Кормовая добавка для жвачных животных

29 АЗ оюз советскихОЦИАЛИСТИЧЕСКИХеспуБлик 19(3 щность; кормовая д вотных включает би щество и наполните ически-активного держит полиметио , 440000 в 8500 пр ин-лизин 0,4-2,0 в наполнитель - остал водству. С жвачных ж активное в ве биоло добавка с зин с мол. нии метио 0,1 - 1,00 и ологическиль, в качествещества ил "полили" соотношеколичестве ное. 2 табл,)Гг) Рон Пуленк Ню) Антуан Пюигсениель Берковиси(Ег)тент М 0015668,б 2 коого еля продукт астворитель рвется этилацется дважды К рбобензоксия в результате ксана в его расношения 1 - 1 (по Изобретение относится к кормопроизв дству.Цель изобретения: повышение стабильн сти добавки при рН около 6 и выделениеологически активного вещества при рН 1Изобретение иллюстрируется следующ ми примерами,П р и м е р 1. Получение добавки поли ериз.К-ка рбоксиангидрид К-карбобензокси . лизина полимеризуют в присутствии иниц атора (метилата натрия) в диоксане при т мпературе 20 С, Исчезновение мономера и реакционной среды позволяет следить за е о полимеризацией. Полимериэация ззк нчивается через 75 часов. Полученный и лимер имеет вид вязкого продукта.Полимер обрабатывают уксусной кислот й, насыщенной бромистоводородной кисл той, в течение 30 мин,Полученный осадок промывают этилов 1 м спиртом и высушивают. После раствор ния в воде и диализа полученный полил зин выделяют из раствора путем лиофилизации, Молекулярный вес составляет порядка 290000 дальтон.Дезаминирование полилизина позво- С. ляет проверить наличие свободных аминогрупп, После кислотного гидролиза анализ показывает один единственный пик, соответствующий наличию а-амино я-гидроксикапроновой кислоты, СОК-карбоксиангидрид К-карбобензоксилизина получен путем барботирования безводного фосгена в суспензии К-карбо- ф бензоксилизина в безводном тетрагидро- С фуране при температуре 45 С. После о нчания реакции барботирование безвод- ЧО н азота позволяет удалить излишек фосгена,После испарения раств растворяется в этиилацетат испаряется, а остаток заби татом. Операция повторяе карбоксиангидрид К-ка лизина кристаллизируетс медленного добавления ге твор в этилацетате до соот объему).Полученные кристаллы промываются смесью гексана с этилацетатом (в пропорции 9 - 1 по объему). Кристаллы плавятся при 97 ОС,П р и м е р 2. Поли- -лизин, растворенный в пропорции 5 мг/см буферного фосзфата натрия (100 мМ) с рН 6,5, содержащего 150 мМ хлористого натрия, выдерживают при температуре 4 С, При энергичном перемешивании и поддержании постоянного рН путем добавления щелочи натрия 0,1 Н добавляют 1 моль М-карбоксиангидрида метионина на остаток лизина.После выдерживания в течение ночи при температуре 4 С продукт диалиэируют водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируют.В результате получают полиметионил-поли- -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 0,55, а содержание остатков измененного лизина составляет 27 о Производительность фиксации составляет порядка 80 .М-карбоксиангидрид :метионина имеет вид маслянистого продукта и получается в вышеописанных условиях для последующего получения й-карбоксиангидрида М- карбобенэокси -лизина.П р и м е р 3, Действуют как было описано в примере 2, но используют 3 моля й-карбоксиангидрида :метионина на остаток лизина и получают поли -метионил-поли -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 1,90, а содержание остатков измененного лизина равно 49%.П р и м е р 4, Действуют как было описано в примере 3, но используют 5 молей М-карбоксиангидрида :метионина на остаток лизина и получают поли:метионил-поли- -лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 3,40, а содержание остатков измененного лизина составляет 70%. П р и м е р 5, Поли-:лизин растворяют при температуре 4 С в буферном растворе бикарбоната натрия 100 мМ) при рН 10,2, содержащем 150 мМ хлористого натрия, Добавляют 1 моль й-карбоксиангидрида :метионина на остаток лизина. Дают температуре подняться до 20 С, а рН реакционной смеси регулируют до рН 3-4 в течение 10 мин. После охлаждения до 4 С продукт диалиэируют дистиллированной водой в течение 3 суток, после чего раствор лиофилизируется.Получают полиметионил-поли:лизин, в котором соотношение метионин-ли 5 10 зин составляет 0,45, а содержание остатков измененного лизина составляет 45%,П р и м е р 6. Действуют как было описано в примере 5, но добавляют 1,2 моляМ-карбоксиангидрида-метионина на остаток лизина и получают поли- -метионил-поли-лизин, в котором соотношение метионин-лизин составляет 0,53, а содержание остатков измененного лизина составляет 500 . П р и м е р 7, Действуют как было описано в примере 5, но добавляют 3 раза по 1молю й-карбоксиангидрида Е-метионина наостаток лизина и получают поли- -метио 15 нил-поли- -лизин, в котором соотношениеметионин-лизин составляет 2,10, а содержание остатков измененного лизина составляет 66%.Наличие лизина и метионина в пслиме 20 рах может быть выявлено опытным путем врезультате последовательного переваривания при помощи ферментов, имеющихся впищеварительном тракте, например. пепсина, поджелудочного сока, кишечной амино 25 пептидазы.