Способ получения макролидных антибиотиков

Комит по пат ОПИСАНК ПАТЕНТУ ИЗОБРЕТЕН ьР н,с М Российской Федерации там и товарным знакам(71) Американ Цианамид Компани (ОЗ) (72) Джон Бэрри Вард(ОВ); Хейзел Мэри Нобл(ОВ); Нил Портер(ОВ); Ричард Алан флеттон(ОВ); Дэвид Нобл(ОВ); Дерек Рональд Сатерлэнд(ОВ); Майкл Винсент Джон Ремсей(ОВ)(73) Американ Цианамид Компани (ОВ) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ММРОДИДНЫИ АНТИБЫ".МИХОВ(Я 1) Я С 07 Р 493 22 А 61 К 31 335 ный атомом галогена, или ОСО Я, где Яба баС -С алкил или бензил. Реагентов: соединение фт 4лы 1, где Я =ОН =ОН; Я =Н Н; ОЯ - защищенная2 3, 4гидроксильная группа Реагент 11: окислитель такой,как бихромат пиридиния или М, Й -диметилсульфоксид. Условия реакции; в присутствии активирующего средства, такого как оксалилхлорид, всреде органического растворителя при т-ре от70 С до 22 С с последующим удалением в случаенеобходимости щелочным гидролизом защищае 4мой ОЯ группы, и выделением соединения ф-лы 1,4где ОЯ -ОН - ОН группа, или действием ацилирующего агента переводят его в соединение ф-лы1, где ОЯ -ОСОЯ группа или ОСО Я группа Су 4 бточная доза саед составляет 1 - 2000 мг/кг весатела Активность против сомнительных нематоспироидов у мышей в дозе 10 мг/кг (подкожно) составляет 50 -82%, 2 табл, 2004545Изобретение относится к новым соединениям антибиотика и способам их получения,Известно получение антибиотиков 8 541, которые можно выделить из продуктов Ферментации вида 8 сгерсовусез, Антибиотики 8 541 представляют собой группу родственных соединений, имеющих неполную формулу T сн сн,0-зБыла выявлена дополнительная группе соединений, обладающих антибиотической активностью, которые можно получить посредством химической модификации антибиотиков 8 541 или путем выделения их из культуры микроорганизмов рода 8 сгерсовусез. Новые соединения предлагаемого способа обладают антибиотической активностью и/или применяются как промежуточные продукты при получении дру гих активных соединений и/или привыделении или очистке соединений антибиотиков 8 541.Соединения предлагаемого способапредставляют собой 2 Э-кетон, 2 Э-деокси, . 23-гидроксил или эамещенные гидроксильные аналоги антибиотиков 8 541, которые имеют гидроксильную или замещенную гидроксильную группу в положении 5.Таким образом предлагается способ получения соединений формулы 1 снз ,снасн где В - метил, атил или иэопропил;В и В вместе с атомом углерода, к которому они присоединяются, представляют-С О группу;ОВ 4 - гидьроксильная группа или О СОВ группа, где Я - С 1-С 4-алкил, неэамещенный или замещенный атомом галогена, или О СР 2 В а ГруППа. ГдЕ В 8- - С-С 4 аЛКИЛ ИЛИба бенэил.Как указывалось, соединения предлагаемого способа могут применяться в качестве антибиотиков и/или как промежуточные соединения для получения других активных соединений и/или при выделении и очисткесоединений антибиотиков 8 541. 8 том случае, когда предлагаемые соединения приходится использовать как полупродукты, В5 и/или -ОВ могут быть защищенными гидро 4ксильными группами. Такая группа должнаиметь минимальное количество дополнительных Функциональных групп, чтобы избежать дополнительных реакционных10 цепей и должна быть такова, чтобы сталовозможным избирательно восстанавливатьиэ нее гидроксильную группу. Примеры защитных гидрокильных групп известны.