Способ получения комплексов полиеновый антибиотик циклодекстрин

ОЮЗ СОВЕТСКИХ ОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК 4 С 07 Н 17/08 61 КЗ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 3ь1 НТ(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КО ЛИЕНОВЫЙ АНТИБИОТИК"- ЦИ МПЛЕКСОВ ПООДЕКСТРИН57) Изобр сахаров, в ния компле СУДАРСТНЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ(71) Хиноин Дьедьсер еш ВедьесетиТермекек Дьяра РТ (НП)(56) Нащшопд Б,М. В 1 о 1 оя 1 са 1 Асгдч 1.суоГ Ро 1 уепе, - Апг 1 Ьог 1 сз Ргоегезз 1 пИейса 1 сЬеш 1 зггу. т. 14. ИоггЬ -Но 11 апй РцЫ 1 зЬ 1 пе Сошрапу, 1977,р. 105,ение касается производныхастности способа получеов полиенового антибиотика с-циклодекстрином, обладающих биологической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание новых веществ указанного класса, обладающих боль- шей растворимостью в воде при сохранении химической и биологической активности, Процесс ведут обработкой практически нерастворимого антибиотика, такого как флавофунгин, нистатин .или амфотерицин Б с. помощью высушенного (1,5% воды)-циклодекстрина при мольном собтношении 1: :(2,8-34,5) в водной или водно-спиртовой среде при соотношении 1,6- 409 мл на 1 ммоль антибиотика, переомешивании при 20-50 С. Новый комплекс, например, с флавофунгицидом имеет растворимость в воде до 4%, содержание в нем активного вещества составляет 75% после 50-дневного нагревания до 60 С при минимальной подавляющей концентрации в отношении различных дрожжей и грибов (5-50) мкг/мл 5 табл.Изобретение относится к способу получения новых водорастворимых и стабильных форм полиеновых антибиотиков, а именно к способу получения комплексов пслиеновый антибиотик -циклодекстрин ( -ПД).Цель изобретения - получение новых производных полиеновых антибиотиков, обладающих большей растворимо стью в воде при сохранении химической и биологической стабильности, по сравнению с исходным антибиотиком,Способ осуществляют следующим образом. 15П р и м е р 1. Получение комплекса флавофунгина, с-циклодекстрином в гомогенной фазе.22 г-циклодекстрина (содержание волы 1,57) при 30 С растворяют 20 в 500 мл дистиллированной воды и к раствору добавляют 2,5 г (3,85 ммоль) твердого Флавофунгина. Раствор в течение 3 ч интенсивно перемешивают, затем отфильтровывают и полученный 25 интенсивно-желтого цвета фильтрат лиофилизуют. Получают 21 г продукта, спектрофотометрически измеренное содержание флавофунгина в котором составляет 9,37, Это соответству ет примерно 807. используемого количества флавофунгина. Комплекс представляет собой рыхлый желтый порошок, 100 мг комплекса растворяется в 2,5 мл дистиллированной воды при 50 С мгно-, венно с образованием прозрачного раствора. Этот раствор содержит 3,5 мг/мл флавофунгина и при хранении в течение 6 дней при комнатной температуре и на рассеянном свету не претерпе вает никаких обнаруживаемых химическим или физическим путем изменений.Максимальная растворимость наступает при содержании -БД, равном примерно 47 (концентрация флавофунгина 45 4 мг/мл), поэтому путем лиофилизации этого раствора получается комплекс самого предпочтительного состава (9-10 вес,7. биологически активного вещества).50Термогравиметрические измерения, исследования с помощью дифференциально-сканирующего калориметра (ДСК) и термодеструктивного анализа (ТДА) - (Тшеппа 1 Ечо 1 цг.оп Апа 1 уэе) показывают характерную разницу между флавофунгином, комплексом флавофунгина с У-БД и смесями из флавофунгина ио-ЦЦ. Флавофунгин при 100 С теряет 77. своей массы (на основании ТДА-кривой выделяются органические вещества),овыше 100 С он начинает разлагатьсяои до 300 С теряет 247 своей массы,Лиофилиэированная проба иэ флавофунгина и-ЦД получается в виде комплекса вследствии того, что вплотьдо 100 С не теряет никаких органических веществ и в ДСК-кривой между 100ои 200 С не появляется характерноедля окисления флавофунгина экзотермиоческое изменение, однако, при 263 Споявляется характерный для экэотермического процесса пик, который указывает на окисление выделяющегося изкомплекса флавофунгина.