Способ размножения растений

(19) И 94 А 01 НЗО/11 п "с13ЧВ-"1"ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ЬСТ А ВТОРСНОМУ СВИ полуьтуре1. (Яо 1977,лас етею упот ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ(56) Шевченко С.В. К вопросу очении гаплоидных растений в кулпыльников, - Б 1 соС 1 апа йаЬасиш1 апасеае) Ботанический журнал,т. 62, с. 1176-И 79.(54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ РАСТЕНИЙ(57) Изобретение относится к обсельского хозяйства. Цель изобрния - повьппение выхода растениирощение способа. На 4-14-й день начала прорастания зерновок различных сортов яровой мягкой пшеницы в стадии разрыва колеоптиля проводят морфоло" гический анализ с целью отбора многозародьппевых 4 юрм. Зерновки высаживают в поле. Вычленяют пыльники и культивируют их Ы чдСго до получения взрослых растений. Выход растений подсчитывают как среднее число растений на один высаженный пыльник и выражают в процентах. В группах сортов с процентом встречаемости многозародышевых семян вьппе 0,1 Х выход растений (0,58 и 1,90 Х) превышает среднее значение выхода растений (0,383) в 1,5-5 раз, По описанной методике проводят раз-множение растений стручкового перца из многозародьппевых семян. 2 табл.Изобретение относится к сельскомухозяйству и может быть использованов производстве, в частности в семеноводстве и в селекции растений, дляполучения и ускоренного размноженияценного исходного материала.Цель изобретения - повышение выкода растений, упрощение способа,П р и м е р 1. Размножение растений с использованием в качестве доноров особей сортов пшеницы (Тгхсцшаезй 1 чцш Ь.).Зерновки 30-ти различных сортовяровой мягкой пшеницы (по 4-19 тыс.зерновок каждого сорта) трижды промывают водопроводной водой, замачивают в водопроводной воде в течение9 ч, снова трижды промывают водопроводной водой и раскладывают на помещенные в кюветы стекла, обернутыефильтровальной бумагой. В кюветы доливают водопроводной воды до верхнего уровня стекла, а сверху закрываюткрышками Зерновки проращивают в темноте при комнатной температуре. Морфобиологический анализ с целью отбора многозародышевых форм проводятна 4-.14-й день от начала прорастания.За этот период все проростки достигают стадии разрыва колиоптиля. В течение этого периода подсчитывают число непроросших семян,. выявляют и подсчитывают число многозародышевых формдля каждого сорта отдельно. Послеокончания морфобиологического анализаподсчитывают процент многозародышевыхформ на число проросших зерновок отдельно для каждого сорта,Результаты размножения растений сиспользованием, в качестве доноровпыльников, особей у сортов и селекционных форм пшеницы (Тгсцш аезйх чцш Ь.), у которых процент встречаемости многозародьппевых зерновок варьирует от 0,000 до О,ЗООЖ, приведены втабл. 1. По 100 зерновок каждого сорта высаживают в поле.В стадии трубкования проводят отбор побегов с колосьями. Срезают побеги, у которых влагалище предпоследнего листа (последний лист флаговый) находится на уровне центральной части колоса. Отобранные колосья вместе с листовой оберткой в асептических условиях операционной комнаты стерилизуют 5-7 минводным раствором диацида (0,33 г этанол 5 1 О 15 20 25 30 35 40 -45 50 меркулхлорйда; 0,60 г цетилпиридинийхлорида; 0,1 мл Твинна 1 л воды),после чего промывают тремя порциями стерильной, предварительно проавтоклавированной воды.Колосья освобождают от листовых оберток. Для культивирования вычленяют пыльники иэ двух нижних цветков 4-14-х колосков средней части колоса. В одну пробирку (диаметром 16 мм) с 10 мл питательной среды помещают по 15 пыльников. Среда для культивирования пыльников (среда У 1) содержит, мг/л: макро- и микросоли по Гамборгу (из среды В ) тиамин 0,5; пиридоксин 0,5; мезоинозит 100; никотиновая 1,0; аскорбиновая 1,0; 2,4-дихлорфеноксиуксусная 0,25 кислоты; сахароза 11.0000; агар 7000. Перед автоклавированием рН среды доводят до 5,8- 6,0. Пыльники инкубируют в темноте при 27+1 С и относительной влажности 70-80 Ж. Анализ культур пыльников осуществляют под стереоскопическим микроскопом, начиная с 25 сут от начала культивирования. Подсчитывают общее число структур всех типов, возникающих из пыльцы и отдельно эмбриоидов.