Примеры В и ОВ защищенных гидро 15 ксильных групп включают феноксиацетокси, силилоксиацетокси, напримертриметилсилилоксиацетокси и трет-бутилдиметилсилилоксиэцетокси, и силилокси,например триметилсилилокси и трет-бутил 20 диметилсилилокси. Предлагаемые соединения, содержащие такие группы, будутглавным образом использоваться в качествепромежуточных соединений. Другие группы, например ацетокси, могут выступать как25 защищенные гидроксильные группы, нокроме того могут присутствовать в целевыхактивных соединениях,Заявленные соединения обладают антибиотической активностью, например анЭ 0 тигельминтной активностью, напримерпротив немэтодов, и в частности антиэндопараэитарной и антиэктопаразитарной активностью.Эктопараэиты и эндопаразиты эаража 5 ют людей и целый ряд животных и особенноимеют широкое распространение среди сельскохозяйственных животных таких кэк свиней, овец, крупного рогатого скота, коз и домашней птицы, лошадей и домашних жи вотных, например собак и кошек, Параэитатнэя инфекция домашнего скота, приводящая к анемии, недостаточности питания и потери веса, является основной причиной экономических потерь во всем мире, 45 К представителям эндопараэитов, заражающих укаэанных животных и/или людей относятся Апсу 1 озсова, Азсаг 1 б 1 а, Азсаг 1 з, Азр 1 сц 1 аг 1 з, Вго 91 а, Вцпозсовцв, Сар 11 аг 1 а, СЬаЬегс 1 э, Соорег 1 а. О 1 ссуосао 1 цз, Р 1 го 61 аг 1 а, 50 Огасцпсц 1 цз, ЕпсегоЫцз, НаевопсЬцз,, Несегайз, 1.оа, йесасог, йевасоб 1 гоз,йевасозр 1 го 1 без, Не 11 цопюа 1 без, й 1 ррозсгопцу 11 з, ОезорЬаоозсовов, ОпсЬосегса. Озсегсао 1 а, Охуог 1 з, Рагазсагз, 8 сгопсу 1 з, 8 сгопоу 1 обез, 8 урЬаса, Тохазсагез, Тохосага, Тг 1 сЬопева, Тг 1 сЬозсгопсу 11 з, ТгсЬ 1 пеПа, ТгсЬог 1 з. Опс 1 паг 1 э о УУосЬагег 1 а.Примерами эктопараэитов, заражающих животных и/или людей являются членистоногие эктопараэиты. например жалящие50 55 насекомые, падальная муха, блохи, вши, клещи, сосущие насекомые, искодовые клещи и другие двукрылые насекомые - вредители,К примерам такого рода эктопаразитов, заражающих животных и/или людей относятся АгпЬуоввз, ВоорЫ 1 цз, Сапогортез, Сц 111 рйоге, Оевобех, Оева 11 еп 1 а, ОегватоЫса, ОазтгорЫ 1 цз, НаеватоЫа, Наеватор 1 пцз, НаепорЬузаИз, Нуа 1 овва, Нурегбегва, 3 хобез,1 подпайцз, 1.цсИ 1 а, Ме 1 орЬадцз, Оезтгиз, ОтоЫцз, Особестез, Р з о ге гд ае з, Р зо го рте з, й Ы р 1 се р Ь аа з, Яагсортез, Ятовохуз, ТаЬапцз.Обнаружено, что предлагаемые соединения эффективно действуют как 1 п чтго так и 1 п ч 1 чо против широкого ряда зндопаразитов и эктопаразитов, В частности обнаружено,. что предлагаемые соединения активно действуют против нематодов, таких как НаевопсЬцз соп 1 огтцз, Оз 1 егтад 1 а, с 1 гси вс 1 псса, 1 гсЬозтгопдц 11 з со 1 цЫ 1 огв 1 з, 01 суосац цз ч 1 чраг 1 з, Сосрег 1 а опсорЬега, Озсегад 1 а озтегтад 1, Кеватозр 1 го 1 без бцЫцз ц К 1 ррозтгопдуцз Ьгаз 1 Иепз 1 з, и паразитарных клещей, как например Яагсортез зр. ц Рзогортез зр. Таким образом предлагаемые соединения находят применение при лечении животных и людей с эндопаразитарной и/или эктопаразитарнсй инфекциями.Виды паразитов меняются в соответствии с хозяином (животным) и доминирующим местонахождением инфекции. Следовательно, например, возбудители НаевопсЬцз соптогтцз, Озтейад 1 а с 1 гсцвс 1 пста и Тг 1 сЬозтгспду 1 цз со 1 цЬИогвез обычно поражают овец и преимущественно локализуются в желудке и тонкой кишке, в то время как Оссуосаи 1 из ч 1 ч 1 раг 1 з, Соорег 1 а опсорЬога ц Озсепада озсегсад 1 обычно поражают крупный рогатый скот и локализованы, главным образом в легких, кишечнике или желудке, соответственно.