В табл, 1 приведены относительные количества лизина и метионина, высвобождающиеся в ходе переваривания.Результаты таблицы показывают, что30 примеры 4 и 7 не гарантируют достаточногорасщепления "сополимера", В этих примерах цепь полилизина включает более 50 о остатков модифицированного лизина (пример 4, где 70 озвеньев лизина модифициро 35 ваны и пример 7, где модифицированы 66%звеньев лизина).Поэтому сополимеры, у которых максимально 50% структурных групп лизина в цепи полилизина замещены цепью40 полиметионина, являются эффективными.В зависимости от типа используемогополимера уровень наличия обеих аминокислот очень различен,Обычно продукты, полученные в резуль 45 тате полимеризации при рН 6,5 и имеющиеотносительно высокое содержание метионина (пример 3), легко гидролизуются, тогдакак продукты, полученные при рН 10,2 иотличающиеся высоким содержанием ос 50 татков измененного лизина (пример 7), менее доступны для протеолитическихферментов, Кроме того, продукты, полученные при рН 6,5 и имеющие высокое содержание остатков измененного лизина,55 гидролизуются легче, чем продукты, полученные при рН 10,2 путем последовательных добавлений й-карбоксиангидридаметионина,Обычно удовлетворительно наличиеобеспечивается в случае, когда соотноше 1836029ние метионин-лизин равно 2 или болеепредпочтительно около 1, причем это соот ношение может изменяться е зависимостиот используемого метода получения полиметионилполилизина.Питательная ценность полиметионилполилизинов, используемых в композицияхпо настоящему изобретению, была выявлена на примере крысы, получавшей питаниес недостаточным количеством лизина и метионина. Например, использовали полилизин и поли-Е-метионил-поли-Е-лизин, вкотором соотношение метионин-лизин составляло порядка 1, а содержание остатковизмененного лизина составляло 300 . Полученные результаты представлены в табл. 2,Из вышеприведенной таблицы следует.что добавка в базовой режим лизина и метионина существенно увеличивает приростживотных и что прирост животных, получающих режим с добавкой поли:метионилполи- -лизина, не очень отличается отприроста животных, режим питания которых дополнен свободными аминокислотами. Кроме того, добавление лизина в видеполи- -лизина оказывается более эффективным, чем добавление свободного лизина.Полиметионил-полилизин по настоящему изобретению растворимы, в рубце, нообладают стойкостью к бактериальномуразложению. Например, поли- -метионилполи-:лизин (0,5 г) может быть помещен внейлоновые мешочки, размер ячеек которых составляет 300 х 300 микрон. Мешочкиинкубируются е течение 48 часов в рубцеовец с фистулами, Затем мешочки вынимаются и промываются, Количество остаточного активного вещества определяетсясоответствующим методом. Количества-лизина и-метионина, оставшиеся. внейлоновых мешочках, составляют соответственно 80 и 60 исходных количеств, Когда :лизин и-метионин принимаются всвободном виде, лишь малая часть этих аминокислот избегает микробной ферментации,Таким образом, полиметионил-полилизин по настоящему изобретению представляет собой очень хорошие добавки в рационпитания жвачных животных. Настоящее изобрегение касается композиций для кормления скота, содержащихдостаточное количество полиметионил-полилизина5 Полиметионил-полилизины могут добавляться в готовые комбикорл э.Они мокнут добавляться также в кормовые добавки. чаще всего вместе с другимивеществами, например, витаминами и ми 10 неральными солями. Эти кормовые добавкимогут либо добавляться в рацион, либо потребляться отдельно в чистом виде и составляют обычно от 5 до 20 кормовогорациона.15 "Премиксы"., используемые для приготовления кормовых добавок или кормов,содержат обычно от 1 до 20% полиметионил-полилизина.Сами "премиксы" получаются обычно из20 концентратов, содержащих от 99,9 до 20 о полиметионил-полилизина, к которому добавляют, например, пищевые красители,амортизаторы, диспергирующие вещества ипищевые наполнители.25 Концентраты и премиксы имеют обычнопорошкообразную форму. Кормовые добавки и комбикорма могут быть либо в видепорошка, либо в виде гранул, полученныхобычными способами,30 П р и и е р 8, К 1000 г фуража равномерно вводят диспергированием 20 г порошкообраэного кормового концентрата,содержащего 10% полиметионил-полилиэина, е котором соотношение метионин-лизин35 составляет около 1,Получают корм, который непосредственно усваивается животными,Формула изобретения 40 Кормовая добавка для жвачных животных, включающая биологически активное вещество и наполнитель, о т л и ч а ю щ а яс я тем, что, с целью повышения стабильности добавки при рН около 6 и выделении 45 биологически активного вещества при рН2,5, в качестве биологически активного вещества добавка содержит полиметионилполилизин с мол.м, 440000-850000 при соотношении метионил;лизин 0,4 - 2,0 в ко личестве 0,1 - 1,0 ои наполнитель - остальное.,Таблица 1 Таблица 2 Составитель Г.МазаеваТехред М. Моргентал Корректор С,Патрушева Редактор О,Стенина Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 2988 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва. Ж, Раушская наб., 4(5