОУ 5. т" ОУЕО Г( Уи Я 1 ЩУ (УУ уэ ПСУ с,1 ми 1 ) В 1 уетте 1 мевысокая су(ОтОГ: у Е ГОМОГЕНИЗЯту Об являю ГЛ яцс Т. - ,ия (-20 С,1. ПдлуЧЕЕПЛВ уГООЕЕЯГ П ЛсуО. сят В цилицдр месткуос.ьк 2 л и о:- тавляют ця 20 мин, Обряз(вявге.йсе осадок отделяют От 11,ло.тудсу,уой(-" костии ДЕ к я тут яцууе 11 пУО мыл я ю (У хл (так" дсееньем 1-20 С) ацетоном ,1 л )центрифугируют 20 мцн прп 12000 у ("20 С), Осадок ресуспендируют в 1 л еу-бутаееоля (-20 С) с последу(туцим центрифуги-.ровяцием при 12000 п в течение 20 мип1-20 С), Осадок ресуспееЕдилуют л 500 мл оклаУ(тдеуетого ацетона затем цент 1)уефугуеруу 0 Т при 12000 О 20 мине:) и сущг в зк икяторе при"20 С над А 1,10,. 1"1 еус(.я утутецарятя рявНа 5 Г. УтЕПЕ.НЯЯ ;1 ЕТЕПнот.т, КОУЛЯ"Сбт 1 Урстсцеуе Оте(сует.51 к обпя("тимедиипы, в чя.:тиости к хие(ико-феурмяуу(улти(1.кОГ еуромьуууулееиеости,Цель изобретения - повышение экономечуосгеу спОСОба За счет расшуерения сьу 151 ееоу 1 базы и упроут 1 ение у"еу(:нселОгического проце ссяСпособ осуецествлууу(У е Отедут(уууееем об.рявсм,Гомогенизат гепятопаеп(рейса крабов Рага 11 ййодез саутуйс 1 уеуус 1 са и Ег 1 о"с 11 е 1 г 3 ароп 1 са В 8-12 кра гном объемеацетона, окЕуажденного до (-15)1-20) С, 1 уазвоея:1 двореьум Обьемомацетона тоу уке температуры, осауу(даЮт Лроыьтияшт яцлтОНОМ -20 С) рЕУсуспе утур 551 ут л ., Г ьееут, ацеуоеЯЦЕНТР 1 ф 1 ттлуЮТ ттпц2(УС 0 ууу(1120 С),ттЕуя удалец 151 ЛИП ИДОЛ ра СГСГЕЕНДИруЮ т ту 1 0 ЕУ т(.:Ма ХбутяНОЛЯЦентрифуу И 1 Ууют: Для ;:уи.тк 1 я белкаОт и "бутяееола ОУСЯД(УЕ промьуВяют ЯЦетОцом Цент Ои 1 УгуУют, 11 ЕУЯ(.тв Ориме 1 уутматериал сушат под Вакуумом цядАу 0 утри -20 С л течееуие 10-12 чсП. уея 1 уят куэянят пои темперятуре-20 С.Препаууят ко 51 у(еуу"ет",у ты ттуе(сеялеуеетсОбОЙ слегкЯ Уу(елтовуутое Уз(11 естло судел 1.11 ое актиНос;1 У 931 Ог ед, ця54 г 1 репурятя э : 3." Лтопо От.(Оуе(уорьууля изобретен ия Сгуособ пал 11 чецня к Оллагенязы пу- ТЕМ ЕтцттЛЕНЬЯ ЕЕ НЗ СЫРЬЯ И ОЧИСТКИпосгуедуу 0 щез Вьусгпууевянием продукта, О Т Л И Ч с УЛ (Ц И Й С Я ТОМУ ЧТО С цельул польуеэия е 1 О экономичности за .чет рясшнр"ния сырьевае базы и уп Оутуеинеу технологического процессав качестве сьурея исг(ользуют гепят(упанкреяс крабов РЯ.Я 1 тбозез саеууу:лсйа 1- са или Гг 1 оспеуг уароп 1 са, выделение проводят,гомогениз "ци 11 в ацетоне гри соотноюеии 1: (8-12) и темпера-