Антибиотическая активность предлагаемых соединений может быть продемонстрирована, например, своей активностью 1 п ч 11 го против свободно живущих нематодов, например СаепогЬаЬбез е 1 едапз.Кроме того заявленные соединения находят применение в качестве противогрибковых веществ, например против штаммсв Сапб 1 ба, таких как Сапбба аЬ 1 сапз и Сапб 1 ба 91 аЬгата, и против дрожжей, таких как ЯассЬаговусез сагзЬегдепз 1 з.Предлагаемые соединения кроме того могут применяться в борьбе с вредителями- насекомыми, клещами и нематодами в сельском хозяйстве, садоводстве, лесоводстве,5 10 1,5 20 25 30 35 40 45 здравоохранении и хранении продуктов, Ими можно успешно обрабатывать вредителей почвы и сельскохозяйственных кул тур, включая хлебные злаки, например пшеницу, ячмень, маис, рис, овощи, например сою, фрукты, например яблоки, виноград и цитрусовые, а также корнеплоды, например сахарную свеклу и картофель. Характернымй примерами таких вредителей являются фруктовые клещи и тля, например АрЫз 1 аЬае, Ац 1 асогт 1 тцв с 1 гсцвйехив, Мугцз регз 1 сае, КерЬотетт 1 х с 1 псбсерз, КИрагчата цдепз, РапопусЬцз ив. РЬогобоп ЬцвцИ, РЬуИосор 1 гма о 1 е 1 чога, ТетгапусЬцз ипсае и представители рода Тг 1 а 1 еиго 1 без нематоды, например представители рода Арйе 1 епсо 1 без, 01 оЬобега, Не 1 егобега, Ме 1 о 1 додупе и РападгеИиз, чешуйчатые, например НеИойз, Р 1 ц 1 еИа ц Яробортега, долгоносик-каландрина, такие как Апйоповиз дгапб 1 з ц ЯеорЫцз дгапаг 1 цз, хрущаки мучные, например Тг 1 ЬоИцв сазтапецв, мухи, например Мцзса бовеп 1 са, муравьи Рихтера, моли-минеры (узкокрылые), Реаг рзуИа трипсы табачные, таракановые, например В 1 атеИа дегвап 1 са и Регр 1 апета агпег 1 сапа, москитные, как например Аебез аедурт 1,В соответствии с предлагаемым способсм предложены соединения формулы, как ука ывьчссь, которые могут быть использованы в качестве антибиотиков, В частности их можно использовать при лечении животных и людей, пораженных зндопаразитарной, эктопаразитарной и/или грибковой инфекциями и в качестве пестицидов для борьбы с вредителями-насекомыми, клещами и нематодами, в сельском хозяйстве, садоводстве или лесном хозяйстве. Их можно применять кроме того обычно в качестве пестицидов в других обстоятельствах, например в хранилищах, зданиях или других общественных местах или местах локализацли сельскохозяйственных вредителей. Предлагаемые соединения могут быть применены либо к хозяину(животному или человеку), либо к культурным растениям или другой растительности, либо к самим вредителям или месту их расположения. Заявленные соединения могут быть сформулированы для приема в любой удоб ной форме при использовании в ветеринарии или практической медицине. Таким образом предлагаются фармацевтические композиции, содержащие предлагаемое соединение, пригодное для применения в ветеринарии или терапии. Такие композиции могут быть представлены при использовании в традиционной форме с помощью одного или нескольких подходящих носителей или напслнителей.ты ри- ис- мой нии в ветеринарииеделии, и в случае. Предлагаемые композиции содержатсоставы в фооме, особенно пригодной дляпарентерального, в том числе введениевнутрь молочной железы, орального, реактального, местного применения в виде имплантанта, для применения при глазных,ушных или заболеваниях мочеполовой системы, подходящими способами и агентамидля приготовления состава предлагаемыхсоединений, пригодногодля использованияв ветеринарии или терапии, являются известные способы.