Способ дифференциальной диагностики острого и хронического активного гепатитов в

)5 6 01 М 33/5 ТЕНИ ВТ я диаг- едицидицине, в т быть ис- рознтеро- тделениях ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗ ОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО И ХРОНИЧЕСКОГО АКТИВНОГО ГЕПАТИТОВ В. Изобретение относится к мечастности к гепатологии, и можепользовано в инфекционных, гастлогических и гепатологических оклинических больниц,Известен способ дифференциальной диагностики острого вирусного гепатита ЮВП и хоонического активного гепатита ХАГ) по клиническим данным.По этому способу для ХАГ характерна большая длительность заболевания, отсутствие преджелтушного периода, плотная консистенция печени и "внепеченочные" знаки.Недостаток этого способа заключается в том, что клинические проявления ХАГ могут впервые развиваться при уже сформировавшемся патологическим процессе без предшествующего анамнеза, а преджелтушный период при ОВГ достаточно вариа(57) Использование: в инфекционных, гастроэнтерологических и гепатологических отделениях клинических больниц для дифференциальной диагностики. Цель; повышение точности. Сущность изобретения; в плазме крови пациента радиоиммунологическим методом определяют уровень лейкотриена В 4, При повышении его содержания относительно нормы в 3 раза диагностируют острый вирусный гепатит В, а при снижении относительно нормы в 2 раза - хронический активный гепатит В. Положительный эффект; повышается точность диагностики на 31 , что позволяет назначить своевременную адекватную терапию. предотвратить реинфекцию у больных и расширить область применения способа, 1 ф табл. белен по срокам (от одного дня до нескольких недель) и не имеет характерной клинической картины. Кроме того, консистенция печени, определяемая пальпаторно. - субьективное понятие, она может быть достаточно плотной и при ОВГ. Самые распространенные "внепеченочные" знаки - "сосудистые звездочки" встречаются при ХАГ в 75 случаев. Таким образом, этот способ не является достаточно надежным,Известен способ дифференциальной диагностики ОВГ и ХАГ, основанный на определении уровней сывороточных трансаминаз - аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартвтаминотрансферазы (АСТ). П ри увеличении содержания.АЛТ и АСТ в 10 и более раз относительно нормы диагностируют ОВГ, при их уменьшении - ХАГ, Недостатком этого способа является его низкая на 177275830 35 55 дежность, т.к. повышение уровня АСТ в 5 раз отмечается у 94,4 ф больных ОВГ и у 93 больных ХАГ, а АЛТ - у 97 больных ОВГ и 87,5 больных ХАГ,Кроме того, известный способ не пригоден для дифференциальной диагностики в ранние сроки, т,к, активность трансминаз достигает максимума на 2-3 неделе заболевания.Известен также способ дифференциальной диагностики ОВГ и ХАГ, которйй основан на определении в сыворотке крови уровня гамма - глубулинов турбодиметрическим методом. При увеличении их содержания выше нормы диагностируют ХАГ, а при их содержании, соответствующем норме - ОВГ.Недостатком данного способа является его небольшая точность, что особенно проявляется во второй половине заболевания ОВ Г, когда уровень гамма - глобулинов также может повышаться, Это объясняется тем, что подъем уровня гамма - глобулинов отражает активацию гуморального иммунитета, а не форму заболевания. Гуморальный иммунитет может активизироваться как при ОВГ, так и при ХАГ, т.к. в основе сравниваемых заболеваний лежит процесс воспаления (острый или хронический),Целью изобретения является повышение точности дифференциальной диагностики.Поставленная цель достигается тем, что в плазме крови радиоиммунологическим методом определяют уровень лейкотриена (ЛТ) 84. При повышении его содержания относительно нормы диагностируют ОВГ, а при снижении относительно нормы - ХРГ.Использование в заявляемом способе в качестве биохимического критерия ЛТ 84 позволяет повысить точность дифференциальной диагностики по сравнению с прототипом, т.к,.выбранный критерий обладает высокой специфичностью. Это объясняется тем, что ЛТ 84 является медиатором воспа-. ления, т.е. того процесса, который лежит в основе ОВГ и ХАГ. Он индуцирует адгезионные свойства полиморфно-ядерных лейкоцитов, усиливает их способность к агрегации, подвижность, способствует высвобождению лизоцина из лейкоцитов, обеспечивая таким образом адекватное развитие воспалительного процесса, направленного на выздоровление.