Для исследования термостабильностикомплекса Злавофунгина с-ЦЦ вещества толщиной слоя 1 мм помещали начасовые стекла и, не защищая .от света воздуха, хранили при комнатнойотемпературе и при 60 С в сушильномшкафу. Пробы, отобранные в.различныемоменты времени, анализировали спектрофотометрически.На основании химических измеренийнайдено, что не включенный в комплексофлавофунгин через 24 ч при 60 С претерпевает сильное разложение (этоподтверждено также путем снятия полного Уф-спектра). Содержание биологически активного вещества в комплек-се флавофунгина с-ЦЦ через 50 днейстановится равным примерно 757. Содержащая 107 флавофунгина, приготовленная с глюкозой физическая смесьтеряет при 14-дневном хранении прикомнатной температуре 507 биологически активного вещества, Содержание биологически активного вещества в комплексе через 50 дней больше 957. Храонившаяся в закрытом сосуде при +4 Св течение 7 мес проба не показывалапотерь биологически активного вещества,Результаты измерений представленыв табл, 1 (термостойкость выраженнаяв процентах первоначального содержания биологически активного вещвства)Микробиологическое оценочное измерение также подтвердило, что флавофунгин в форме-ПД-комплекса намного стабильнее. Комплекс флавофунгинас -ЦД хранили при комнатной температуре и при 60 С, Противогрибковое .одействие было точно таким, как и первоначальное (М 1 С-значение хранившегося в атмосфере азота в холодильникеСтабильность приготовленных из лиофилизированной пробы комплекса нистатина с -ЦД растворов исследова" ли следующим образом,50Из содержащего 87. биологическиактивного вещества готовили водный раствор концентрации 5 мг/мл, Раствор хранили при комнатной температуре незащищенным от света, В различные моменты времени спектрофотометрически контролировали содержание биологически активного вещества в растворах,3 14282пробы флавофунгина М 1 С=26 мкг/мл исследовались на тест-микроорганизмах.з, сеген 1 з 1 а 1, с. а 1 Ьсапз, с. рзецЙосгордса 1 з и с. огцзе.П р и м е р 2, Получение комплекса флавофунгина с-ЦД, в гетерогенной фазе.9 г -циклодекстрина (содержаниеводы 1,57) гомогениэируют в фарфоровой ступке с 1 г флавофунгина прикомнатной температуре., Смесь суспендируют в 5 мл 507.-ного этанола. Суспензия через несколько минут перемешивания внезапно становится твердой, 15Пастообразное вещество размазываютпо ширине до тонкого слоя и в течение нескольких часов высушивают в вакуумном эксикаторе. Затем твердыйкомплекс измельчают в порошок. Получают 10 г продукта с 10 вес,7. биологически активного веществаПродукт изучают на термостойкость.При этом находят, что комплекс каклиофилизированный комплекс обладает 25повышенной термостойкостью и егопротивогрибковое действие не уменьшается,На снимках рентгенодифракционногоанализа превращенного в порошок комплекса проявляются характерные пикирефлекции при значительно отклоняющейся (20 ф) величине угла в другомместе, чем в случае физической смеси подобного состава, что свидетель 35ствует о другой кристаллической решЕтке и подтверждает факт комплексообразования. Рентгенодифракционныйснимок лиофилизированного комплексафлавофунгина с-ЦД указывает нааморфную структуру,П р и м е р 3. Получение комплекса нистатина с -ЦД в гомогенной фазе.10 г-ЦД (содержание воды 1,57.)опри 50 С растворяют в 90 мл дистиллированной воды, К раствору добавляют2 г (2,16 ммоль) нистатина (биологическая активность 5033 Е/мг). Растворинтенсивно перемешивают в течение15 мин, После отфильтровывания осадкажелтого цвета раствор лиофилизируют,Получают 10 г продукта, спектрофотометрически определенное .содержаниенистатина в котором составляет 87Биологическая активность 399 Е/мг,Комплекс нистатина с-ЦД представляет собой светло-желтый рыхлый порошок, который быстро растворяется в 084воде при комнатной температуре с образованием прозрачного раствора.