Заявленные соединения можно применять в комбинации с другими фармацевтически активными ингредиентами,Суммарная суточная доза предлагаемых соединений, применяемая как вветеринарии, так и в терапии, будет соответственно в интервале 1-2000 мг/кг весатела, предпочтительно 50-1000 мгlкг, причем укаэанные дозировки можно приниматьв дробных дозах, например 1-4 раза в день,Заявленные соединения можно составлять в любой удобной форме, пригодной для земледелия или садоводства. Такимобразом предлагаются составы, содержащие соединение, предназначенное для при менения в земледелии или садоводстве.Такие рецептуры включают сухие или жидкие формы, например дусты, включая пылевидные субстраты или концентраты,порошки, в том числе растворимые или смачиваемые порошки, гранулы, включая микрогранулы и диспергируемые гранулы,таблетки, текучие вещества, эмульсии, на.пример разбавленные эмульсии или эмульгируемые концентраты, пропиточныесоставы, например составы для пропиткикорней и семян, протравливатели семян, семенные гранулы, масляные концентраты,масляные растворы, иньекции, напримеринъекции в ствол, растворы или опрыскивания, дымы и туманы.Подходящие способы и агенты для составления рецептуры предлагаемых соединений для применения в садоводстве илиземледелии включают известные соединения,При составлении рецептуры концентрация активного вещества обычно составляет0.01 - 99 мас.% и более предпочтительно от0.01 - 40 мас.%.Промышленные (товарные) продукобычно приготовлены в виде концентрованных композиций, которые припользовании разбавляют до требуеконцентрации, например 0,0010,0001 мас.%,При испольэова илив садоводстве и земл ког. 5 10 15 20 25 30 35оксильная грм водорода;щищенная гид ппа. оксильная группа,подвергают окислению действием окислителя, таким как бихромат пиридиния или й,й-диметилсульфоксид, в присутствии активирующего средства. такого как оксалилхлорид, в среде органического растворителя при температуре от -70 до 22 С с последующим удалением в случае необходимости щелочным гидролизом защищаемой ОВ -группы, и выделением соединения4формулы . где ОВ -гидроксигруппа, или4действием ацилирующего агента переводят его в соединение формулы 1, где ОВ -ОСОВ 6 группа или ОСО 2 В группа. да предлагаемые соединения являются продуктами, образуемыми посредством ферментации, желательно использовать весь бродильный бульон в качестве источника активных соединений. Кроме того может быть пригодным использование обеэвоженного бульона, содержащего мицелий или мицелия, отделенного из бульона и пастериэованного, или более предпочтительно высушенного. При желании укаэанный бульон или мицелий может быть сформирован в композиции (как указывалось), включающие традиционные инертные носители, наполнители или раэбавители,Антибиотические соединения предлагаемого изобретения могут вводиться и применяться в комбинации с другими активными ингредиентами.8 частности предлагаемые соединения антибиотика могут использоваться вместе с соединениями антибиотиков 8 541 или с другими антибиотическими соединениями изобретения. Это может возникнуть, например. в случае, когда неочищенные продукты брожения взаимодействуют согласно предлагаемому способу без предшествующего или последующего отделения (укаэанное Может быть предпочтительным, например, при использовании соединений в земледелии, где важно обеспечить (сохранить) низкую себестоимость продукции).