Способ определения ингибирующих свойств плазмы крови

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК ЯО З(5 П 6 0 ОПИСАН К АВТОРСКО ИЕ ИЗОБРЕТЕМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Ивановский государственный медицинский институт им. А.С, Бубнова(56) 1.Терегулов Р,Г.,Гизатуллин А.Г.Иванченко В.И., Лехмус В.И., Халитова Г,Г. Роль почечного и сывороточного факторов в механизмах стимуляциии ингибиции .эритропоэза,-В кн. фПроблемы патофизиологии эритропоэза и циркуляции крови", Рязань, 1978, с.30-33.2, Гудим В.Й., Москалева Г.П. Ингибитор эритропозза в условиях экспериментальной посттрансфузионной полицитемии у крыс. - "Патологическая физиология и экспериментальная терапия",1976, Р 2, с.47-51,(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНГИБИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ПЛАЗМЫ КРОВИ путемпредварительной подготовки мьзаей,введения им исследуемой плазмы крови подсчета ретикулоцитов, о т л ич а ю щ и й с я тем, что,. с цельюсокращения сроков, упрощения и удешевления способа, предварительнаяподготовка мышей осуществляетсяпутем кровопускания в объеме 2-2,5от веса тела.1049811 ВНИИПИ Заказ 8407/41 Тираж 873 Подписное ш еа ш ежш шж ж 4щ ат аЕШ Ш Е 4Е т 63Филиал ППП "Патентф, г.ужгород,ул,Проектная,4 Изобретение относится к физиологии,к проблеме гуморальной регуляциикроветворения, а именно к способамопределения ингибирующих свойств плазмы крови.Известен способ определения ингибирующих свойств плазмы крови на мышах с Фенилгидразиноной анемией, Ин-гибирующие свойства плазмы кровивыявляются во всех случаях, снижение количества ретикулоцитов составляет в среднем 10,43,1 1,Однако в организм животноговводится фенилгидразин, являющийсясильным ядом, оказывающим общее токсическое действие, и способным вызы- .вать дегенеративные изменения в органах, имеющих важное. значение в регуляции эритропоэза: печени, селезенке, почках, мозгу. Этим можно объяснить низкую чувствительность способа.2 ОНаиболее близким к изобретениюявляется способ определения ингибирующих свойств плазмы крови, по которому на модели постгипоксическихполицитемических мышей после введения эритропоэтина производится под 2счет ретикулоцнтов.Способ осуществляют следующим рбразом. Забирают кровь у животныхс полицитемией и готовят плазму. Содержат мышей в барокамере пониженно- ЗОго давления в течение 14 ней по8 ч ежедневно, затем вводят мышамстандарт зратропоэтина и исследуютплазму крови в дозе 0,5 мл дваждыдва дня подряд, готовят мазки периферической крови и производятподсчет ретикулоцитов 21Недостатками способа являютсясложность предварительной подготов"ки мышей содержание в барокамере 40в течение 14 дней по 8 ч ежедневно),и большой дополнительный расходживотных, в результате их гибелиили непригодности для последующегоиспользования(по данным расход равен 45в среднем 30). Кроме того, дляосуществления способа необходимэритропоэтин, получение которогоотличается большой сложностью, осуществляется лишь опытным путем. До Ороговизна эритропоэтина и большаясложность получения делают недоступным использование фстандарта" эритропоэтина, а в случаях его использования приводят к трудно сопоставимым результатам. Способ позволяет .получить результаты от введения 1 млиспытуемого материалалишь через16 дней;Целью изобретения является сокращение сроков, упрощение и удешевле О.ние способа. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения ингибируюших свойств плазмы крови путем предварительной подготовки ьышей, введения им исследуемой плаз-. мы крови и подсчета ретикулоцидов, предварительная подготовка мышей осуществляется путем кровопускания в объеме 2-2,5 от веса тела.с. Предлагаемый способ выполняется следующим образом.У мыши - самца осуществляется забор крови иэ хвостовой вены, приготовление мазков периферической крови из хвостовой вены, приготовление мазков периферйческой крови, подсчет ретикулоцитов, Количество ретикулоцитов до воздействия 20. Определяется масса тела путем взвешивания, рассчитывается объем кровопотери из условия 2-2,5 от массы тела, вызывается кровопотеря путем забора крови из хвостовой .вены. Через 5 дней после кровопотери осуществляется забор крови из хвостовой вены, приготовление мазков периферической крови, подсчет ретикулоцитов. Количество ретикулоцитов 49, Это количество принимается за исходный Фон. В пятый и шестой день после ировопотери мыши вводит" ся подкожно по 0,5 мл исследуемой плазмы, проводится забор крови из хвостовой вены, приготовление мазков периферической крови, подсчет ретикулоцитов. Количество ретикулоцитов у мыши снижается до 34 (исходный фон 49), Таким образом, конечный результат можно получить через 7 дней.По данным известного способа количество ретикулоцитов крови полицитемических постгипоксических мьааей после введения посттрансфузионной сыворотки снижается на 34, а по предлагаемому способу количество ретикулоцитов крови у них после введения посттрансфуэионной сыворотки снижается на 19,79+1,86, что составляет 49. Таким образом, использование предлагаемого способа определения ингибирующих свойств плазмы крови на ьышах с кровопотерей позволяет сокра"гтить сроки получения конечного результата более, чем в 2 раза, упростить способ при сохранении достаточновысокой его чувствительности, позволяет значительно удешевить проведениеисследования. Для осуществления способа не требуется специальных средств,он может быть выполнен в любой физиологической лаборатории,