Способ профилактики болезни гамборо

(57) Использование: ветеринария, вирусология, Способ профилактики болезни Гамборо включает использование вакцины, изготовленной на основе штамма вируса ГКВ М 2200 и содержащей обезжиренное молоко в равном соотношении. Введение вакцины цыплятам осуществляют путем выпаивания вместе с водой в дозе 10- 10ТЦД 5 оцл.Э, Л,о6 табл,(21) 491930 (22) 19.03,9 (46) 30,06.9 (71) Всесою ветеринарн (72) А.С,Али (56) Ач)ап О (54) СЛОСО ГАМБОРО 13 риных фиб О/м вируса т матрацы с Затем мат- температучасов. лоем трехдживают по кого дейст- округления лкой зерниОсти моноСОВЫМ МОНОроблдСтов ина клетку, Внезарджегнрацы помещре +37,5-3Матрацы скратно замомере наступвия вируса вклеток и поястости безслоя. слоем культуры ку э расчета 0,01 ТЦД контроле оставляю Ой культурой клеток ают в термостат пр 8 С в течение 36 зараженным моно раживают и разл 1 ар ления цитопдтичес виде дегенерации и аления в клетках ме нарушения целостн в б Вируссодержащую культуральную жидкость сливают в одну емкость для контроля на стерильность по общепринятой летодике в соответствии с ГОСТом 28085-89 и биологическую активность путем титрации на культуре куриных фибробластов. Для титрования берут 7 стерильных пробирок и разливают стерильный физиологический раствор по 9 см. Из исходного разведения вируса (1.10) берут 1 мл, вносят в первую пробирку, тщательно перелешивают и 1 мл полученного раствора переносят в следующую пробИрКу, ПутЕМ ПОСЛЕдодатЕЛьнОГО СУДАРСТВЕН-ОЕ ПАТЕНТНДОМСТВО СССРОСПАТЕНТ СССР) 3, Бюл. Ф 24зный научно-исследовательскиый институт птицеводстваев1 зеазе, 23, 2, 457, 1978.Б ПРОФИЛАКТИКИ БОЛЕЗН Изобретение относится к ветеринарии,частности к вакцинам против болезни Гаморо и к способам их применения,Целью изобретения является получение высокоиммуногенной, эффективной, безвредной вакцины, а также обеспечение высокого уровня иммунитета в условиях массового заражения птиц и уменьшения трудоемкости процесса вакцинации,Для достижения цели в качестве вакционного штамма используют штамм "ВНИВИП", представляющий собой авирулентный генетически однородный вирусный материал, легко культивируемый в культуре клеток куриных фибробластов с высокой биологической активностью (титр вируса 10- 10ТЦДьогмл), Для профилактики болезни Гамборо птицу иммуниэиуют путем дачи вакцины с водой в дозе 10 -104 ТЦД 5 О/мл.На первом этапе работы берут 1 - 2 ампулы лиофилиэированного штамма "ВНИВИП", добавляют в них по 2 мл стерильного физиологического раствора, Полученную суспензию используют для заражения 1,5-литровых матрацов с 24-ча 1824443 Аразведения заполняются все пробирки, Длякаждого разведения используют отдельнуюпипетку,Вирус каждого разведения в обьеме 0,2мл вносят о 4 пробирки с культурой куриныхфибробластов, устанавливают е штативахпод углом 5 -7" в неподвижном состояниипри температуре 37,5 - 38"С на 1 час дляконтакта вируса с культурой клеток.Затем в каждую пробирку вносят поддер кивающую среду по 1 мл и инкубируютпои температуре 37,5 - 38 С в течение 7суток.Четыре пробирки с незараженной культурой клеток оставляот для контроля,Цитоанатомический эффект вируса учитывают под микроскопом в течение 7 сутоки высчитывэот тканевую цитопатическуюдозу.Вируссодержащую культуральную жидкость с титром не ниже 10- 10ТЦД 50/мл55 ВОиспольэуот для лиофилиэации с обезжиренным молоком,Лиофилиэированная вакцина хранитсяпри температура +4 -8 С в течение от 1года до 1,5 лет.П р и м е р 1, Эффективность вакциныпри введении цыплятам.различных доз.