Заявленные соединения можно получить следующим образом, Соединение формулы И в-70 С в атмосфеое азота обработан по каплям раствором диметилсульфоксидом (3,19 мл) в сухом дихлорметане (15 мл) и затем по каплям раствором 5-ацетокси Фактора А (4,91 г) в сухом дихлорметане. (30 мл), 5 Полученный раствор тщательно перемешивают в течение 1,5 ч при температуре -70 С, прежде чем обработать по каплям раствором триэтиламина (12,6 мл) в сухом дихлорметане (40 мл). Реакционную смесь 10 перемешивают в течение 1,25 ч без охлаждения и выливают в смесь (1:1 холодной воды и простого эфира. Водный слой экстрагируют простым эфиром, Соединившиеся органические слои промывают водой, соля н ым раствором, высушивают и выпаривают.Остаточную пену хроматографируют на двуокиси кремния, используя смесь дихлорметана с ацетоном (50:1) с получением названного соединения (3,4 г); (СОС 1 з) со держит 3,33 (м; 1 Н), 3,49 (м; 1 Н), 3,70 (д 10;1 Н) и 5,52 (д, 5; 1 Н), м/з содержит 652, 634, 609, 591, 574, 482, 263, 235 и 151.П р и м е р 2. 23-кето - Фактор А.Соединение примера 1 (276 мг) в 25 метаноле (5 мл) при температуре 0 С обрабатывают по капле раствором 2 й-натрийгидроксида (0,42 мл) в метаноле(1,0 мл).Перед тем как вылить раствор в холодную воду его выдерживают при температуре 5 С ЗО в течение 5 ч, Смесь экстрагируют простым эфиром и этилацетатом. Соединившиеся органические слои промывают соляным раствором, высушивают и выпаривают с получением твердого вещества, которое 35 очищают препаративной тонкослойной хро. матографией, используя в качестве растворителя смесь дихлорметана с ацетоном (10:1) для получения названного соединения (140 мг). 40(СОС 1 з) содержит 3,28 (м; 1 Н), 3,48 (М;1 Н), 3,70 (д 10, 1 Н) и 4,28 (трг, 1 Н), м/3 включает 592. 549, 482, 370. 263, 235 и 151,П р и м е р 3. Фактор А. 5-хлороацетат, 23-кето н. 45Раствор Фактора А, 5-хлорацетата (276 мг) и дихромата пиридина (602 мг) в сухом й,й-диметилформамиде 10 мл) пере. мешивают при температуре 20 С в.течение48 ч и затем вливают в смесь этилацетата 50 (50 мл) и 2 М-хлористоводородной кислоты (25 мл). Органическую фазу промывают 2 йхлористоводородной кислотой и насыщенным бикарбонатом натрия, высушивают (сульфат магния) и выпаривают до сухости. 55 Остаток очищают хроматографией на колонке Кезб 9 е 60 (25 г). Элюирование колонки смесью петролейного эфира и этилацетата (4;1) дает названное соединение 85 мг) в качестве бесцветной пены, ао +120 (с 1,05, СНС 13), Ягпах(Е ОН) 245 нм (Е 26500) йпах (СНВгз), 3480 (ОН), 1760 (хлорацетат) и 1715 см (сложный эфир и кетор, д(СОСз) включает 5,5-5.7 (м, 2 Н), 4,17 (с, 2 Н), 3,72 (д, .1=10 Гц, 1 Н), 2,50(с, 2 Н) и 0,85(д, 1=7 Гц, ЗН), м/э=686 (М, 35 С 1),П р и м е р 4, Фактор А, 5-метилкарбонат, 23-кетон (830 мг).а 0+132 (с 0,82, СНС 13), Явах (ЕВОН) 245 нм (Ет 29800), тгвах (СНВгз) 3560 и 3500 (ОН), 1745 (карбонат) и 1710 см (сложный эфир, д (СРС 1 з), включает 5,40 (с, 1 Н), 4,80 и 4,70(АВ 91=14 Гц, 2 Н),4,28 (м, 1 Н и 0,79 (д, ,1=7 Гц, ЗН),П р и м е р 5: Фактор А. 5-бензилкарбонат, 23-кетон (57 мг),ао+99 (с 0,4, СНС 1 з), Явах (ЕВОН) 245,5 нм (Ет 29600) Рвах (СН Вгз) 3600 3550 и 3480 (ОН), 1740 (карбонат) и 1715 см (сложный эфир и кетон), д (СОСз) включает 7,5-7,2 (м, 5 Н), 5,57(с, 1 Н) 5,21(с, 2 Н), 3,70(д, 1-10 Гц, 1 Н), 2,49 (с, 2 Н) и 0,86 (д, 1-6 Гц, ЗН), из фактора А, 23-кетона (92 мг) и бензилхлорформата (0,05 мл),П р и м е р 6. 5-Ацетокси, 23-кето-фактор О (152 мг),Температура плавления 228-230 (а)о "+84 (с 0,6, СНС 1 з), Ягпах244,5 нм (Егпах 31100), дгпах (СНВгз) 3500 (ОН), 1732 и 1714 см (сложный эфир и кетон), д(СОС 1 з) 0,86(д,б Гц,ЗН), 0,98(д,б Гц,ЗН), 1,00(т,7 Гц, ЗН), 1,49 (с, 3 Н), 1,67 (с, 3 Н, 1,74 (с, 3 Н), 2,14 (с, ЗН), 3,33 (м, 1 Н), 4,03 (д, б ц, 1 Н, и 5,5-5,6 (м, 2 Н), м/э=638 (М+).