Способ оценки степени тяжести вирусного гепатита

.) .Ж 71 А 1 51)5 б О 1 1 ч 33/ т Ве и 1 ы Й кОмитетЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМСССР ГОСУДА ПО ИЗО ПРИ ГКН ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ АВТОРСКОМУ С ТЕЛЬСТВУ(56) Авторское сМ 1050670. кл. А л, Мг 32й государственный В.М.Цыркунов и Г идетельство ССС 61 В 10/00, 1983 дициненых боле ьносится к ме ностике инфе быть использов п 1 я степени тя ицине, в ионных но в клижести виИэобре 1 енио о частности к дидг болезней, и может нике для оцределе русного Гет 1 атита,Цель изобретепри одновременности.Способ осущесзом,особ точно ия - ускоренм повышении ляютсл имо с вы(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ ТЯЖЕВ ИРУС НОГО ГЕ ПА 1 И ТА(57) Изобретение относится к меименно к диагностике инфекцион Берут 5 мл венозной кр иэ нее эритроциты центр при 300 9 в течение 5 мин, и стее амтикоэгулянтэ испол (200 ед/мл) Плазму и верхн цитов, содержащий лейко Полученные зритроцить от ля, четырехкратный обьем физиологического раствора ки центрифугировэнием при 15 мин, Нэддсэдочную жид верхним слоем зритр ци 1 ов ови и выделяют ифугированием ри этом в качеьзуют гепарин ий слой эритроциты, удаляют. мывэют, добавохлажденного и осаждая клет 9 в течениекость вместе с удаляют. ней, и может быть использовано в клинике для определения степени тяжести вирусного гепатита. Цель изобретения - ускорение способа при одновременном повышении его точности. Определяют антиокислительную активность мембраны эритроцитов в модели желеэоиндуцируемого окисления олеиновой кислоты по изменению быстрой вспышки хемилюминесценции. При величине антиокислительной активности более 27 степень тяжести вирусного гепатита оценивают как легкую, от 17 до 26; - кэк среднюю, менее 16% - кэк тяжелую, Ст особ позволяет повысить точность оценки на 14- 24;е и ускорить способ в 1,5-2 раза. Мембраны эритроцюов выдеют путем гипоосмптического гемолизэ, используя а качестве гемзлизирующей седы 5 мМ йэН 2 РО 4, содержащей 1 мМ ЭДТА, 1 мл осажденных эритроц,1 ов быстро и энергично перемешивают с 20 мл охлажденной до 4 С гемолиэирующей среды и выдерживают при этой температуре, постоянно помешивая, в течение 5 мин. Гемолизэт центрифугируют при 20 0009 в течение 10 мин, Надосэдочную жидкос 1 ь удаляют, а осадок мембран эритроцитов отмывают 20 объемами 10 мМ трис НС 1-буфера (рН 7,4), осаждая мембраны центрифугированием при 20000 9 в те ение 10 мин. Осадок отмытых мембран зритцоци 1 ов пепеносят в мерные центрифужные пробирки и доводят трис-НС-буфероч (10 мм, рН 7,4) объем до 1 мл. Г 1 олученную суспензию мембран эритроцитов цбраба 1.ывгют Ультразвуком е течение 20 с при частоте 44 кГцходной электрической мощностью е 16739715 10 минесценции В качестве контроля берут 2,015 нератора в рабочем диапазоне частоты на активной нагрузке 360 Вт. Обработка ультразвуком повышает доступность мембран эритроцитов для действия реагентов при определении антиокислительной активности АОА).0,1 мл озвученной суспензии мембран зритроцитов добавляют к 1,9 мл 0,14 ф,-ного спиртового раствора окисленной олеиновой кислоты и после добавления 1.0 мл раствора сульфата двухвалентного железа (конечная концентрация в кювете 5 10 М) на хемилюминометре ХЛМ 1 Ц - 01 регистрируют высоту быстрой вспышки хемилюмл 0,14-ного спиртового раствора окисленной олеиновой кислоты. Отношение разницы высот быстрой вспышки в контроле и опыте к высоте быстрой вспышки в контроле(умноженное на 100 ) и является показателем АОА мембран зритроцитов.Изучение АОА мембран зритроцитов у 18 практически здоровых доноров показало, что она равна 54,42 +2,07%.У больных вирусным гепатитом обнаружено снижение АОА мембран эритроцитов, причем величина ее снижения зависит от степени тяжести вирусного гепатита. При АОА более 27 сстепень тяжести гепатита оценивают как легкую, от 17 до 266 - как среднюю, менее 16% - как тяжелую,П р и м е р 1. Больная Г 1., поступила в инфекционную больницу на 8-и день болезни с жалобами на боли в эпигастральной области, рвоту, снижение аппетита, темный цвет мочи, желтушную окраску склер,При поступлении общее состояние удовлетворительное, Кожные покровы и склеры глаз с желтушным оттенком, В легких и сердце - без патологических изменений. Пульс 76 уд/мин, АД 110/60 мм рт,ст. Язык влажный, чистый. Живот мягкий, безболезненный при пальпации. Печень выступает иэ-под правой реберной дуги на 1 см. Моча темная,Определяют в мембранах эритроцитов АОА, У больной она равна 33,3(определе" ние заняло 53 мин), Данный уровень АОА позволяет диагностировать вирусный гепатит легкой степени тяжести. Кроме этого, концентрация общего билирубина крови равна 66,8 мкМ/л (норма 20,5), тимоловая проба 7 ед, (норма 4), АлАТ 6,7 мМ/л ч (норма 0,68).