Опыты проводились на 14-дневныхСПФ-цыплятах с использованием вакциныактивностьО не ниже 10ТЦД 5 о/мл Пред 5,Оварительно были приготовлены десятикратные разведения вируса и каждом егоразведением были иммуниэированы по 10СПФ-цыплят, Вакцину выпаивали с водой,В контроле использовали 10 невэкционированных СПФ-цыплят. Ил 1 муногенная активность вируса в разньх разведенияхоценивали по результатам контрольного заражения цыплят в опытных и контрольныхгруппах через 14 суток после введения вакцины. Опыт проводили трижды (табл.1);Из данных таблицы следует, что 100 иммунитет создается при выпаивании вакцины СПФ-цыплятам в дозе 10 ТЦД 5 О/мл.эОднако учитывая, что при вакцинации цыплят с пассивным иммуитетом требуется наличие некоторого "запаса" вируса. вкачества иммуиэирующей дозы определиЛИ НЕ МЕНЕЕ - 10 ТЦДОО/кл,з,зП р и м е р 2. Эффективность вакцины отспособа ее введения,Было сформировано три подопытныхруппы по 15 голов в каждой и одна контрольная группа. Опыт проведен на 14-дневных СПФ-цыплятах и для иммунизациицыплят использоеэлэсь одинаковая дозавакцины (10 ТЦД 5 О/м 4, В пЕРвой гРУппЕ3,5цыплятам вакцину вводили с водой, вО второй - итрээзэльно, в третьей - онутримы 45 50 дневного возраста, Для этого было сформировано 13 групп цыплят по 15 голов е каждой. Цыплят с 1 по 4 группы вакцинировали вакциной производства ГДР в дозе 10 2 -3 -4. 10 , 10 и 10 тЦД 5 О/мл, соответственно.Вакцину производства Франции испытывали в аналогичных дозах на цыплятах 5, 6, 7 и 8 групп. Вакциной из штамма "ВНИВИП" выпаивали цыплят в 9 по 12 группах в дозах 10 10, 10, 10ТЦД 5 О/мл соответственно.Цыплята в 13 группе не вакцинировались, их испольэовали в качестве контроля, Оценку эффективности вакцин проводили по результатам конгрольного заражения 55 шечно, Контрольное заражение цыплят вопытных и контрольной группах проводиличерез 14 суток после вакцинации путем интранаэального введения вирулентного ви 5 руса болезни Гамборо (табл,2),Из данных, представленных в табл. 2.следует, что при введении вакцины в одинаковой дозе СПФ-цыплят наиболее высокийпроцент сохранности обеспечивается привыпойке вакцины с водой.П р и м е р 3. Эффективности вакциныот уровня материнского иммунитета цыплят,Опыты проведены на цыплятах разного15 возраста, доставленных из неблагополучного птицехозяйства по болезни Гамборо.Предварительно в каждой возрастной группе цыплят определили уровень материнскихантител. Для этого у пяти цыплят в каждой20. группе стерильно брали кровь, готовили общую пробу сыворотки и исследовали в реакции нейтрализации в культуре клетоккуриных фибропластов. Цыплят всех группвакцинировали против болезни Гамборо вдозе 10 ТЦД 5 о/мл пУтем выпойки и по 15з.зневакцинированных голов испольэовали вкачестве контроля.Через 14 суток после вакцинации цыплята во всех группах были заражены виру 30 лентным штаммом вируса болезни Гамборо(та бл.3).П р и м е р 4. Сравнительная оценкаэффективности разных вакцин от дозы еевведения.35 В опытах использованы вакцины производства Франции иэ штамма "Люкерт",производства ГДР и опытные образцы вакцин ы из штамма "В Н И В ИП".При проверке активности вируса в ука 40 занных вакцинах, титр биологической активности во всех случаях составил не ниже10 ТЦД 50/млИзучение эффективности укаэанныхвакцин проводили на СПФ-цыплятах 14 182444335 40 45 50 цыплят осех групп через 14 суток после их вакцинации (табл.4).Результаты контрольного заражения показывают, что, при вакцинации цьплят вирулентным штаммом в дозе от 10 до 10 ТЦДБоул. независимо от происхождения штамма, обеспечивается 100-процентная защита птиц. Наиболее высокую иммуногенную активность при воедении вируса даже в минимальных дозах, оказыоала вакцина. изготооленная из штамма "ВНИВИП",П р и м е р 5, Эффективность вакцин против болезни Гэмборо от способа их введения.