Устройство для заполнения партии трубок гелем

) б 018 27/26 ГОСУДАРСТВЕННЫ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕ Е до"нд центОПИСАНИЕ ИЗО К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬ(46) 30.04.83. Бюл. 16 (72) Б. Ф,Санталов и А.Т.Бортник (71) Институт биологической физики АН СССР(56) 1. Осборн Н.Н. Микрохимический анализ нервной ткани. М., 1978, с, с, 209-211.2. Шербаков В, П, и др. Обнаружение белка, кодируемого геном г 11 фага Т 4 методом електрофореза в градиенте концентрации полиакриламидного геля. - "Молекулярная биология 1970, т. 4, вып. 6, с, 841.(54)(56) 1. УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЗАПОЛНЕНИЯ ПАРТИИ ТРУБОК ГЕЛЕМ, содержащее цилиндрический стакан с опорой для трубок в его нижней части и нижнюю крышку со штуцером, расположенным по ее центру, о т л и ч а ю - щ е е с я тем, что, с целью одно дности заполнения трубок, устройство полнительно содержит сплошной цили ричесжий вкладыш, установленный по ру стакана с зазором относительно его стенок,2. Устройство по и. 1, о т л и ч аю щ е е с я тем, что опора для трубок выполнена. на внутренней поверхности нижней крышки в виде кольцевого бортик с шириной не менее суммы толщин стенки стакана и трубок.3. Устройство по п. 1, о т л и ч а ю щ е; е,с я тем, что, оно дополнительн снабжено верхней крышкой, идентнчнрй нижней крышке.1 10152Изобретение относится к лабораторной технике, в частности к устройствамдпя эпектрофореза в попиакрипамидномгеле, и может найти применение в биологии, биохимии и медицине.5При исследованиях связанных с применением эпектрофореза в цилиндрических трубках, заполненных гелем, весьмаважно, чтобы вся партия трубок, исполузуемых в эксперименте, была идентичнакак по составу геля, так и по высотестолба геля в трубках. Поэтому заполняют гелем сразу всю партию трубок изатем производят отбраковку,Известно устройство дпя заполненияпартии трубок, например капиллярных,гелем, содержащее цилиндрический стаканс отверстием в дне дпя входа растворагеля, сетку расположенную в нижней части стакана дпя опоры трубок, стержень,расположенный в центральной части стакана по его оси и конструктивные элементы, соединенные со стержнем и обеспечивающие вертикальное положение трубок встакане1.Недостатком известного устройстваявляется недостаточная однородность заполнения трубок гелем, обусловленнаянеравномерным распределением входящего потока геля и неоднородностью успо 30вий полимеризации.Наиболее близким техническим решением к предлагаемому является устройстводпя заполнения партии трубок гелем, содержащее цилиндрический стакан, проницаемую для геля перегородку в нижней З 5части стакана дпя опоры на нее трубок инижнюю крышку в форме конуса основанием примыкающего к стакану, в вершиНе которой штуцер дпя подачи раствора40геля 21.Недостатком устройства является недостаточная однородность заполнения трубок гелем. Этот недостаток обусловлен тем, что вертикальное расположение трубок по всему сечению стакана, коническая крышка и перегородка в нижней части стакана не обеспечивают достаточно однородного распределения входящего потока геля по всем трубкам. Кроме того, при50 полимеризации геля центральные и крайние по расположению в стакане трубки оказываются в неодинаковых условиях относительно отвода тепла, выделяющегося при попимеризации геля, вследствие чего скорость попимеризации геля в различных трубках оказывается неодинакс- вой, что также приводит к различиям в 89 2составе и высоте геля в различных трубках.Цель изобретения - повышение однсродности заполнения трубок гелем.Поставленная цвпь достигается тем,что известное устройство для заполнения партии трубок гелем, содержащеецилиндрический стакан с опорой для трубок в его нижней части и нижнюю крышкусо штуцером, расположенным по ее центру, дополнительно содержит сплошнойцилиндрический вкладыш, установленныйпо центру стакана с зазором относительно его стенок.При этом опора дпя трубок выполнена на внутренней поверхности нижнейкрышки в виде кольцевого бортика с шириной не менее суммы топщин стенкистакана и трубок,В преимущественном варианте исполнения стакан снабжен верхней крышкой,выполненной аналогично нижней крышке.Существо изобретения состоит в том,что благодаря осевой симметрии устройства и однорядовому расположению трубоквсе трубки оказываются в одинаковых условиях не только во время заполнения устройства гелем,но и во время попимеризации.Выполнение опоры дпя трубок в виде кольцевого бортика на крышке устройства об.легчает выем заполненных трубок из устройства.Наличие верхней крышки делает сим -метричным поток истекания вытесняемой из устройства воды. Это также оказывается существенным при высоте заполнения трубок близкой к верхнему краюустройства, .так как в этом случае несимметричный поток истекания затрагивает ипограничный верхний спой геля, являясьдополнительным фактором неоднородностизаполнения.