Способ прогнозирования течения хронических заболеваний печени

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1)5 6 01 й 3353 ионитЧЕ- ПЕе, ик ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССР(71) Всесоюзный научный центр радиацной медицины АМН СССР(56) Авторское свидетельство СССРМ 1421309, кл. А 61 В 10/00, 1986.(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ Т НИЯ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЧЕНИ(57) Изобретение относится к медици частности гематологии и иммуногене Изобретение относится к медицине, в частности - гематологии и иммуногенетике, может быть использовано в.диагностике и прогнозе течения хронических заболеваний печени,Цель изобретения - снижение травматичности, трудоемкости и повышение надежности прогнозирования за счет определения иммуногенетических маркеПоставленная цель достигается тем, что проводят злектрофорез сыворотки крови и определяют тип гаптоглобина, проводят НЫ-типирование и по носительству генетического маркера Н р 2-2 в сочетании с наличием антигена Н А В 8 судят о прогрессировании течения заболевания,В табл, 1 приведен сравнительный анализ существенных отличий .заявляемого обьекта и прототипа. 5 О 1800365 может быть использовано в диагностике и прогнозе течения хронических заболеваний печени. Целью изобретения является снижение травматичности, трудоемкости и повышение точности прогнозирования хронических поражений печени, Сущность: укаэанная цель достигается тем, что определяют НЫ - генетические маркеры и тип гаптоглобина. При установлении НМ - фенотипе антигена В 8 в сочетании с Нр 2-2 определяют прогрессирующее течение патологического процесса. Использование предлагаемого способа повышает точность прогнозирования хронических поражений печени, 3 табл,Как видно иэ табл, 1, общими являютсяпп, 2, 3, 4, Пп. 10 - 13 отражают положительный эффект, заключающийся в снижениитрудоемкости, а и. 1 - снижение травматичности,Способ осуществляют следующим образом,У больного берут кровь иэ венй в количестве 5 мл, из которых 4,5 мл - на гепарине,0,5 мл - в сухую пробирку, Из гепариниэированной крови центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографинавыделяют лимфоциты, отмывают их дваждыраствором Хенкса, доводят конечную концентрацию до 1 млн, клеток в 1 мл, В лимфацитотоксическом тесте устанавливаютфенотип по НА локусам А, В, С. 0,5 млкрови центрифугируют, отбирают 40 мкл сыворотки. Проводят злектрофорез в полиакриламидном геле и определяют типгаптоглобина, 1800365При определении в фенотипе НЮ анти- гена В 8 в сочетании с Нр 2-2 прогнозируют вероятность тяжелого течения хронического заболевания печени.В табл, 2 и 3 приведеныпримеры иммуногенетического обследования пациентов с хроническими заболеваниями печени. Иэ табл. 2 видно, что различным хроническим поражениям печени соответствуют различные фенотипы и типы гаптоглобина. Приведенные случаи характеризируются благоприятным течением хронических заболеваний печени, симптомы которых вторичны в клиническом статусе пациентов.В табл, 3 представлены случаи хронического поражения печени, при которых установлен фенотип НЕА В 8 в сочетании с Нр 2-2, В клинической картине представленных случаев преобладают симптомы поражения печени и, как было установлено при динамическом наблюдении, зти случаи характеризуются прогрессирующим течением. В клинике ВНЦРМ АМН СССР проведено иммуногенетическое обследование 162 пациентов с хроническими заболеваниями печени. Эти исследования позволили повысить точность прогнозирования.П р и м е р 1. Больной Б,К., 46 лет, номер истории болезни 431.87 поступил в терапевтическое отделение клиники с жалобами на боли в правом подреберье, общую слабость, повышенную раздражительность, утомляемость с диагнозом направления; хронический гепатит, При клинико-лабораторном обследовании диагноз подтвержден. Иммуногенетическое исследование выявило фенотип Н 1 А А 1,10 В 8,19 С 4. После проведения курса лечебных мероприятий больной выписан в удовлетворительном состоянии, Однако уже через 4 месяца этот же больной вновь поступает в терапевтическое отделение (история болезни 547.87) с жалобами на сильную слабость, ощущение пол ноты в правом подреберье, желтизну склер, одышку. При пальпации печень значительно увеличена, выступает из-под реберной дуги на 7 см. Диагноз в направлении: обострение хронического гепатита, Цирроз 7 При клинико-лабораторном обследовании больного с проведением в том числе и пункционной биопсии печени, установлен диагноз; цирроз печени, - как неблагоприятный исход хронического поражения печени - хрониче ского гепатита, который был впервые установлен за 3,5 года до развития цирроза, Фенотип НЫ А 110 В 8,19 С 4, Нр 2-2.