Именно поэтому при ОВГ возрастает потребность в ЛТ 84, и организм увеличивает его синтез, что сопровождается повышением его содержания в плазме крови,Переход процесса в хроническую стадию сопровождается рассогласованием механизмов адекватного ответа, снижением порога чувствительности, нарушениями в процессе синтеза биологически активных веществ, Кроме того, при ХАГ происходит нарушение в системе мононуклеарных фагоцитов, клетки которой в печени являются основными продуцентами ЛТ ВЧ, вследствие чего наблюдается снижение синтеза ЛТ 84 при хроническом воспалительном процессе в ткани печени, и соответственно при ХАГ выявлено снижение уровня ЛТ 84 в плазме крови,Способ осуществляют следующим образом.1. Забирают у больного утром натощак 3,0 мл венозной крови в пластиковую пробирку, содержащую 0,2 мл 2 О раствора ЭДТА, с помощью пластикового шприца. Центрифугируют кровь при 4000 об/мин в течение 15 мин для деления плазмы, которую затем отбирают из верхнего слоя,Определяют концентрацию ЛТ 84 в плазме крови радиоиммунологическим методом с помощью наборов фирмы "АеезЬагп", Наборы позволяют с высокой точностью определить содержание ЛТ 84 по конкурентному связыванию (ЗН) ЛТ и эндогенного ЛТ 84 в плазме крови с антителами к ЛТ 84. Разделение связанного с антителами и свободного ЛТ 84 достигается осаждением свободного ЛТ В 4 суспензией древесного угля (декстрана), После центрифугирования измеряют активность супернатанта.Для определения содержания ЛТ В 4 в диапазоне от 1,6 до 200 гlмл строится стандартная кривая из 6 точек, Для этого в 6 пробирок вместо проб добавляют стандартный раствор, При построении стандартной кривой для каждой известной концентрации немеченных ЛТ В 4 в пробе по величине радиоактивной метке в супернатанте рассчитывают процент связывания антисывороткой меченного (3 Н) ЛТ 84. На оси ординат откладывают величину процента связывания меченого, а на оси абсцисс в логарифмическом масштабе - количество немеченного исследуемого вещества, соответствующего определенному проценту связывания,При определении содержания ЛТ В 4 используют антисыворотку, стандарты, буфер, входящие в набор реактивов для радиоммунологического определения ЛТ В 4,Диагностируют ОВГ при увеличении уровня ЛТ В 4 в плазме крови относительно нормы, а при его снижении относительно нормы - ХАГ, Для установления нормы (М) содержания ЛТ В 4 в плазме крови была исследована группа здоровых лиц (доноров) в количестве 20 человек.В таблице показаны результатыопределеиия уровня ЛТ 84 в плазме крови у различных групп наблюдений,Иэ таблицы видно, что при ОВГ уровеньЛТ 84 повышается (в среднем в 3 раза), а при ХАГ уровень ЛТ 84 снижается в (среднем в 2 раза),Изменения уровней ЛТ 84 при-ОВГ иХАГ носят диаметрально противоположныйхарактер различия сравниваемых показателей (р 001).П р и м е р 1, Больной И 27 лет, история болезни Ь 368 поступил во 2-е отделение 2-й инфекционной больницы г. Харькова27,09.89, с жалобами на тошноту после приема пищи. слабость, чувство тяжести в правом подреберье, желтушность склер, потемнение мочи,Анамнез заболевания; считает себябольным в течение 2 месяцев, когда появилась слабость, Зэ неделю до обращения кврачу появилось чувство тяжести в правом подреберье, тошнота, окружающие обратили внимание на желтушиость склер. Больной был направлен районной поликлиникой в инфекционною больницу с подозрениемиа острый вирусный гепатит.Анамнез жизни: с 1984 по 1986 годы являлся донором, в июле 1989 г. прооперирован по поводу язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Обьективиые данные; состояние удовлетворительное, Склеры ивидимые слизистые иктеричны. Субиктеричиость кожных покровов. В легких визикуляриое дыхание. АД 110/70 мм рт,ст. Тоны сердца громкие, ритмичные, ЧСС 60 в минуту. Язык чистый, влажный. Живот мягкий, участвует в акте дыхания, умеренно болезненный при пальпации в правом подреберье, Печень иэ 2-3 см ниже края реберной дуги, крэй ее ровный, плотио-эластичный, поверхность гладкая. Селезенка не увеличена.Лабораторные данные: анализ крови: эритроциты 4,4 10 г/л, Нв 137 г/л ц.п.о, 912тромбоциты 141 10 г/л, лейкоциты 4,0 10 г/л, эоэии 2, пэл. 2, сегменты 64, лимфоциты 23, моиоциты 9, СОЭ 12 мм/ч, В анализе мочи обнаружены желчные пигменты, В сыворотке крови методом РОПГА обнаружен НВэ Ац, АСТ 3,4 ммоль ч/л, АЛТ 3,7 ммоль/л, гамма - ГТП 180 Е/л, ЩФ 5,1 Е/л, билирубии общий 41,5 мкмоль/л, билирубии прямой 18,4 мкмоль/л, билирубии непрямой 23,1 мкмоль/л. Протромбииовый индекс 65%. Общий белок 62,0 г/л, альбумины 56,5%, глобулины; а 1 - 3,9%, а 2 - 3,9%; )В - 10,5%: 7 - 25,5%, А/Г 1,32.20 30 35 40 45 50 55 Инструментальные данные; Эхосоноскопия: печень умеренно увеличена в размерах, ткань ее однородной структуры, повышенной эхогенной плотности, Отмеча ется незначительное расширение желчныхходов. Селезенка не увеличена.