На фиг, 1 показан частичный разрезустройства дпя заполнения партии трубокгелем с вкладышем и его поперечное сечение без вкладыша; на фиг. 2 - частьразреза устройства, показывающая в большем масштабе заполняемую, трубку, опирающуюся. частью нижнего торца на бортики нижней крышки.Устройство дпя заполнения партиитрубок гелем состоит из цилиндрическогостакана 1, нижней и верхней крышек 2со штуцерами 3 и кольцевыми бортиками4, сплошного цилиндрического вкладыша5. На фиг. 1 и 2 показаны цпя ясноститрубки 6, установленные в зазоре междувкладышем 5 и стенками стакана .1, с. вразрезе А-А на фиг. 1 показан также289 4цо уровня верхнего штуцдра 3 и оставляют открытым во избежание возникновенияперепадов давления вследствие усацки геля при полимеризации,По окончании полимеризации геля вустройстве крышки 2 свинчивают, иэ стакана 1 выталкивают сначала вкладыш 5,а затем извлекают заполненные гелемтрубки 6, которые, как правило, извлекаются все сразу в виде цилиндрическогоблока.Работа устройства проверялась на лабораторном макете, прецназначенном цлязаполнения трубок с внутренним циаметром 2,5 мм длиной 120 мм в количестве 30 шт. Трубки заполнялись гелем слинейно возрастаюшей сверху вниз вцольтрубки концентрацией акриламицового геля с градиентом плотности от 4 цо 20%,высота столбика геля 95-100 мм, Разброс по высоте столбиков полимеризованного в трубках геля в пределах 3 мм, чтозначительно лучше результатов, получаемьгх другими устройствами, дающими разброс цо 15 мм при той же высоте гелей.Процент отбраковаяных трубок (гели спристеночными пузырями и разрывами геля в трубках) обычно незначителен исоставляет 3-5 трубок на партию, в тоВремя как известные устройства даютполовину или одну треть бракованныхтрубок. Дальнейшая проверка проводиласьс помощью электрофореза яа гомогенатебелков, например, мозга крысы, ганглияхбольшого пруцовика. Белки подвергалисьэлектрофоретичеекому раэцелению в приготовленных с помощью предлагаемогоустройства гелях с градиентом плотности420%, окрашивались кумаси-голубым иподвергались ценситометрированию нацвухволновом микроценситометре ШимацзуСб -910. Результаты измерений показали, что повторяемость ценситограмм цляодинаковых проб белков по значению оптической плотности и электрофоретическойпоцвижности в фракциях белков уклацывается в 5%, в то время как известныеустройства цля приготовления партии трубок с гелем не позволяют получать воопроиэвоцимость лучше 15%. 3один из возможных вариантов выполнения ограничителя цля вкладыша 5, которым в данном случае является торец,7 штуцера 3.ф Устройство работает слецующим обра 5 эом.На стакан 1 навинчивают нижнюю крышку 2, располагают устройство наклонно или горизонтально и уклацывают в него вдоль стенки около 1/3 всей партии заполняемых трубок 6. Затем по уложенным трубкам 6 вцвигают вкладыш 5 цо упора в торец 7 штуцера 3 или любой другой каким-либо образом устроенный ограничитель. После чего укладывают 1 остальную часть партии трубок так, что они заполняют все пространство по коль цу между вклацьццем 5 и стенкой стакана 1, Устройство устанавливают вертикально, -навинчивают верхнюю крышку 2. Далее, как обычно, устройство заполняется водой, пузырьки возцуха,эацерживающиеся на стенках стакана 1 и трубок 6.тем или иным способом изгоняются, после чего к штуцеру 3 в нижней крышке 2 подключают источник гепевого раствора. Раствор геля подают, например, с помощью насоса или из сосуда с раствором, расположенного выше устройства, через гибкую трубку (не показаны), подключенную к штуцеру 3.Поступающий в нижнюю часть устройства более тяжелый, чем вода, раствор геля вытесняет воду, заполняя нахоцящиеся в устройстве трубки 6 и пространство между ними. В заявляемом устройстве цля изгнания пузырей возцха удобно вос- пользоваться вакуумной откачкой через . штуцер 3 в верхней крышке 2. Благодаря осевой симметрии в предлагаемом устройстве входящий поток геля равномерно распределяется по всему заполняемому пространству, чем обеспечивается однородность условий заполнения.В конце процедуры заполнения часть раствора геля, содержащуюся в соецинительных трубках и нижней части устройства цо уровня нижних торцов трубок.6, вытесняют: раствором сахарозы, по плотности превосхоцяшим плотность раствора геля; эту операцию осуществляют путем ф замены раствора геля в источнике на раствор сахарозы. После этого устройство цля заполнения трубок Отключают от источяика, причем часть соецинительной трубки Оставляют подключенной к устрой- ф ству, а свобоцяый ее конец поцнимаютФ Применение предлагаемого устройства позволяет экономить в 2-3 раза деФицитные реактивы и рабочее время за счет почти стопроцентного выхоца пригодных цля работы гелей и высокой воспроизводимости получаемых результатов, 10152893199/41 Тираж 873 ВНИИ Пи Государственного по делам изобретений.113035, Москва, Ж, млиал ППП "Патент, г. Ужгоро Подпитета СССкрытийсхая наб.,тор Ю. Макаренкоое