Способ определения активности фагоцитов крови

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ А 1 9 СПУБЛИН И 4 С ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР ЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ ГОСУДАРС ПО ДЕЛА ЗОБРЕТЕНИ ПИ 1.-(13 БНИХ ЭТЗИдвторСКомУ свиДЕтеЛьСТВМ АКТИВНОС В 28ственный медицинниеь Ю,М.Досинк с омт В.А. -БВТ-Вев 11970, 2, 616. вс(21) 3763930/28-14(22) 11.04,84 (46) 30,07.87. Бюл(71) Минский госуд ский институт (72) Г.П.Матвейков Е.С.Калия и С.А.Кр (53) 615,375(088,8 (56) Раг 1 с В.Н. Соо вСирц 1 айей Ыпсе,(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИФАГОЦИТОВ КРОВИ(57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения - повышточности определения. Цельную крообрабатывают ультразвуком в импулном режиме, смешивают ее с растворнитросинего тетразолия и инкубируюДелают мазки, фиксируют их, окрашивают и подсчитывают формазанположительные клетки, Чувствительностьреакции в выявлении нарушения актности фагоцитоза существенно возртает при стимуляции ультразвуком.98 2за не обнаружено. При стимуляцииФагоцитирующих клеток УЗ (интенсивность 7 мВа/см, резонансная частота2,5 мГц, врейя воздействия 5 мин) уданной больной получен результат -167 Формазанположительных клеток,т.е. имеется значительное счижениепо сра.внению с результатами, полученным в норме (26,0 + 2,617).Таким образом, чувствительностьреакции в выявлении нарушения актив- .ности фагоцитоэа существенно возрастает при стимуляции ультразвуком,П р и м е р 2. Определение активности фагоцитоза со стимуляцией УЗ(с укаэанными ранее параметрами) проведено у донора Ц-ко в 10 параллельгных пробах. Результа.ты исследования:25, 24, 21, 22 р 24, 25, 21, 21, 23,227 формаэанположительных клеток,Данные статистической обработкигМ.+ гп 22,7 + 0,45,. 6= 1,7; В =4(21-25). Как свидетельствуют приведенныеданные, воспроизводимость реакциидостаточно велика, в особенности всравнении с другими способами стимуляции фагоцитоза,Точность способа по сравнению сизвестным возрастает примерно в 2-3раза. Предлагаемый способ может бытьиспользован в клинической практикеи при скрининг-обследованиях,Способ определения активности фагоцитов крови путем их стимуляции и оценки фагоцитоэа в присутствии нитросинего тетраэолия с последующим подсчетом клеток, содержащих нитросиний Формаэан, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повьппения точности, стимуляцию осуществляют путем обработки крови ультразвуком интенсивностью 6,0-8,0 Вт/см с резонансной частотой 2,64+57. мГц,Составитель В. ФроловаРедактор М, Петрова Техред И.Попович Корректор Л.Патай Заказ 3382/40 Тираж 776 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 13269Изобретение относится к медицинеи может быть использовано для определения активности фагоцитоэа при диагностике обширной группы заболеваний(аутоиммунных, инфекционньгх, наслед"ственных и т.д.).Цель изобретения - повышение точности определения.Способ осуществляется следующим 1 Ообразом.Цельную кровь в количестве 3 мл,помещенную в пластмассовую пробиркудиаметром 12 мм, обрабатывают ультразвуком в импульсном режиме (датчик 5с резонансной частотой 2,64 + 5 Е мГци диаметром 10 мм) в течение 5 мин,после чего производят постановкуНСТ-теста путем смешения равных количеств (1,0 мл) обработанной крови 20-и О, 17"ного раствора НСТ в забуференном фосфатным буфером физиологическом растворе (рН 7,2) с последующей инкубацией смеси в термостатепри 37 С 15 мин и 15 мин при комнатной температуре (20-22 С). Далее иэсмеси кровь - НСТ делают мазки, которые фиксируют метиловым спиртом 3 мини окрашивают смесью пиронин - метиловый зеленый по Папенгейму, Производят подсчет ( ) формаэанположительных клеток (увел,х 1000),П р и м е р 1, Вольная М-я С.В21 г., история болезни У 676/48 эа1984 г. Диагноз: системная красная Ф о р м у л а и з о б р е т е н и яволчанка, активная фаза 11 степеньактивности, подострое течение, люпуснефрит, полиартралгия, миокардиодистрофия.При определении активности Фаго Оцитоза тестом с нитросиним тетраэолием беэ стимуляции УЗ получены результаты: 87 формазанположительныхклеток (в группе доноров - 9,0 ++ 1,27), Таким образом, существенныхотклонений от нормы со стороны данного показателя активности фагоцито