Способ выявления гемадсорбирующих свойст вируса гриппа

Номер патента: 1505021

Авторы: Бореко, Клингер, Судник

Формула

СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ГЕМАДСОРБИРУЮЩИХ СВОЙСТ ВИРУСА ГРИППА путем инфицирования клеточного пласта, инкубации, проведения реакции гемадсорбции и оценки результатов по хемилюминесценции гемоглобина, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, на инфицированные клетки предварительно наносят раствор гидрохлорида -метил-1-аминометиладамантана в концентрации 2,3 х 10-4 4,5 х 10-4 М.

Описание

Изобретение относится к вирусологии, в частности к лабораторному изучению вирусов гриппа.
Цель изобретения повышение чувствительности способа.
П р и м е р. 24-часовые монослойные культуры фибробластов эмбрионов кур (ФЭК), сформированные на дне пенициллиновых флаконов, отмывают от ростовой среды, инфицируют вирусом гриппа A/FPV/Rostock, проводя для этого в течение 1 ч контакта клеток с вируссодержащей жидкостью из расчета 0,0001 БОЕ/клетка вируса, дополняют объем жидкости до 2,0 мл средой 199, инкубируют 8 ч в термостате. Затем культуральную жидкость удаляют, монослой дважды промывают фосфатным буфером Дульбекко (рН 7,2), наносят на клетки 2,0 мл раствора ремантадина в конечной концентрации 2,3 10-4 М и вслед за ним равный объем 0,8% -ной взвеси эритроцитов на этом же буфере. На контрольные культуры наносят 4,0 мл 0,4% -ной взвеси эритроцитов. После 20 мин инкубации при комнатной температуре взвесь эритроцитов сливают и монослой клеток трижды промывают фосфатным буфером, не содержащим ионы кальция и магния. Далее во флаконы вносят по 0,4 мл бидистиллированной воды и оставляют на холоде на 2 ч. Количество гемоглобина определяют хемилюминесцентным способом, используя в качестве регистрирующего прибора жидкостный сцинтилляционный спектрометр. В сцинтилляционные флаконы вносят 2,0 мл NaOH-фосфатного буфера (рH 12,0), добавляют 10-3 М перекиси водорода в объеме 1,0 мл, замеряют фоновую интенсивность свечения, вводят исследуемую пробу и снова снимают показания.
Получают 1,7-кратный прирост интенсивности хемилюминесценции в сравнении с инфицированными культурами, не обработанными препаратом, соответствующей увеличению количества гемоглобина, вышедшего из прикрепившихся к ткани эритроцитов (см. таблицу). Использование способа позволяет повысить чувствительность способа за счет улучшения адсорбции эритроцитов на поверхности инфицированных клеток.
Изобретение относится к вирусологии, в частности к лабораторному изучению вирусов гриппа. Цель изобретения - повышение чувствительности способа. Клеточный пласт инфицируют вирусом, затем проводят предобработку инфицированного монослоя клеток раствором гидрохлорида -метил-1-аминометиладамантана (ремантадина) в концентрации 2,3 х 10-4 - 4,5 х 10-4 М, после чего ставят реакцию гемадсорбации и результаты оценивают по хемилюминесценции гемоглобина. Чувствительность увеличивается в 1,7 раз. 1 табл.

Рисунки

Заявка

4289080/13, 24.07.1987

Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии

Бореко Е. И, Клингер Ю. Е, Судник Ю. М

МПК / Метки

МПК: C12N 7/00

Метки: вируса, выявления, гемадсорбирующих, гриппа, свойст

Опубликовано: 27.04.1996

Код ссылки

<a href="https://patents.su/0-1505021-sposob-vyyavleniya-gemadsorbiruyushhikh-svojjst-virusa-grippa.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выявления гемадсорбирующих свойст вируса гриппа</a>

Похожие патенты