Концентрация нистатина в растворе 89 мг/мл,что соответствует примерно100 мг комплекса на мл раствора, Биологическое оценочное определениекомплекса показывает, что биологическая активность исходного нистатинасохраняется,Термогравиметрические измерения,исследования с помощью дифференциально-сканирующего калориметра (ДСК) итермодеструктивного анализа (ТДА)показывают характерное различие между нистатином, комплексом нистатинас-ЦЦ и смесью нистатина с-ПД,Нистатин содержит 37. воды, которуюоотдает вплоть до 100 С (ТС-кривая),Разложение вещества начинается прио150 С с экзотермическим процессом(в ДСК-кривой пик при 165 С, при потере в весе 87 - ТС-кривая), затемпротекает медленное разложение, иопри 350 С измерима массовая потеря547, Хотя разложения нистатина и(-ЦД в отношении температуры совпадают, однако есть некоторые отклонения в термоциклических кривых комплекса в смеси, которые в лиофилизате делают вероятным наличие комплекса. В ТДА-кривой отсутствует острый пик при 160 С, который указывает на улетучивание органическихвеществ. В ДСК-кривой не проявляется характерного для разложения нистатина экзотермического пика (лишь приотемпературе 200 С), В ТС-кривой различие проявляется в том, что лиофилиозированная проба выше 250 С разлагается быстрее, чем физическая смесь.Комплексообразование нистатина с13Время, дни Концентрация нистатина, мг/мл0 5,01 4,82 4,75 55 4,70б 4,67 4,558 4,510 4,5 1012 4,521 4,1Растворы.на второй день начинаютопалесцировать. Отбор проб осуществляли после встряхивания раствора. 15Пробу разбавляли 400-кратным количеством этилового спирта и затем фотометрировали. Расчет осуществлялииэ имеющихся (кажущихся) при%,р304+1 величин экстинкции,Послехранения в течение 3-х недель водногораствора ещеимеется свыше 807. всегоколичества биологически активноговещества. Высоким значениям экстикции принадлежат высокие значения активности,П р и м е р 4. Получение комплекса нистатина с-циклодекстрином в гетерогенной фазе.9 г -циклодекстрина (содержание 30воды 1,5 Х) и 1 г нистатина (биологическая активность 5033 Н/мг) гомогенизируют друг с другом в фарфоро 1вой ступке при комнатной температуре,Полученную смесь суспендируют в 6 мл507.-ного этанола. Через несколькоминут суспензия внезапно становитсятвердой. Вещество размельчают и дляудаления следов воды и растворителясушат в эксикаторе над пентоксидом 40фосфора. На следующий день твердыйкомплекс измельчают в порошок, Получают продукт с содержанием биологически активного вещества 10 вес,7(биологическая активность 45 Е/мг), 45Полученный комплекс при термоаналитических исследованиях по сравнению со смесью показывает такие же отклонения, как и приготовленный по примеру 3 путем лиофилизации комплекса. Исследовали растворимость соответ. ствующего количеству биологически активного вещества 10 мг/мл количества комплекса нистатина с -ЦД и основ 55 ного нистатинового материала в 15 мл дистиллированной воды при 37 С, Растворы перемешивали с помощью магнитной мешалки, совершающей 150 оборо тов в минуту, В различные моментывремени отбирали пробы, отфильтровывали и исследовали спектрофотометрически содержание в них биологическиактивного вещества,Комплекс нистатина с -ЦД, мг/мл90 7,2 7,8 7,4 7,2 6,0 Время, мин 2 5 15 40 60 90 Спектр отобранных из водной суспенэии основного нистатинового материала проб не оценивали, Спектр отобранной в течение первых 5 мин пробы идентичен спектру нистатина, позднее наблюдается прогрессирующее расложение, Сначала деформировался максимум около 290 нм и затем полностьюисчез, и в области меньших длин волнпоявился новый максимум, что позволяет сделать вывод о повреждении конъюгированной аморфной системы,П р и м е рПолучение комплексанистатина с -ЦЦ в гетерсй енной фазе путем лиофилизации,8 г т -ЦД (содержание воды 1, 57 О)опри 40 С растворяют в 80 мл воды ик раствору добавляют 2 г (1,16 ммоль)нистатина. Суспенэию перемешиваютов течение 24 ч при 40 С, затем смесьобезвоживают путем лиофилизации, Получают в виде желтого рыклого порошка 10 г продукта, спектрометрическиизмеренное содержание биологическиактивного вещества в котором состав,ляет 207 Биологическая активность950 Е/мг.