Способ оценки качества корма

БРЕТЕН Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам(64) СПОСОВ ОЦЕНКИ КАЧЕСВА КОРМА (67) Использование: в микробиологии пищеварения жвачных животньк Сущность изобретени)г. подсчет протеина в корме ведут путем помещения об(в) 3 Ш (и) 200242 б С 1(Б 1) 5 АЗЗКМ 00 работанного формальдегиддержащую испытуемыйлый однозамещенный. калийзамеще)тный, натрий хлолый, кальций хт)ористы)лы дрожйщ цистеин солянлекислый, дистилированную.лируют приготовленнуюруют в термостате при 39 фдят подсчет количества босновании этого рассчиттеина 5 табл. ом корма в среду, сокорщ калий фосфорнокисфосфорнокислый двуристый, магний сернокис- атистокиснатрии серновокиспыьс натрий двуугводу, в которую иноку- культуру ЗВ. Ьощ инкубиС в течении 24 ч, проаоактериальных КГ)еток нд ьеаот содержание про 2002426Изобретение относится к микробиологии пищеварения и может быть использовано в практике кормления жвачных животных, для контроля эффективности использования протеина корма в преджелудках, а так же научно-производственной практике.Известен способ определения распадаемости протеина корма, основанный на инкубации мешочков в условиях Ь чего в камере "искусственный" рубец, В колбу обь емом 150 мл, снабженную дефлегматором, вносят 100 мл содержимого рубца, добавляют 20 мл подогретого до 39 С фосфатно-ацетатного буфера рН 7,2-7,3 (в 1 л дистиллированной воды содержится, г; на трий хларистый 0,5; натрий уксуснокислый 1,5; калий фосфорнокислый двузамещенный 1,0; калий фосфорнокислый однозамещенный 0,3; магний сернокислый 0,1;кальций хлористый 0.1) и помещают по 1 гисследуемого корма в нейлоновых мешоч"ках. Инкубацию проводят в течение 7 ч вводяной бане при 39 С и постоянном встря-хивании (Аитова М,Д, и Романова Н,Г. -Бюл. ВНИИФБ и П с.-х. животных, 1989;вы п,2(94).Наиболее широкое распространениеполучил метод с использованием нейлоновых мешочков, помещенных в рубец жвач-ных (Турчинский В.ВКурилов Н.ВФицев 30А.М, и Воронкова Ф.В. - Определение растворимости и распадаемости протеина кормов - Методические указания, Боровск,1987),Однако зти методы требуют наличия 35подопытных животныха следовательно, изатрат на их содержание и уход, При определении количества нерасщепленного белка не учитывается примесь микробныхбелков в пробе, Так, количество. азота бактерий при инкубации мешочков в течение 12ч может достигать 20 от всего содержащегося в мешочках азота, а после 18 -42 оь, Впроцессе инкубации могут наблюдаться потери за счет вымывания. из мешочков мелких кормовых частиц, содсржащих основнуючасть протеина, При промывании водой извлеченных из рубца мешочков наблюдаются также потери протеина, При этом необходимоучитывать пористость используемой для изготовления мешочков ткани и степень измельчения корма, С увеличением пористостизначительно возрастает приток частиц корма впросвет мешочка, что может привести к занижению истинной величины распада протеина 55корма. Трудно контролировать и измельчениепроб. На достоверность и воспраизводимостьрезультатов, полученных методом нейлоновыхмешочков, существенное влиянием оказывает порядок закладывания мешочков в рубец,Известен также способ оценки биологической полноценности рациона с использованием в качестве тест-объекта тетрахимена пириформис (Бинев Р.Г. и соавт. - Оценка биологической полноценности рациона с использованием тест-объекта тетрахимена пириформис и аппарата "Ис-. кусственный рубец". Производство и использование растительного белка, Краснодар, 1981). Однако инфузории этого вида являются строгими аэробами и не являются симбионтами жвачных животных. Поэтому этот способ мало приемлем для проведения оценки эффективности "защиты" протеина корма от разрушения в рубце жвачных животных, так как рубец - анаэробная система (Прототип),Следует также отметить,.что ни один из этих методов не позволяет точно прогнозировать интенсивность синтеза бактериальной массы в преджелудках жвачных при скармливании кормов с различной распадаемостью протеина.