П р и м е р 2, Больной В.С 36 лет.Поступил в терапевтическое отделение клиники с жалобами на общую слабость, чувство тяжести в правом подреберье. При осмотре больного обнаружена умеренно увеличенная (около 1,5 см ниже реберной дуги) печень, чувствительная при пальпа ции, по констистенции несколько болееплотная, чем в норме, По результатам клинико-лабораторного исследования (история болезни 496,87) установлен диагноз: хронический персистирующий гепатит, Из анам нестических данных следует, что больнойстрадает этим заболеванием в течение 8 лет, по поводу обострений находился трижды на стационарном лечении, При иммуногенетическом обследовании определен 25 фенотип Н 1 А А 3,9 В 8,15, С 2; Нр 2 - 1. Послепроведения курса лечения больной выписан в удовлетворительном состоянии и в течение последующих трех лет по поводу обост- рений хронического гепатита в лечебные 30 учреждения не обращался.П р и м е р 3, Больная К.С., 35 лет,История болезни 655.88. Поступила в терапевтическое отделение клиники с диагнозом. хронический персистирующий гепатит.35 После лечения выписана в удовлетворительном состоянии, Иммунофенотип НЫ А 1,2 В 5,7 С 4, Нр 1-1, При обследовании спустя 3 года жалоб на функцию печени не предъявляла.40 Формула изобретенияСпособ прогнозирования течения хронических заболеваний печени путем исследования венозной крови, о т л и ч а к щ и йс я тем, что, с целью снижения травматич ности, трудоемкости и повышения точностиспособа, определяют Н 1.А-генетические маркеры крови и тип гаптоглобина и при установлении в НЮ-фенотипа В 8 и типа гаптоглобина Нр 2 - 2 прогнозируют про 50 грессирование патологического процесса.18003 б 5 Таблица 1 П ототип ММ пп. ММ пп. То же 7.8 10 10 Заявляемый объект Производят забор 5 мл периферической венозной крови/4,5 мл на гепарине и 0,5 мл - в сухую пробиркуЦентрифугируют в градиенте плотности фиколл-верографина, выделяют лимфоциты Выделенные лимфоциты дважды отмывают раствором Хенкса, доводят конечную концентрацию до 10 млн. клеток в 1 мл Осуществляют Н 1 А-типирование общепринятым способом(лимфоцитотоксический тест)Центрифугируют 0,5 мл крови,отбирают 10 мкл сывороткиПроводят электрофорез в полиакриламидном геле с определением типа гаптоглобинаПри определении в фенотипеантигена Н А В 8 и гаптоглобина Нр 2 - 2 прогнозируют вероятность тяжелого теченияхронического заболевания печени Проводят многоступенча гуюбиопсию печени под общимнаркозомПроизводят забор 2-4 мл печеночной кровиПроизводят забор 2 - 4 мл веноэной крови То же, но отмывание производят фосфатным буфером В пробирки берут 50 мкл конечной взвеси, добавляют 10 мкл коньюгированных с флюоресцином моноклональных антител реагирующих со специфическими рецепторами натуральных киллеров ( К - клеток) Взвесь инкубируют 1 ч при 4 С Делают нативные мазки и исследуют их с помощью флюоресцентного микроскопа Определяют относительное содержание К-клеток в печеночной периферической крови, на основании чего устанавливают прогрессирующий или не- прогрессирующий патологический процессЗаказ 1161 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета, по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-изДательский комбинат "Патент", г. Ужгородул,Гагарина, 101 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 90/3322 90/3659 90/3676 90/3800 90/3972 90/4553 90/4559 90/4560 90/5117 90/5120 Хр, гепатит Хр. гепатохолит Хр. гепатохолит Хр. гепатит То же м Хр. гепатохолит То же Хр. гепатит Хр; персистирующий гепатит Хр. гепатит Хр, персистирующий гепатит Хр. персистирующий гепатит Хр, гепатохолит Х , гепатит