В продукте мольное соотношениемежду нистатином и-ЦД составляет1:3, Согласно рентгенодифрактометрическим исследованиям комплекс имеет аморфную структуру. Обработанноетаким же образом, но без -ПД, основное вещество сохраняет свой кристаллический характер, его рентгенодифрактограмма полностью идентичнатаковой основного вещества, а биологическая активность значительно хуже,Если получают описанным образом комплекс с более высоким содержаниембиологически активного вещества, торентгенодифрактограмма показываетхарактерный для кристаллическогонистатина пик.Для исследования растворимостикомплекса 500 мг его перемешиваютв течение 5 мин в 10 мл воды прикомнатной температуре, В фильтре спектрофотометрически обнаружена концентрация нистатина 4,5 мг/мл.П р и м е р 6. Получение комплекса амфотерицина Б с -ЦД,10 г -циклодекстрина (содержание воды 1,57) растворяют в 90 млдистиллированной воды г 1 ри 37 С. Кораствору добавляют 200 мг амфотерицина Б, Смесь интенсивно перемешивают 2 ч, затем отфильтровывают осадок желтого цвета, фильтрат лиофилизируют. Получают 10 г продукта, спектрофотометрически измеренное содержание амфотерицина Б в котором составляет 0,6-0,8 вес.7. Комплекспредставляет собой желтый рыхлыйпорошок, который в воде быстро растворяется с образованием прозрачного раствора, Полученный растворимеет концентрацию 0,6-0,8 мг/мл 25амфотерицина Б и может неограниченно разбавляться водой или физиологическим раствором хлорида натриябез выпадения в осадок твердого вещества или помутнения раствора,Раствор хранят при комнатной температуре в течение 6 дней и спектроскопически исследуют: содержание в нем биологически активного вещества неизмененное.. П р и м е р 7, Определение проти 35вогрибкового действия полученных комплексов как тотчас после получения,так и после хранения в условиях, прикоторых не .защищенное за счет комплексообразования биологически активное вещество претерпело уже значительные потери активности,а) Комплекс флавофунгина с -циклодекстрином.45Противогрибковое действие водного раствора этого комплекса исследовались на 6 бактериях и 13 гифомицетах,Результаты представлены в табл, 2,50В расчете на флавофунгин минимальная подавляющая концентрация в каждомслучае была 10-25 скг/мл, что соответствует активности не связанного комплексно биологически активного вещества. Особенно нужно отметить, чтовещество активно также против фитопатогенных грибков, т,е применениеФпротив грибковых поражений растений обосновано. Комплексносвязаггнае биологически активное вещество действует в такой же концентрации, как и флавофунгин, Исследования осуществляли методомдиффузии на агаре. Комплекс имеет то преимущество, что для приготовления растворов не требуется никаких энергетических растворителей (уф или ЧМСО). Эти растворители действуют именно подавлягоще на некоторые грибы, поэтому при измерениях нужно уменьшать концентрацию растворителя путем рабавления водой до значения, не действующего уже подавляющее. На практике, например, допустйма концентрация ДМСО ниже 1 Е. Некоторые полиены, склонны к осаждению при такого рода разбавления, т.е. при приготов-. лении необходиььп: для исследований растворов часто сталкиваются с препятствиями. Рекомендуется вещество превращать в порошок и приготовление раствора, а также его разбавление воцой осуществлять всегда непоср дственно перед измерением.Концентрация флавофунгина в каждом случае составляет 10-25 мкг/мл. Появляющиеся при приготовлении раствора из флавофунгина проблемы беспредметны при применении комплекса,б) Комплекс нистатина с -ЦД,Биоггогическое оценочное измерение осуществляли с помощью агар-диф.