Сканирование печени: печень умеренноувеличена в размерах. распределение РФП диффузно- неравномерное, определяется 0 активация селезенки.Проведенное исследование вызвало определенные сомнения в диагнозе острого вирусного гепатита В, в связи с чем у больного бйл дополнительно определен уровень 5 лейкотриена 84 в плазме крови, которыйсоставил 17,4 пг/мл. Кроме того, была произведена пуикционная биопсия печени, Морфологическая картина биоптата ткани печени соответствовала характеру биоптата при хроническом активном гепатите.Для дальнейшего лечения больной былпереведен в гастроэнтерологическое отделение Харьковского НИИ терапии.П р и м е р 2. Больной А,. 35 лет, история 5 болезни М 579, поступил во 2-е отделение22-й инфекционной больницы г, Харькова 30,10.89, с жалобами иа боли в правом подреберье, тошноту, желтушность кожных покровов, темную мочу.Анамнез заболевания; считает себябольным около двух недель, когда появилась легкая тошнота, субиктеричность склер. К врачу не обращался, В день госпитализации состояние значительно ухудшилось; желтушность кожных покровов усилилась, моча темная, боли в правом подреберье. При обращении е поликлинику он был направлен е 22-ю инфекционную больницу г, Харькова с диагнозом: острый вирусный гепатит.Анамнез жизни; из перенесенных заболеваний отмечает пневмонию в 1987 г., и в мае 1989 г по поводу которых проходил стационарное лечение.Объективные данные: состояние удовлетворительное. Кожные покровы и видимые слизистые желтушной окраски.Виепечеиочиых знаков иет. Со стороны органов дыхания и сердечно-сосудистой системы патологии ие выявлено, Живот мягкий, болезненный при пальпэции в правом подреберье. Нижний крэй печени на 3 - 4 см ниже края ребериой дуги, плотно-эластичный, ровный, болезненный при пальпации, Гэльпируется нижний полюс селезенки,Лабораторные данные: анализ крови;эритроциты 4,5 10 г/л, Нв 141 г/л: ц,пп.0,9, тромбоциты 225 10 г/л, лейкоциты96,8 10 г/л эозии 1, палочки 1, сегменты944, лимфоциты 48, моиоциты б, СОЭ 181772758 8 Составитель В. БрусиловскаяТехред М.Моргентал Корректор Н еда ктор каз 3844 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 роизводственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 10 мм/ч,в моче обнаружены желчные пигменты. 8 сыворотке крови методом РОПГА выявлен НВзАо, АСТ 4,1 ммоль/ч.л., АЛТ 4,5 ммоль/ч.л., гамма - ГТП 21 ОЕ/л, ЩФ 4,7 Е/л. Билирубин общий 56,8 мкмоль/л, пря мой - 23,5 мкмоль/л, непрямой - 33,3 мкмоль/л, Протромбиновый индекс 72. Общий белок - 72 г/л, альбумины 53,6, глобулины. а 1-3,2, а 2-4,2, Р,4, у,6, А/Г 1-17; 1 ОИнструментальные данные: Эхосоноскопия: печень умеренно увеличена в размерах, ткань печени однородной структуры, со стороны желчевыводйцих путей патоло. гии не выявлено. Селезенка умеренно уве личена. Сканирование печени; печень умеренно увеличена в размерах, накопление РФП диффузно - неравномерное, отмечается активация ретикуло-эндотелиальной системы, повышенное накопление РФП в 20 селезенке.В результате проведенного исследования возникла необходимость проведения дифференциального диагноза между острым и хроническим активным гепатитами В, 25 Поэтому у больного в плазме крови определили уровень ЛТ 84, который составил 119,4 пг/мл. Кроме того, была проведена пункционная биопсия печени, Морфологические изменения в ткани печени соответствовали изменениям, характерным для острого вирусного гепатита, Установленный диагноз: острый вирусный гепатит. Больной продолжил курс лечения в инфекционном стационаре,Использование предложенного способа диагностики по сравнению с прототипом позволяет повысить точность на 31 и специфичность способа, дает возможность назначить своевременную адекватную терапию, предотвратить реинфекцию у больных ХАГ и расширить область применения способа.Формула изобретения Способ дифференциальной диагностики острого и хронического активного гепатита 8 путем исследования крови, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения точности, в плазме крови радиоиммунологически определяют уровень лейкотриена 84 и при повышении его уровня относительно нормы в 3 раза диагностируют острый вирусный гепатит 8, а при его снижении в 2 раза - хронический активный гепатит 8.