Способ консервирования роговицы и устройство для его осуществления

(я)з А 01 й 1/02 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(71) Институт проблем криобиологии и криомедицины(56) Авторское свидетельство СССРЬ 404455, кл. А 01 й 1/02, 1973.(54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ РОГОВИЦЫ И УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ(57) Использование: в криобиологии и криомедицине, Сущность изобретения: роговицуфиксируют, помещают в контейнер с криопротектором, замораживают со стороны переднего эпителия через равномерный слой криопротектора при одновременной теплоизоляции со стороны каймы склеры, Устройство включает корпус 1, имеющий нижнюю сферическую часть 2 и герметичную крышку 9 с концентричными гофрами, фиксатор 4 роговицы. Фиксатор 4 содержит фиксирующее кольцо 5 с внутренней конической посадочной поверхностью и кольцевым выступом 11 и прижимное кольцо 6, помещающее фиксирующую коническую поверхность и боковую коническую поверхность. Диаметры верхней и нижней кромок боковой конической поверхности соответственно больше или меньше диаметра кольцевого выступа. 2 с,п.ф-лы, 1 ил, 4 табл.Изобретение относится к криобиологии этом охлаждение роговицы ведут со сторои криомедицине, ны нижней части 2 корпуса 1 через тонкийцелью изобретения является повыше- (1,0-1,5 мм) равномерный слой криопротек, ние эффективности способа. тора. Расположение склеральной части роНачертежепредставленасхемаустрой. 5 говицы между фиксирующим кольцом 5 иства для консервирования роговицы. прижимным кольцом 6, которые выполненыустройство включает .полый корпус 1, из теплоизолирующего материала, а такженижняя часть 2 которого выполнена сфери- большая толщина (4 - 5 мм) криопротектораческой. Вовнутренней полостикорпуса 1 на в фиксаторе 4 обеспечивают равномерноекольцевой площадке 3 установлен фиксатор .10 замораживание роговицы.4 роговицы, выполненный в виде двух коак- Процесс отогрева выполняют помеще.сиально расположенных колец- фиксирую- нием устройства в подогретую воду.щего кольца 5 и прижимного кольца 6. П р и м е р осуществления способа. ИзКонтактные рабочие поверхности 7 и 8 ко- глазных яблок кроликов 10 шт. от 5 кролилец 5 и 6 выполнены койусообразными(под 15 ков) вырезали роговицы с каймой склеры,углом 40-55 ОС), Ккорпусу 1 герметично при- закрепляли их в фиксаторах 4, переносиливарена крышка 9 с кольцевым выступом 10, во внутреннюю полость корпуса 1, заполнявнутренний диаметр которого соответству- ли криопротектором - 10-ным ПЭОиет наружному диаметру фиксирующего инкубировали в течение 30 мин. Слой криопкольца 5, На внутренней поверхности фик ротектора между роговицей и стенкой сосирующего кольца 5 имеется кольцевой вы- ставлял 1 мм. После герметизации устройствоступ 11, который с наружным диаметром помещали в замораживатель.и охлаждали соприжимного кольца 6 образует замковый . скоростью 1-2 град/мин доС. Затемустэлемент 12. Высота внутренней полости ройство погружали в жидкий азот и хранилификсирующего кольца 5 больше высоты 25 при -196 С втечение 7 сут.прижимного кольца 6 на толщину каймы Параллельно замораживали роговицусклеры. Внутренняя полость корпуса 1 и (10 шт. от 5 кроликов) в известном устройстфиксатор 4 роговицы заполнены криопро- ве согласно прототипу,тектором, Отогрев производили в водяной банеУстройство работает следующим обра при 42 ОС в течение 1,0-1,5 мин. Послезом. отогрева роговицу извлекали за кайму склеНа контактную рабочую поверхность 7 ры и исследовали клетки заднего эпителия.Фиксирующегокольца 5 укладываютрогови- Для подсчета количества клеток заднегоцу, выделенную из глазного яблока в виде . эпителия препараты окрашивали гематокконеосклерального комплекса, При этом 35 силином и эозином. Подсчет клеток проиэсобственно роговица выступает за наруж- водили под микроскопом МБИприную поверхность фиксирующего кольца 5. увеличении 600 х в 13 полях зрения: 9 - ценНесдавливающую Фиксацию комплекса тральных и 4 - периферических. Для этогопроизводят по кайме склеры контактной ра- использовали сетку с площадью квадрата,бочей поверхностью 8 прижимного кольца 6 40 равной 0,0576 мм .2при его введении внутрь фиксирующего В табл. 3 представлен сравнительныйкольца 5 через кольцевой выступ 11. Зафик- анализ показателей табл. 1 и 2,сированный комплекс переносят в корпус 1 Различия между показателями табл. 1 ина кольцевую площадку Зпри этом рогови по количеству клеток заднего эпителияца располагается в нижней части 2 корпуса 45 95,0."1,57, по коэффициенту вариации -1, В фиксатор 4 и корпус 1 наливают криоп,8 й 1,57,ротектор, равномерный слой которого меж- Для оценки биологических свойствду роговицей и нижней частью 2 консервированных роговиц проводили кеобеспечивается геометрией контейнера, ратопластику на кроликах, для чего былоучитывающей кривизну роговицы по сред использовано 10 роговиц, консервированнестатическим размерам глазного яблока. ных заявленным способом (1 группа) и 10 -Корпус 1 накрывают крышкой 9 и герметич- известным (И группа). Модель аутокератопно приваривают ее к корпусу 1 по перимет- ластики: правый глаз- донор, левый - рециру, Центрированиефиксатора 4 вкорпусе 1, пиент позволила избежать явленийа также компенсация изменения внутренне тканевой несовместимости, наблюдающихго объема устройства при изменении темпе- при аллокератопластике, и получить объекратуры в процессе охлаждения и нагрева тивные данные о влиянии условий замораобеспечивается кольцевым выступом 10, Ус- жива н и я на конечное состоя н иетройство помещают в эамораживатель. при биологического материала. Срок наблюде1835238 Таблица 1 Количество клеток заднего эпителия после консервироварования заявленным способомния за животными после трансплантации - 1 мес, Через 1 сут. после трансплантации у всех оперированных животных наблюдалась конъюктивальная иньекция, незначительное отделяемое, пересаженные 5 лоскуты были слегка отечны. Через 3 сут, в группе 8 трансплантатов были прозрачными, 2 оставались несколько отечными. Во И группе прозрачными были 6 трансплантатов, 4 - в значительной степени отечны, 10 рисунок радужки и область зрачка через них плохо определялись, К 7 сут, вгруппе 9 лоскутов были прозрачными, 1 оставался резко отечным, во И группе 7 трансплантатов были резко отечны, 2 отечны в меньшей 15 степени, 1 оставался прозрачным. Через 14 сут. воставалось такое же состояние: 9 прозрачных и 1 мутный, Такая картина приживления оставалась до 30 сут. Во И группе к 14 сут. и до конца срока наблюдения 8 20 трансплантатов были мутными, 1 полупрозрачный и 1 прозрачный, В обеих группах отсутствовали осложнения, связанные с кератопластикой. В табл, 4 представлены результаты трансплантации. 25Различия по количеству прозрачных приживлений 80 +14. Формула изобретения 30 1. Способ консервирования роговицы,включающий фиксацию роговицы, помеще ние ее в контейнер с криоппотекором - 10 полиэтиленоксид, инкубэцию в течение 30 мин, замораживание со скоростью 1-2/мин до -8"С с последую цпм погружением в жидкий азот, хранением при -190"С 7 суток и отогревом в водяной бане при 42 "С в течение 1,0-1,5 мин, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения эффективНости способа, замораживания и отогрев осуществляют направление со стороны переднего эпителия через равномерный слой криопротектора при одновременной теплоизоляции со стороны каймы склеры,2, Устройство для консервирования роговицы, содержащее полый корпус с крышкой, внутренняя полость которого заполнена риопроектором и фиксатором с роговицей, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что фиксатор выполнен в виде двух коаксиально расположенных колец, контактные рабочие поверхности которых выполнены конусообразными, при этом замковый элемент образован кольцевым на внутренней поверхности фиксирующего кольца и наружным и диаметром прижимного кольца, причем высота внутренней полости фиксирующего кольца больше высоты прижимного кольца, а корпус в нижней части выполнен сферическим, кроме того, крышка снабжена кольцевыми выступом, внутренний диаметр которого соответствует наружному диаметру фиксирующего кольца.1835238 Таблица 2 Количество клеток заднего эпителия после консервирования известным способомТаблица 3 абл Составитель Ю.РудькоТехред М,Моргентал Корре знецов Редак рецман Заказ 2967 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Мофква, Ж, Рауюская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Пате ул. Гагаринаэти обозначение являются результатом статистической обработки, что специалистам . понятно.