Цель изобретения - повышение точности у чувствительности способа оценки качества протеина корма, позволяющего учитывать интенсивность синтеза бактериальной массы и использовать в качестве индикаторной культуры 51 г. Ьочв, выделенный из преджелудков жвачных животных.Цель достигается тем, что в качестве единственного источника азота в среде использовали испытуемый корм, а в качестве индикаторной стандартной культуры стрептококки, относящиеся к аиду 51 г;Ьойз, Характерной особенностью 31 г.Ьочз является способность использовать как органические, так и неорганические источники азота.П р и м е р 1, В колбочки емкостью 100 мл в качестве единственного источника азота вносили 1,0 г испытуемого корма - подсолнечного шрота, обработанного формальдегидом из расчета от 0,2 до 1,0 от массы протеина корма и добавляли среду следующего состава, мас. :Калий фосфорнокислыйоднозамещенный 0.02Калий фосфорнокислыйдвухзамещенный 0,05Натрий хлористый 0.1Магний сернокислый 0,01Кальций хлористый 0,01Натрийсерноватистокислый 0,03Дрожжи 0,05Цистеин солянокислый 0.01Натрий двууглекислый 0,4Дистиллированная вода Ос 1 альное5 10 15 20 25 3035 40 45 50 55 Перед засевом среду в течение 1 мин насыщали углекислым газом и колбочки закрывали резиновыми пробками с дефлегматорами, В качестве посевного материала использовали суточную культуру стрептококков, которую вносили в среду и инкубировали при 39 С в течение 24 ч, Затем готовили ряд разведений и учитывали численность бактерий под микроскопом. Кроме того, подсчет количества бактерий проводили также после выращивания их на крахмально-пептонно-дрожжевом агаре с последующим пересчетом на вес сухой биомассы, которую определяли по калибровочной кривой.Установлено, что содержание протеина в биомассе Зтг.Ьочз является величиной постоянной и составляет 49,6.Интенсивность синтеза биомассы ЗкЬочз на средах с подсолнечным шротом, обработанным различными дозами формэльдегида и содержание протеина в биомассе представлены в табл.1,Из таблицы следует, что с увеличением дозы формальдегида интенсивность роста стрептококков уменьшается, т.е. между этими роказателями наблюдалась обратная зависимость, Уже при дозе формальдегида 0,2 биосинтез бактериальной массы достоверно снижался. С увеличением дозы формальдегида до 0,5 интенсивность синтеза биомассы Ьтг.Ьочз снижалась на 60,6, практически полное прекращение развития бактерий наблюдалось при повышении концентрации формальдегида до 0,9-1,0; от массы протеина.Расчеты по определению эффективности "защиты" протеина корма вели следующим образом; так, если накопление биомассы Ятг,Ьоч 3 при выращивании на среде с нативным подсолнечным шротом принять эа 100, то при выращивании на среде с обработанным формальдегидом шротом в дозе 0,2; 0,3; 0,4; 0,5: 0.6; 0,7; 0.8;0,9 и 1,0 г/100 г протеина накопление биомассы будет составлять соответственно 68,2; 65,2; 59,1; 39,4; 31,8: 24,3: 18,2; 9,1 и 4,5 ф, э эффективность "защиты" протеина составит 31,8; 34.8; 40,9; 60,6; 68,2; 75 7;81,8; 90,9 и 95,5 соответственно. Следовательно, наивысшая эффективность "защиты" протеина корма имеет место при обработке подсолнечного шрота формальдегидом в дозе 0,9-1,0 г/100 г.П р и м е р 2. Культивирование проводили как в примере 1, но вместо обработанного формальдегидом подсолнечного шрота испольэовали в качестве субстрата нативные и обработанные формальдегидом концентраты. Согласно имеющимся литературным данным известно, что обработка шрота формальдегидом в концентрации 0,5 О от массы сырого протеина корма является оптимальной для микробной и ферментативной фаз переваривания РЫрз З.Апа.Яс, 1981, 53,6, 1616-1622). В связи с этим были испытаны четыре комбикорма, Комбикорма М 1 и 2 были идентичными по составу, но входящий в комбикорм В 2 подсолнечный шрот был обработан формальдегидом из расчета 0,5 ф от массы протеина, Комбикорма В 3 и 4 состояли из одних и тех же ингредиентов, но последний был подвергнут формальдегидной обработке в дозе 0,5 от массы протеина.