Из 5-ацетокси-Фактора О (336 мг) аналогичным образом для соединения примера 1П р и м е р 7. 23-кето-Факто+) О (59 мг).ао +84 (с, 0,4, СНОз)Явах 144,5 нм (Евах 28000), тгвах (СН Вгз) 3550 и 3500 (ОН) и 1712 см(сложный эфир и кетон), д (СОС 1 з) 0,86(д, б Гц,ЗН), 0,98(д,7 Гц,ЗН), 1,00(т,7 Гц, ЗН), 1,50 (с, 3 Н), 1,68 (с, 3 Н), 1,86 (с, 3 Н), 3,27 (м. 1 Н), 3,73 (д, 10 Гц, 1 Н), 3,95 (д, 6 Гц, 1 Н и 4,27 (т, 6 Гц, 1 Н), из 5-ацетокси-кето Фактора О (96 мг), аналогичным образом для соединения примера 2.П р и м е р 8, 233-Кето фактор В (160 мг).Т.пл, 213-215 С (размягчение примерно при209 СО /а/о +122 (с=0,36, СНС 1 з), ЯвахПодходящий растворитель может быть выбран из группы кетона, например ацетона, простого эфира, например диэтилового эфира, диоксана или тетрагидрофурана, углеводорода, например, гексана, галогензамещенного углеводорода, например хлороформа или метиленхлорида, или сложного эфира, например этилацетата, или замещенного амида, например диметилформамида. В реакции можно также использовать комбинации указанных растворителей либо одних, либо с водой,Реакцию можно проводить при температуре от -80 С до+50 С,Очистку и/или отделение предлагаемых соединений можно осуществлять традиционными методами, например хроматографией, включая высокоэффективную жидкостную хроматографию на соответствующей подложке, такой как двуокись кремния, нефункциональная макросетчатая .адсорбционная смола, например поперечно-сшитые полистирольные смолы, такие как смолы АвЬегИте ХА 0-2, ХАОили ХАО (Яопа Наив лб.) или смола Я 112 (Козтее 1 лб.), или поперечно-сшитый декстран, смешивающийся с органическим растворителем, например Яерпабех Н 20 (Рпаггпас 1 а ОК Об) или в случае высокоэффективность жидкостной хроматографии такой на подложках с обратной фазой, таких как углеводород, нанесенный на двуокись кремния, например С 1 в-сшитая двуокись кремния, Подложка может быть в виде слоя с насадкой, заполняющего колонну, В случае использования нефункциональных макросетчатых смол, например ХАОили Я 112, для элюирования можно использовать смеси органических растворителей. например ацетонитрила с водой.Раствор указанных соединений в соответствующем растворителе обычно загружают в хроматографическую колонку из двуокиси кремния или Яерпабех при желании после первого уменьшения обьема растворителя, Колонку могут по выбору промыть, а затем вымыть растворителем подходящей полярности. В случае колонок из Яерйабех и двуокиси кремния, в качестве растворителей можно использовать спирты, например метанол, углеводороды, например гексан, ацетонитрил, галогензамещенные углеводороды, например хлороформ или метиленхлорид, или сложные эфиры, например этилацетаты.Элюирование и разделение очистку заявленных соединений можно регулировать общепринятыми способами, например тонкослойной хроматографией и высокоэффективной жидкостной хроматографией, илииспользуя свойства соединений описываемых далее,Предлагаемые соединения могут первоначально быть очищены хроматографией на5 двуокиси кремния, предпочтительно используя элюат, такой как хлороформ: этилацетат, при желании с последующейвысокоэффективной жидкостной хроматографией. Полученный таким образом очи 10 щенный продукт может быть затем.