Способ приготовления диагностических типоспецифических противоботулинических сывороток типов а, в, с, е

ОПИСАНИЕИ ЗОВееЕТЕ Н ИЯК АВТОУ СКОМУ СВИДИТВЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистицескихРеспублик(43) Опубликовано 15 09 29603/31-16 А 61 К 35/1 ееударетееаые кеметет Совете 1 евеетрее ССС ее дедам еэебретееее я еткрмтее(46) Бата опубликования опнсання 04,08,78 4) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ТИПССПЕПИфИЧЕСКИХ ПРОТИВОБОТУЛИНИЧЕСКИ СЬ 1 ВОРОТОК ТИПОВ А, В, С, Е,Изобретение относится к способам прк.отовпения диагностических типоспецифических противоботупинических сывороток типов А, В, С, Е путем иммунизации пошадей. Предлагаемый способ отличается от известного тем, что, с целью повышения специфичности сывороток, подбирают пошадей, имеющих в сыворотке крови не более одного типа противоботупинического антитоксина, и иммуниэируют их проверенным на специфичность анатоксином, попученным из высокотоксигенного штам- маСС.ВоСцС 4 йов при 35 С на пепсинпептонном бульоне ипи рыбо-кукурузной среде (дпя типов А и В), на бупьоне Хоттингера ипи среде иэ кислотного гидропиэата каэеина с добавлением кукуэного:экстракта (для типа С) и при 28 С на бульоне Хоттингера и рыбо-казеиновой среде (дпя типа Е)Лошади, в сыворотке крови которых содержится несколько типов естественных ботупинических антитоксинов, не могут быть использованы дпя иммунизации с пепно получения указанных сывороток.Боту инические анатоксины типов Аои В готовят при 35 С из токсинов, подученных как на пенсии-пептонном бупьоне, так и на рыбо-кукурузной среде, имеюшей в своей основе сопянокиспотный гидропиэат рыбной и кукурузной муки.Рыбо-кукурузная среда имеет спедующ ший химический состав, мг:Общий азот 300-400Белковый азот 100-150 Аминный азот 80-120 На этих средах получают ботупиничес 1 з кие токсины типа А активностью 2000001000000 ед/мп дпя белых мышей, типа В-1000000 ед/мп из которых попучаются высокоиммуногенные анатоксины с антитоксиннсь-связывающей спо собностью 0,01-0,003 мл,Ботупинические анатоксины типа С готовят при температуре 35 С как на бупт оне Хоттингера, так и на среде из киспотного гидропизата казеина с добавпе- И нием в качестве источника факторов роо1285 гоСпособ приготовления диагностических типоспецифических противоботулинических сывороток типов А В, С, Е путем иммунизации лошадей, о т л и ч вю ш и й с я тем, что, с цепью повышения специфичности, подбирают лошадей,имеющих в сыворотке крови не более одного гипа прогивобогулинического антигоксина, и иммунизируюг их провереннымнв специфичность анагоксином, полученным из высокогоксигенноо штаммаС 6 Ьо 1011 ьив при 35 С нв пепсинпептонном бульоне или рыбо-кукурузнойсреде для гипов А и В), на бульоне З 5 Хоггингера или среде из кислотного гидролизага казеина с добавлением кукурузоного экстракта (для гипа С) и при 28 Сна бульоне Хоггингера и рыбо-казеиновой среде (для гипв Е). та 3% кукурузного экстракта, Казеиноваясреда должна иметь следующий химический составр мг:Общий азот 230-300Белковый азот 130-1805Аминный азот 90-120Токсины, полученные на этой среде,имеюгакгивносгь 500000-1000000 ед/млна среде Хоггингера 10000-200000 ед/млдля мышей, из которых получаюгся высо Окоиммуногенные анагоксины с ангигоксиносвязуюшей способность 0,01-0,003 мл.Ботулинические анатоксины типа Еоготовят при температуре 28 С нв бульонеХоттингера и на рыбо-казеиновой среде, 15включающей смесь кислотного гидролизата рыбной муки с кислотным гидролизатом казеина, В качестве источника фактров роста добавляют 3% кукурузногоэкстракта, Рыбо-казеиновая среда должна иметь следующий сосгав, мг:Общий азот 1 50-230Белковый азот 35-60Аминный азот 7 0-130На этих средах сила токсина типа Еравна от 50000 до 150000 ед/млдпя мышей,Токсин перед обезвреживанием обязательно проверяется на специфичность путем посгановки реакции нейтрализации.К 5-7-суточным фильгрвгам культурдобавляют 8% формапина. Сбезвреживвниеопродолжается при температуре 38 С оттрех до четырех недель, в зависимостил.от типа обезвреживаемого токсина.Проверку стерильности антигена производят, согласно инструкции, по проверке бвкпрепаратов. Антиген высеиввютна среду Тароцци полужидкий агар,68 4сахарный бульон, косой агар и средуСабуро, Высевы выдерживаются в термостате на первых двух средах 21 день,на остальных средах 7-8 дней.Иммуногенные свойства проверяютсяна пяти морских свинках, каждой из которых вводится 5 мл антигена. Черезчетыре недели всем морским свинкам вводигся под кожу 100 едсоогвегсгвующего гоксина. Токсин типа Е вводится в дозедо 30 ед. Антиген считается имеющимудовлетворительные иммуногенные свойства, еспи более 50 О/о морских свинокостаются здоровыми,Проверенные на сгерильносгь, безвредность и иммуногенные свойства анатоксины пригодны для иммунизации лошадей. формула изобретенияРедактор Е, Месроповв Техред Е, Давидович Корректор Л, ВеселовскаяЗаказ 5225/50 Тираж 703 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Рвущская набд, 4/5 филиал ППП "Пвтентф, г. Ужгород, ул, Проектная, 4