Способ количественного определения трихомонацида

(21) (22) (46) (71) цинск (72) (53) (56) дания а ится к област и может найти Изобретение отналитической хими шен О ехническои сти и д ся спотению п результату явля енного определе тигаемооб каче ия трихоутем возосуществляемыиа пробу неорганиДанный способ ь монацид действи еск алочувствисоставля реаген чувствительност 0 мкг/мл. льныи все ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ 2853685/2518.12.7907.08.92. Бюл. В 29Читинский государственный медиий институтЛ.А,Хабаров и Л,И.Поваляева 535.37 (088,8)Государственная фармакопея Х изМ., 1968, с, 708-710. сударственная фармакопея Х изд - И., 1968, с. 709 (прототии),применение в технике определения трихомонацида.Известен способ количественного определения трихомонацида, заключающийся в измерении собственного поглощения в ультрафиолетовой области спектра при 357 нм.Этот способ малоэффективен, так как многие органические соединения поглощают в ультрафиолетовой области, при этом известный способ обладает малой чувствительностью, которая сосавляет всего 2 мкг/мл, Наиболее близким к данному изоб 1)5 С 01 М 2/64, А 61 В 10/00(54)(57) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИХОМОНАЩЩА путем обработки пробы неорганическим реагентом с последующим измерением интенсивности флуоресценции раствора, о т л и - ч а ю щ и и с я тем, что, с целью повышения чувствительности, пробу обрабатывают хлоридом цинка в диоксане. Целью изобретения является повыие чувствительности.Поставленная цель достигается тем, что при способе количественного определения трихомонацида путем обра-о ботки пробы неорганическим реагентом с последующим измерением интенсивности Флуоресценции раствора, пробу обрабатывают хлоридом цинка в диок- О сане.ОСпектр возбуждения полученного при этом раствора лежит в области от 300 Я до 440 нм с максимумом 376 нм, а спектр излучения флуоресценции - от 420 до 580 нм с максимумом 502 нм.Прямолинейная зависимость между концентрацией трихомонацида и интенсивностью флуоресценции раствора лежитот 0,04 до 1,5 мкг/мл. Опытные данные изложены в таблицах 1,2,3,4,В лекарственной форме сопутствующие ингредиенты (наполнители) не влияют на интенсивность флуоресценции.3 8 бОПри содержании 1 мкг/мл крови илн мочи трихомонацид открывается полнос- Ф. тью (1003), то есть компоненты крови и мочи не влияют на интенсивность Флуоресценции. Чувствительность спо. соба - 0,04 мкг/мл.Способ осуществляется следующим образом,П р и м е р. Определение трихомонацида в таблетках по 0,05 г 0,03- 0,04 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток переносят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 70-80 мл диоксана и энергично встряхивают 3- э мин. Затем доливают диоксаном до метки (раствор А). 10 мл раствора А переносят в мерную колбу на 100 мл и добавляют диоксаном до метки (ра 4 580створ Б), К 1 мл раствора Б прибавляют диоксаном до метки (раствор Б).К 1 мл раствора Б прибавляют 1 мл17-ного раствора хлорида цинка в диоксане, 8 мл диоксана и флуориметрируют относительно стандартного раствора трихомонацида в диоксане с содержанием 10 мкг/мл, для чего к 10 1 мл стандартного раствора прибавляют 1 мл 1 Х-ного раствора хлорида цинка в диоксане, 8 мл диоксана и флуориметрируют по отношению к ис-"следуемым растворам (табл. 4).Использование способа определениятрихомонацида позволило повыситьчувствительность, доведя ее до величины прядка 0,04 мкг/мл. Таблица 1Зависимость интенсивности флуоресценции трихомонацида от концентрации.хлорида цинка (с = 0,5 мкг/мл) Концентрация хлори- Относительная инда цинка, 7 тенсивность флуо- ресценции 0,01 70 0,05 82 0,10 0,50 90 1,00 90 2,00 90 Таблица 2Влияние времени на устойчивость Алуоресценции трихомонацида с хлоридом цннка в диоксане 72 7 2860580 Продолжение табл.2 70 30 69 40 65 50 60 60 Та блица 3 Зависимость интенсивности флуоресценции комплекса от концентрации трихомонацида при взаимодействии с 17 ным раствором хлорида цинка в диоксане0,01 0,1 0,02 0,2 0,03 0,3 0,04 0,4 0,05 0,5 0,2 10 10 10 0,4 10 26 0,6 18 27 42 26 0,8 35 57 34 1,0 43 73 0,06 0,6 0,07 0,7 43 1,2 51 89 1,4 60 99 0,08 0,8 0,09 0,9 0,10 1,0 1,6 68 00 1,8 68 76 100 2,0 77 85 100 Таблица 4 флуориметрическое определение трихомонацида в таблетках по 0,05 г.О, 91 0,92 Редактор Е.Гиринская Техред М.Моргентал Корректор П, Гереии Заказ 3469 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5