подвергнут хроматографии на сефадексовых колонках. предпочтительно с использованием элюата, например ацетонитрила, азатем заявленные соединения могут быть15 выделены жидкостной хроматографией свысокой характеристикой.Используя подходящие комбинацииуказанных методик, соединения формулы 1,как уточнено сейчас, выделены как твердые20 вещества в почти чистом виде. Ясно, чтопоследовательность, при которой осуществляют указанные стадии очистки, выбор тех,которые используют и степень достигаемойочистки могут очень отличаться. Указанные25 соединения могут применяться, однако, какуказывалось, при степени чистоты, соответствующей их предназначению. При использовании их в медицине, желательно иметьстепень чистоты хотя бы 900, предпочти 30 тельно более 950, Для ветеринарии и другого применения достаточна более низкаястепень чистоты, например 5000 или ниже.Промежуточные соединения антибиотиков Я 541 формулы 1 И, могут быть получены35 с использованием известных способов ферментации и выделения.Предлагаемый способ далее представлен следующими препаратами и примерами, все температуры приведены при 0 С.40 Соединения обозначены со ссылкой наисточник "Факторы", которые представляют собой перечисленные далее соединенияформулы ОН СН 50 ОВФакторы А, В, С, О, Евестным способом.П р и м е р 1, 5-АцетрА,Раствор оксалилхлорм дихлорметане (25 мл можно получить кси-кето Ф а (1,96 мл) в сури температуре13 2004545 2 мг/кг(орально) 10 мг/кг (подкожно) Активный (2) Активный (2) Активный (2) Активный (2) Активный (1) Активный (1) Активный (1) Активный (1) АВ 080 Пример 1+Пример 2+Пример 3+Пример 4+Пример 5+ рокристаллического вещества при перекристаллизации иэ эфира,П р и м е р 9; Фактор А 5-(2,2,2-трихлорэтил)карбонат 23-кетон (65 мг).,-10 Гц, 1 Н), 2,51 (с, 2 Н) и 0,87 (д =7 Гц, 3 Н), 10фпй(М, С) иэ фактора А, 5"(2,2,2 трихлорэтил)карбоната (1 86 мг).П р и м е р 10, 23-Кето-Фактор А, 5-(4 хлорбенэоат) (150 мг) кристаллизуется припромывании дииэопропиловым эфиром, 15т.пл.230 - 232 С, /а/о +25 (с"0,48. СНСз),Явах (ЕВОН):245 (50600) и 281,5 нм (Евах1100), йпах (СНВгз): 3480(ОН) и 1718 см(сложные эфиры и кетон), д (СОСз): 8(д,8 Гц,2 Н), 7,4 ф 8 Гцз 2 Н) и 2,5 (с, 2 Н), пз/г=748, 20750 (М+, С и С) иэ фактора А, 5-(4-хлорбензоата) (420 мг),Оценка влияния модификации 23-заместителя Фактора А на инсектицидную активность, 25Все приведенные здесь концентрацииявляются концентрациями активного ингредиента. Испытательные растворы приготавливаются путем растворения активногоингредиента в 35-ном растворе ацетона и 30воды при концентрации 1000 частей/млн споследующим раэбавлением водой по меренеобходимости,ТетгапусЬцз цгбсае (стойкий штамм Р),Клещик паутинный двупятнистый. 35Отбирали оастения фасоль лимскую сформированием первых листьев до размеров 7-8 см и осуществляли их обрезку доодного растения на горшок. От листа, взятого из основной колонии, отрезали небольшой кусочек и помещали на каждый листиспытываемых растений. Это осуществлялось примерно за 2 ч до обработки с тем,чтобы позволить клещикам перемещатьсяпо испытываемым растениям и откладывать 45яйца. Размер отрезанного кусочка варьировался так, чтобы получалось примерно 100клещиков на лист. Во время обработки использованный для переноса клещикоо кусочек листа удалялся и оыбрасыоался. 50Зараженные клещиками растения погружались о испытательный раствор на 3 с содновременным перемешиванием и помещались под вытяжной колпак для сушки. Растения выдерживались в течение двух дней, после чего определяли число умерщвленных взрослых особей с использованием первого листа. Второй лист находился на растении в течение еще пяти дней, после чего определяли число умерщвленных яиц и/или вновь появившихся личинок,Егпроазса аЬгцра, взрослые особи, цикадка картофельная.