Для сравнения испытывали три метода введения вакцин; выпойку, интраназальный и внутримышечный. Доза ооедения препарата для всех групп была одиндкооая, Было сформировано 9 подопытных и одна контрольная группа (табл,5).Эффективность применения оакцин производства ГДР и ВНИВИП при рдэличных методах введения оказалась одинаковой, но значительно выше по сравнению с французской одкциной при их интранэзальном и внутримышечном оведении,П р и м е р б, Эффектионость одкцин при иммунизации цыплят разного оозрдств,Иммунизацию проводили с использооанием трех вакцин на цыплятах 7-, 14-, 21-, 28-дневного возраста. Вакцину о одинаковых дозах даоали с оодой. Через 14 суток после вакцинации цыплят о подопытных и контрольных группах здраждли оирулентным вирусом болезни Гамборо. Результаты этих исследований представлены о табл,б.Из данных, представленных о таблице, следует, что, по своим иммуногенным свойствам при введении цыплятам с материнскими антителами, вакцина, изготовленная иэ штамма "ВНИВИП, не уступает препарату. выпускаемому в ГДР, и значительно превосходит вакцину Франции.Таким образом, полученные данные свидетельствуот о возможности изготооления вакцины иэ штамма "ВНИВИП" для предупреждения заболевания у цыплят, вызываемого вирусом болезни Гдмборо. 5 10 15 20 25 30 Произоодстоенные испытдич дкциь из штамма "ВНИВИП" проведены по рдзрешенио Главного управления ое ериндрии Гасдгропромд РСФСР (М: 41 109/61 от 22.01,90 г) в неблагополучном по болезни Гамборо птицехозяйстое Рязанской области. Птицу вакцинирооали соглдсно разработанному наставлению по применению, Было привито и ревакцинироодно более 5 гллн, птиц,Результаты испытаний показали, что живал вакцина против болезни Гдлборо из штамма "ВНИВИП" способствует повышению сохранности поголовья боойлеров нд 0,1 увеличенио живой массы одного бройлера нд 0,4 г и уменьшен 1 о затрат кормов д 0,07 кг д 1 ц привеса. Экономический эФфект с учетом затрат нд применение вакцины составил 2 б 331 руб.Основываясь нд результдтах лабораторных и производствеиых опытов по иэучееио и 1" 1 уногенньх соойст ез жиоос 1 вакцины против болезни Гдмборо, д также ее безвредности, можно заключить, что предлагаемая одкцинд при ее выпойке безвредна и обладает высокой илмуногенностьо, Вакцина из штаммд "ВНИВИП" ложет бьть использована о качестве средства специфической профилактики болезни Гдмборо птиц в неблагополучных птицехозяйствах. Формулд изобретения Способ профилактики болезни Гдмборо, окло дащий введение о организм цыплят одкцинь, состоящей из штдммэ вируса болезни Гдмборо и обезжиренного молока, о т л и ч д ю щ и й с я тем, чго, с целью пооышения уровня иммунитета и уменьшения трудоемкости вакцинации, о качестве штд.лма вируса используют штамм ГКВ М 2200 при следующем соот ошении компонентов, мдс. .Штамм ГКВ М 2200 ститрол 10 "-10 ТЦП 50/лл 50 Обезжиренное молоко 50 а введение осуществляют путем оыпаиодния вместе с водой в дозе 10- 10ТЦД 50/млэ,о л,о1824443 Таблица 1 абл ивность вакцины от способ ведени Эффективность вакцины из штамма "ВНИВИП" в зависимости от дозы введения1 О 1824443 Таблица 3 Таблиц Таблица ктионость оакцин против болезни амборо способа введенияЭффективность вакцины от уровня материнского иммунитета1824443 12 Продолжение табл.5 Таблица 6 Оценка эффективности вакцин против болезни Гамборо при иммунизации цыплят разного возрастаСоставитель А.Алиев ехред М. Моргентал Корректор И.Шулла да зводственно-издательский комбинат ",Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 аказ 2216 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5