Способ выявления антигенов и специфических антител в биологических жидкостях при одномоментном исследовании

Номер патента: 1194423

Авторы: Беликова, Комаров, Терентьев

ZIP архив

Текст

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН К 39 00 13 й":.1, БНЛИ 1,ТЕ 1,А ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬ(7 1) 2-й Московский ордена Ленинагосударственный медицинскийинститутим. Н.И, Пирогова(54) (57) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНО И СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ В БИОЛОГИЯО, 1194423 А ЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ ПРИ ОДНОМОМЕНТНОМИССЛЕДОВАНИИ путем инкубированияв геле исследуемой жидкости с антигеном и специфической к нему антисывороткой споследующим определением полос преципитации, о тл ич а ю щ и й с я тем, что с цельюповышения чувствительности способа,инкубирование исследуемой жидкостиантигена и специфической антисыворотки осуществляется в постоянномэлектрическом поле с напряжением1-5 В/см, при этом лунки в контактном геле, содержащие исследуемуюжидкость, располагают между зонамигеля с антигеном и геля с антисывороткой;1194423 Составитель Г.Крюкова Техред О. Неце Корректор М,Самборская Редактор Т,Митейко Тираж 721 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж; Раушская наб д. 4/5 Заказ 7342/7 Филиал ППП "Патент"., г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к биохимии, а именно к способам иммунохимическога определения антигенов и специфических антител в биологических жидкостях.Цель изобретения - повьппение чувствительности способа.Способ осуществляется следующим образом.На стеклянную пластину равномерным слоем заливают гель агарозы в 0,05 М веронал-мединаловым буфере, рН 8,б, причем на одну сторону пластины заливают гель, содержащий специфическую антисыворотку к исследуемым антигенам, на противополож. ную сторону-полоску геля с антигеном а между ними, в слое контактного геля, располагают лунки для исследуемых образцов биологических жидкостей. Затем подготовленную пластину помещают в специальную камеру для иммуноэлекрофореза и производят электрофорез в постоянном электрическом поле с напряжением 1-5 В/см в течение 15-20 ч, При этом положительный полюс располагают со стороны геля с антисывороткой, а отрицательный - со стороны геля . с антигеном. Марка агарозы, выбираемой для исследования, зависит от подвижности определяемых антигенов. Концентрации аптигена и сыворотки в геле подбирают эмпирически в зависимости от вида антигена и .качества антисыворотки. При отсутствии антигенов и антител в исследуемом биологическом материале линия преципитании будет иметь вид.прямой, параллельной полоске геля с анти- геном, если в исследуемом материалеприсутствует антиген, иммунохимически идентичный тестируемому, то линия преципитации сместится к анодув виде пика, при наличии в пробе антител, специфических тестируемомуантигену-пик в сторону катода. Высота пиков прямо пропорциональнаконцентрации антигенов или антител 5 в исследуемых биологических жидкостяхП р и м е р. На пластину равномерным слоем заливают гель агарозыв 0,05 М веронал-мединаловом буфере, 1 О рН 8,6, причем на одну сторону пластины - гель, содержащий 57 анти"сыворотки против органоспецифического антигена сетчатки, а на противоположную сторону-полоску геля 15 с экстрактом сетчатки. Между нимив слое контактного геля располагаютлунки с исследуемыми образцами(экстракт сетчатки, антитела к органоспецифическому антигену сетчатки, 20 сыворотку больного увеитом, содержащую органоспецифический антигенсетчатки, сыворотку крови больногохориоретинитом, содержащую антителак органоспецифическому антигену 25 сетчатки, сыворотку донора). Подготовленную пластину помещают в камеру для иммунозлектрофореза и проводят иммуноэлектрофорез с напряжением электрического поля 3 В/см Зц в течение 18 ч.По окончании электрофореза напластине получена линия преципитации,имеющая пики, направленные в сторону положительного полюса, и впадины, направленные в сторону отрицательного полюса. По величине полученных пиков и глубине впадин опре-делена концентрация антигена и антител.Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить чувствительность определения антигенов до 100200 нгмл и антител до 200-400 нг/мл,т.е. в 10 раз по сравнению с прототипом.

Смотреть

Заявка

3597023, 25.05.1983

2-Й МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ ИМ. Н. И. ПИРОГОВА

БЕЛИКОВА ТАТЬЯНА ВИТАЛЬЕВНА, ТЕРЕНТЬЕВ АЛЕКСАНДР АЛЕКСАНДРОВИЧ, КОМАРОВ ОЛЕГ САМУИЛОВИЧ

МПК / Метки

МПК: A61K 39/00

Метки: антигенов, антител, биологических, выявления, жидкостях, исследовании, одномоментном, специфических

Опубликовано: 30.11.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1194423-sposob-vyyavleniya-antigenov-i-specificheskikh-antitel-v-biologicheskikh-zhidkostyakh-pri-odnomomentnom-issledovanii.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выявления антигенов и специфических антител в биологических жидкостях при одномоментном исследовании</a>

Похожие патенты