фузионнога метоца при примененииСапйдйа а 1 Ьг.сапа в качестве тесторганизма. Комплексы растворяли толь"ко в воде, нистатин - в содержащемхлорид кальция метаноле.Растворы разбавляли водой,Спектрофотометрически измеренноесодержание биолсгически активноговещества и биологическая активностьнекоторых комплексов показаны этабл. 3. Используемое для комппексообразования основное нистатиновое вещество имело биологическую активность 5033 Е/мг.в) Комплекс амфотерицина Б с -ЦД.Противогрибковую активность этого комплекса исследовали с помощью агар-диффузионного метода и СапйЫа а 1 Ьг.сапэ в качестве тест-организма. По отношению к амфотерицину Б минимальная подавляющая концентрация была меньше 5 мкм/мл, что соответствует активности не связанного ком 1428208 10плексно биологически активного вещества,П р и м е р 8. Изучение поглощения (всасывания) комплексов полиено 5вых антибиотиков с циклодекстрином.а) Поглощение (всасываемость) ниРстатина из применяемого пероральнокомплекса Нистатина с-ЦД,Всасывание биологически активноговещества исследовали на мышах, на модели сепсиса, вызванного путем внутривенного введения суспензии СапдЫаа 1 Ьсапв. Сепсис в течение 2-3-х днейвызывал 1007.-ную смертность. Подопытные животные получали перорально приготовленный по примеру 3, содержащий87 нистатина комплекс, В параллельном опыте нистатин вводили внутривенно. Для обеих групп определялив расчете на необработанный контрольудлинение продолжительности жизни(см.табл.4). Если сравнивать применяемые в виде комплекса перорально дозы нистатина с вводимыми внутривенно дозаминистатина, которые вызывают примерноравное удлинение продолжительностижизни (табл. 4), последний столбец,то можно сделать вывод, что из комплекса. в среднем в кровеносное руслопопадает 6,27. биологически активноговещества. В случае более высоких доэ(внутривенно 1,56 мг/кг, перорально25 мг/кг) уменьшение продолжительности жизни сводится к слабой токсичности нистатина,б) Всасывание нистатина из подкожно вводимого комплекса нистатина с 40-ПД.Самок СГЕ-крыс со средним весом180 г обрабатьвают нистатином, комплексом нистатина с -ЦД (содержаниебиологически активного вещества 87)и-ЦД. Для этого из исследуемыхвеществ с помощью содержащего Твин 80физиологического раствора хлорида натрия готовят суспензию и вводят ееподкожно. Связь между дозами и смертностью представлена в табл. 5.Из обработанных комплексом животных при дозе 20 мг/кг 907 погибаетв течение 48 ч, из обработанных свободным нистатином животных при дозе55150 мг/кг в течение недели наблюдения не погибает ни одного. Для контроля 10 животным подкожно вводилистолько-ЦД, чтобы получить погибающую на 907 группу с помощью комплекса (302 мг/кг). В течение недели наблюдения не погибло ни одного животного. Из табл, 5 видно, что иэ комплекса нистатина с -ЦД при подкожномвведении поглощается токсическаядоза, в то время как свободный нистатин при подкожном введении вообще не поглощается или всасываетсятолько в допустимой незначительноймере.Всасываемость исследовали такжепутем измерения уровня его в крови,так как поглощенный, попавший в кровеносное русло, нистатин обнаруживается в УФ-спектре сыворотки крови.При подкожном введении свободногонистатина дозой 200 мг/кг в кровиничего не обнаружено, в то времякак комплекс уже при дозе 20 мг/кгдает хорошо измеряемый уровень вкрови через: 2-4 ч после введения вкрови было обнаружено 6-10 мкг/мл.П р и м е р 9. Снижение гемолиэирующего действия полиеновых антибиотиков путем комплексеобразования с -ЦД,а) Комплекс нистатина с -ЦЦ.