Эмибриоиды отделяют отпыльников и пересаживают в другие пробирки на среду для прорастания (среда В 2), Среда Р 2 отличается от среды М 1 тем, что в ней содержание Ре-хеллата составляет вдвое уменьшенную концентрацию; сахарозы 10000 мг/л 2,4-Д заменяется на 3-индолилуксусную кислоту в концентрации 0,2 мг/л.На среде Р 2 эмбриоиды выращивают в условиях периодического освещения (освещенность 2000 лк, фотопериод 16 ч в сутки) при 27+1 С и относительной влажности 70-80 Х. В таких условиях некоторые эмбриоиды заканчивают дифференцировку и прорастают. По мере развития растений и появления у них 3-5 листочков и корней, их пересаживают в почву и выращивают до конца вегетации. Выход растений подсчитывают как среднее число растений на один высаженный пыльник и выражают в процентах (табл.1). Выход растений наблюдается для группы сортов, процент многозародышевых семян в которых находится в ин"тервале 0,051-0,17 Однако процентвыхода растений (0,23) остается нижесреднего значения выхода растений(0,38) для всех исследованных сортов и селекционных Форм (т,е, при отсутствии отбора доноров по признаку многозародьппевости семян). В группах сортов с процентом встречаемости многозародыневых семян выше 0,17 выход растений (0,58 и 1,90 Х),превышает среднее значение выхода растений (0,38) (в 1,5-5 раз). Поэтому с це лью повьппения выхода растений в качестве донорных растений целесообразно использовать особи тех сортов, у которых процент встречаемости много- зародышевых семян не ниже 0,1 Х. 15П р и м е р 2. Размножение растений с использованием в качестве доноров особей стручкового перца (Саря 3. - сцш аппццт 1) из многоэародьпневых семян. 20У перца (Саря.сцш аппццш 1,.) по методике, описанной в примере 1, отбирают лишь многозародьппевую форму (АДм), которая вегетативно размножается черенками, и у нее получают 2 В семена после самоопыления. В качестве опытных растений - доноров используют растения многоэародышевой Формы, а в качестве контрольных - растения из однозародьппевых семян того же ис ходного материала. В качестве изолированных частей используют пыльники, содержащие одноклеточную пыльцу. Цветочные бутоны стерилизуют диацидом, после чего из них вычленяют пыльники и по 5-6 шт. помещают в пробирки на питательную среду.Питательная среда для культивирования пыльников перца (среда 3) содержит, мг/л: макро- и микросоли по 4 О Мурасиге и Скугу (концентрация всех солей относительно прописи авторов уменьшена вдвое); тиамин 0,5; пиридоксин 0,5; никотиновая кислота 5,0; мезоиноэит 100; сахароза 20000;агар 7000,Результаты размножения растений с использованием в качестве доноров особей перца(Сарясцш аппццщ 1.,) из однозародьппевых и многоэародьппевых семян приведены в табл. 2;Анализ культур пыльников осуществляют 3 мес. Подсчитывают среднее число растений, полученных на один куль- тивируемый пЫльник.Из табл. 2 следует, что растения из пыльцы получены только при использовании пыльников многозародьппевой формы,независимо от варианта фитогормонов, Поэтому с целью повьппения и стабилияации выхода растений в качестве донорных необходимо испольэовать только растения из многоэародышевых семян и их потомства.Формула изобретенияСпособ размножения растений, включающий отбор растений-доноров, извлечение пыльников и последующее культивирование их п чдГго до получения взрослых растений, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повьппения выхода растений, упрощения способа, в качестве растений-доноров используют растения, выращенные иэ многозародьппевых семян или из семян сортов, у которых встречаемость многоэвродьппевых семян более 0,1 Е.ооло ооло оолЮ о 0 лооло щФ СЧ лл о ф оР Ж тл 4Ф Ц Е ол Ц ц вА3 ох мЛ ол ЭлРь В Я ел3 о ц х о Ц Ц Н 4% о. х э о э ох но ч Р о Ик оаС 1 ЦлСР ЬИРЭФЛ 33 о 1 Р У1 фл Я Р,Э О е И цЕ о й 11 аОЩ 1,ЭЭ ел РС ф е . лС 1 О ОлЭ ее сИ И СЧ 03ц ц1 Г;хиц Лл1 СЧД Сое дэ эР, Хю цо до ое СФС" 63 ЦО Р,ао ца РЛИ 0 30Ц СЧд цэконэдхо1 о цжЙ окоСО Во Э СС ц Х о Р СЧ Е 4 1 Г 1 х Рл э61лл э ц х э х дЧисло пыльниыход растеий, Х ков Сарзсщп агнишн .Местный:Особи из однозародьппе:.вых семян Кинетин 0,2 АНУ 0,1 Кинетин 0,2 144 0,00 84 0,00 0,1 257 0,000 Сарздспш аппциш ЬМестный:Особь из многозародьппевого семени и ее самоопыленное потомКинетин 0,2 2,4-Д0,1 Кинетин 0,2 ИУК 0,1 2,4-Д 1,0 ИУК 0 5 ство 0,98 102 102 0,98 179 1,12 154 1,30 0,1 214 0,47 Составитель С.КуваеваТехред В.Кадар Корректор В,Бутяга Редактор Н.Рогулич Тираж 627 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5