Лист фасоли лимской длиной примерно 5 см погружали в испытательный раствор на 3 с перемешиванием и помещали под вытяжной колпак для сушки. Данный лист помещали в чашку Петри размером 100 х 10 мм, содержащую на дне влажную фильтровальную бумагу. В каждую чашку вводили примерно по 10 взрослых особей цикадки картофельной и обработка их осуществлялась в течение 3 дн, после чего определяли число умерщвленных насекомых,Неойз чгеэепз, табачная листовертка-почкоед третьей возрастной стадии,Семядоли хлопка погружали в испытательный раствор и высушивали под вытяжным колпаком, После сушки каждое растение разрезали на четыре части и десять секций помещали по отдельности в 30-миллилитровые пластмассовые медицинские чашки, содержащие кусочек медицинского зубного тампона длиной 5-7 см. В каждую чашку вводили гусеницу 3-й возрастной стадии и на чашку помещали картонную крышку. Обработка продолжалась три дня, после чего подсчитывали число умерщвленных насекомых и определяли снижение повреждения. Шкала оценки,0 - отсутствие какого-либо эффекта.1 - 10-25 умерщвления2 - 26-35 а умерщвления,3 - 26-45 умерщвления.4 - 46-55 умерщвления.5 - 56-65- умерщвления.6 - 66-75 умерщвления,7 - 76-85 умерщвления,8 - 86-99 умерщвления.9 - 100 ф умерщвления. Сравнение 23-кето-соединений, Активность против сомнительных нематоспироидов у мышей.2004545 16 Активный (2) Неактивный Неактивный Патент США М 3950360, кл. 536-1,1.1976Таблица 1(56) Патент США М 4423209. кл. 260-343, 2 Й.1983,Табияние 23-заместителя Фактора А на его инсектицидную активность группа, где Й 2- щенный илигалогена, или О- С 1 - С 4-алкил и отличающийся тем, формулы И где Й 1- метил, этил или изопропил;Й 2 ийз вместе с атомом углерода, к кото. 15рому они присоединяются, представ.ляют 20 где Й 2- гидроксильна па йз водород, группу:ОЙ 4 - защищенная гидроксильная групОЙ 4 - гидроксильная группа или ОСОЙ 6 Пример 6+щАвермектин В 1 аагликон НеактивныйМилбемицин а 2 Неактивный1 - более 50 снижения нагрузки глистов.2 - 13-82 снижения нагрузки глистов. Формула изобретен ияСПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МАКРОЛИ НЫХ АНТИБИОТИКОВ общей формулы2 фЭ С 1 - С 4-алкил, незаме-. замещенный атомом СО 2 й 6-группа. где йба ли бензил,что соединение общей2004545 акам: Приоритет по и оставительехред М. Моргент едактор Г,Мельникова ектор С.Лисина Тираж Подписно НПО "Поиск" Роспатента13035, Москва. Ж. Раушская наб., 4/5 аказ 3 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул.Гагарина, 101 подвергают окислению действием окислителя, таким, как бихромат пиридиния или И, М-диметилсульфоксид, в присутствии активирующего средства, такого, как оксалилхлорид, в среде органического раство рителя при температуре от -70 до 22 С с последующим удалением, в случае необхо,димости, щелочным гидролизом защищаемой ОВ 4 - группы, и выделением соединения общей Формулы 1, где ОВ 4 -10 гидроксигруппа, или действием ацилирую- щего агента переводят его в соединение общей формулы 1, где ОВ 4 - ОСОВ 6-группа или ОСО 2 Вба группа,30.04,85 при В 1-метил, этил или изопропил,В 2 и Вз вместе с атомом углерода, к которому они присоединяются, представляют группу и ОВ 4 - гидроксильная группа илиОСОВб-группа, где Вв - С 1- С 4-алкил, незамещенный или замещенный атомом галогена:12.03.86 при ОВ 4- ОСО 2 Вва-группа. где Вь