Гемолитическое действие нистатина,комплекса нистатина с -ЦД (содержание биологически активного вещества 87) и -ЦД исследовали наприготовленных из человеческой кровисуспенэиях красных кровяных телец пометоду Т. Тги и др. (Е. РЬагш Пуп 6,408-114, 1983). Результаты указьваются в форме относящихся к 507-номугемолиэу концентраций (ЕН о), Полученное для свободного нистатиназначение (ЕН о = 57 мкг/мл) показывает совпадение с известным значением ЕН о = 50 мкг/мл (Е. АпсдЪоцз,22, 1080-1081, 1979), Для комплексанисиатина с-ЦЦ, в расчете на биологически активное вещество найденозначение ЕН = 115 мкг/мл, т,е, ком-,зоплекс снижает гемолиэирующее действие нистатина наполовину, При исследовании концентрированной зависимо"сти гемолитического действия обнаруживается, что комплекс нистатина с-ЦД вплоть до концентрации 70 мкг/млнистатина практически не действуетгемолитически, в то время как свободный нистатин в этой концентрациивызывает уже 707-ный гемолиэ, Также2 1428208 Получение содержащих комплексы полиенового антибиотика и "-циклодекстрина лекарственных препаратов и средств защиты растений,250 кг комплекса нистатина с- циклодекстрином дополняют тальком до 1 г (комплекс имеет биологическую активность 400 Е/мг). Формула изобретения Способ получения комплексов полиеновый антибиотик - -циклодекстрин, о т л и ч а к щ и й с я тем, что практически нерастворимый в воде полиеновый антибиотик такой,как флавофунгин, нистатин или амфотерицин Б подвергают взаимодействию с высушенным (1,57 воды)-циклодекстрином при молярном соотношении 1:(2,8-34,5) соответственно в водной или водно- спиртовой среде, причем количество воды лежит в пределе 1,6-409 мл/1 ммоль антибиотика при перемешивании при 20- 50 С. Таблица 1 Термостойкость,% Время,дни опри 60 С ф при комнатной температуре флавофунгина комплекса флавофунгина с -ЦД Остающееся активное вещество, Е 100 100 100 100 43,8 100 90 100 23 99,5 81 99,5 99 10 15 96 65 49 96 94 94,8 20 85,4 95,0 29 70,5 95,0 35 79,2 94,9 44 78,7 94,8 50 75,0 94,5 исследовали гемолитическое действие соответствующего связанному в комплекс количеству -ЦЦ количества- циклодейстрина, При этом найдено, что-ЦД при совпадении с известными данными, вплоть до концентрации 1600 мкг/мл не вызывает никакого гемолиза.б) Комплекс иэ Амфотерицина и -ЦД.Гемолитическое дейсгвие этого комплекса (получен согласно примеру 5, содержание биологически активного вещества О, 67) исследовали указанным в п.а.) образом. Для свободного амфотерицина Б дается значение ЕН = 4,8 мкг/мл, которое совпадает с известными данными (ЕН= 5 мкг/мл), Комплекс из амфотерицина и-ЦД вызывает в рассчитанной на биологически активное вещество концентрации 25 скг/мл только 2,6 Х-ный гемолиз, в то время как свободный амфотерицин в этой концентрации вызывает 92,47- 25 ный гемолиэ. смеси из флаво- комплекса флавофунгина и глюко- фунгина с -ЦДзы1428208 4 Таблица 2 М 1 С, мкг/мл Тест-организм Дрожжи и дрожжеобразные грибы 78/КОК1282 СВБ 562 СВБ 430 79/К 47 Сгургососо пеоЕогщ БассЬао сегеч 1 вае 10 СапеЫа а 1 ЬсапзСапд 1 оа ггор 1 са 1СапдЫа сгцвсе 10 25 10-255-10 СапдЫа рвецс 1 пг. Грибы Сгургососе Аврегп п 1 цег СВБ 12648 БассЬаг сегеч 1 я 1 аеАвреге Ецщ 18 агив СВБ 11326 СВБ 31948 СВБ 19646 Патогенные грибыСВБ 34035 СВЯ 30338 25 Реп 1 с 1111 ощ Й 1 угагцщ Реп 1 с 111 ыщ сЬгувоееп 25-50 Брогогг, БсЬепЬзТгдсЬорЬ, гиЬгап Тг 1 сЬорЬ. щепгацгорЬ СВБ 50148Тг 1 сЬорЬ Ьегагощус а 1 е 11 о 1 ОК/ Ер 1 оегщ.Е 1 оссовпщМ 1 сговр, пурзешпМ 1 сгозр. регздс 25 СВБ 10064 10-25 ОК 1 Патогенные в отношении растений грибы Рцяагдцщ щоп 111 Еогщ ПЯММВ8 10-25 ЭЯММВ 10975 10-25 Рияаг 1 ищ охуврогпщ Минимальные подавляющие концентрации (М 1 С) комплекса флавофунгина с -ЦЦ ин витро16 1428208 Таблица 3 Биологическаяактивность, Е/Мг Содержание биологически активного вещества (Уф-спектрофотометрическИ),7. Комплекс 362 7,6 399 8,0 450 8,4 длинение проолжительностиизни, Е 30,2 9 12 0,1,24 3 5 12,5 6,6 6 0,7 5 69 4,аблица Комплекс Нистатина с -ЦД атин а Доза Нистмг/кгЧисло жив мг ло животы исследовано сследо- .погибло чеве 24 ч 48 ч 7 дн2 дн. 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 каз 4870/59 8 и писное Произв.-полигр. пр-ти оектная, 4 город, ул Нистатин, внутривенно,мг/кг Удлинение продолжительностижизни,Х Нистатин, перорально, мг/кг Таблица 4 Поглощенный нистатин внутривенно