Результаты исследований по изучению интенсивности роста Зтг.Ьочз на средах с различными комбикормами представлены в табл.2.Исследованиями установлено, что наиболее интенсивный рост Ятг,Ьойз обеспечивается на средах с обычными комбикормами й. М 1 и 3, тогда как формальдегидная обработка подсолнечного шрота комбикорма М 2 и всего комбикорма Ф 4 уменьшила интенсивность роста стрептококков на 34 и 54 соответственно.Подобная закономерность получена и ссуммарной микрофлорой рубца при ее инкубации с испытуемыми, кормами (табл,3). Как и в опытных с чистыми культурами Ятг.Ьочз, обработанные формальдегидом комбикорма М 2 и 4 е сравнении с контрольными не обеспечивали адекватного роста амилолитических, молочнокислых, протеолитических, пектолитических и усеаиеающих азотмочееины бактерий, т,е. формальдегидная обработка комбикорма снижала доступность протеина корма для микрофлоры рубца. Скармливание вышеуказанных комбикормов коровам в составе рационаболее полно удовлетворяло потребности микрофлоры в питательных веществах засчет грубых и сочных кормов рациона.П р и м е р 3. Культивирование проводили кэк е примере 1, но вместо обработанного формальдегидом подсолнечного шрота в качестве субстрата в среду вносили нативный и обработанный теплом автоклавированный при 110 С и экструдироеанный) подсолнечный шрот.Интенсивность синтеза биомассы 31 г.Ьочз на средах с натиеным и обработанным теплом подсолнечном шроте е качестве единственного источника азота п редст а елены в табл.4, Из таблицы следует. что наиболее интенсивный рост стрептококков был на средах с необработанным подсолнечным шротом, При включении в среду обработанного автоклавированием е течение 1 ч при2002426 Таблица 1 110 С подсолнечного шрота биосинтез бактериальной массы уменьшался на 34. Аналогичная картина наблюдалась и при использовании зкструдированного подсолнечного врата,П р и м е р 4. Культивирование проводили как в примере 1, но вместо обработанного формальдегидом подсолнечного шротэ в качестве единственного источника азоте в среде использовали традиционные корма с различной естественной деградируемостью протеина (табл,5). При составлении рационов для жвачных животных полученные результаты позволят прогнозировать интенсивность синтеза бактериальной массы и регулировать течение микробиологических процессов в преджелудках. Предложенный способ позволяет сравнительно быстро и надежно проводить оценку качества протеина корма, а также прогнозировать интенсивность синтеза 5 бактериальной массы и регулировать течение микробиологических процессов в пред- желудках жвачных животных.Способ сравнительно прост в исполнении, не требует дорогостоящей аппаратуры, 10 исключается использование животных, аследовательно, затраты нэ их содержание. 56) Бинев Р.Г. Оценка биологической полноценности рациона с использованием в ка честве тест-обьекта тетрахименупириформис и аппарата "Искусственный рубец". Производство и использование расти, тельного белка. Краснодар, 1981.2002426 Таблица 4 аблиц атри корм ку в течение с судят по кол , подсчитан честых по Составитель И. Долгов ехрвд М.Моргентал Корректор А, Обруч едактор А, Зробок аказ 3197 Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента13035, Москва, Ж, Раущская наб., 4/5 изводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина. 10 Формула изобретенияСПОСОБ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА КОРМА, предусматривающий обработку испытуемого корма формальдегидом с последующим подсчетом содержания протеина в корме, отличающийся тем, что перед подсчетом содержания протеина в корме помещают обработанный формальдегидом корм в среду следующего состава, мас, , Фосфорнокислый однозаме щенный калий 0,02 Фосфорнокислый двузамещенный калий 0,05 Хлористый натрийСернокислый магнийХлористый кальцийСврноватистокислыйДрожжиСолянокислый цистеиДвууглекислый натриДистиллированная вовводят в испытуемыЗтг.Ьойв, выдерживаюо содержании протеинву бактериальных клетстандартному методу. 0,10,01 0,01 0,03 0,05 0,010,4 льнов льтуру