В соответствии с установленной степенью тяжести вирусного гепатита больной проводят лечение,П р и м е р 2. Больная Ж., поступила на 3-й день заболевания с жалобами нэ голо 20 25 30 35 40 45 50 55 вную боль, недомогание, слабость, снижение апптита, темную мочу, желтушность кожи и склер,При поступлении состояние средней тяжести, Кожные покровы и склеры глаз желтушны. В легких везикулярное дыхание. Тоны сердца чистые, ритмичные, Г 1 ульс 80 уд,/мин, АД 100/70 мм рт,ст. Язык обложен белым налетом. Живот при пальпации мягкий, болезненный в эпигастральной области, Печень выступает иэ-под края правой реберной дуги на 2 см. Кал ахоличный, моча темная.АОА мембран эритроцитов больной равна 21,0%, что позволяет диагностировать среднюю степень тяжести вирусного гепатита (определение заняло 47 мин). Уровень общего билирубина крови равен 100,0 мкМ/л (норма 20,5), тимоловая проба 18 ед, (норма 4), АлАТ 7,0 мМ/л ч (норма 0,68),В соответствии с установленной степенью тяжести вирусного гепатита больной назначают адекватное лечение,П р и м е р 3. Больной А., поступил на 5-й день болезни с жалобами на желтушность кожи, слизистых, темный цвет мочи.При поступлении общее состояние средней тяжести, Кожные покровы и склеры глаз интенсивно желтые. В легких везикулярное дыхание. Сердечные тоны ясные, чистые. Пульс 68 уд. /мин, АД 120/70 мм рт,ст, Язык обложен белым налетом. Живот мягки, безболезненный. Печень выступает из-под края правой реберной дуги на 4 см, Моча темная.Определяют АОА мембран эритроцитов, которая равна 16,6%, что указывает на тяжелую степень тяжести вирусного гепатита у больного (определение АОА заняло 51 мин), Концентрация общего билирубина крови равна 196,6 мкМ/л (норма 20,5), тимоловая проба 17 ед, (норма 4), АлАТ б,б мМ/л ч(норма 0,68),С учетом выставленного диагноза больному проводят интенсивную дезинтоксикационную терапию,П р и м е р 4. Больная Впоступилэ в инфекционную больницу с жалобами нэ слабость, тошноту, желтую окраску кожи и склер глаз.При поступлении общее состояние удовлетворигельное, Кожные покровы и видимые слизистые умеренно желтушны, В легких везикулярное дыхание. Пульс 68 уд./мин АД 10 Г/70 мм рт.ст. Тоны сердца приглушены, Живот мягкий, болезненный в эпигастрии, Печень высгупает из-под края правой реберной дуги нэ 1 см. Моча темная.Определяют в мембранах эритоциты АОА. У больной она равна 27,1 (определение заняло 48 мин). Данный уровень АОА позволяет диагностировать вирусный гепатит легкой степени тяжести. Концентрация общего билирубина крови равна 51,3 мкМ/л (норма 20,5), тимоловая проба 8 ед. (норма 4), АлАТ 5,6 мМ/л ч (норма 0,68).В соответствии с установленной степенью тяжести вирусного гепатита больной проводят лечение,П р и м е р 5, Больная Х., поступила в стационар на 5-й день болезни с жалобами на снижение аппетита и иктеричность склер.При поступлении состояние удовлетворительное, Кожные покровы обычной окраски, склеры субиктеричны. В легких и сердце - без патологических изменений. Пульс 86 уд /мин, ад 100/60 мм рт.ст. Живот мягкий, безболезненный. Печень пропальпировать не удалось, Моча со слов больной темного цвета.Определяют АОА мембран эритроцитов у больной, которая равна 37,0, что указывает на легкую степень тяжести вирусного гепатита (определение АОА заняло 51 мин). Концентрация общего билирубина крови равна 22,2 мкМ/л (норма 20,5), тимоловая проба 7 ед, (норма 4), АлАТ 6,44 мкМ/л ч (норма 0,68).Больной проводят адекватную терапию.Примеры, доказывающие возможность осуществления изобретения в граничных значениях АОА у больных вирусным гепатитом средней степени тяжести. П р и м е р 6. Больная Р., поступила винфекционную больницу с жалобами наснижение аппетита, желтушную окраску кожи и склер глаз, слабость,Общее состояние средней тяжести,Кожа и склеры глаз желтушны. В легких иссрдце - без патологии, Живот мягкий. безболезненный, Печень выступает из-подправой реберной дуги на 2 см. Моча тем ная, кал светлый.АОА мембран эритроцитов даннойбольной равна 17,900 , определение заняло50 мин. Выставляется диагноз: вирусный гепатит средней степени тяжести, Общий билирубин крови равен 115,4 мкМ/л, тимоловаяпроба 2,5 едАлАТ 6,7, мМ/л ч,Больной назначено соответствующеелечение,П р и м е р 7, Больной Ж., поступил встационар с жалобами на тошноту, рвоту,снижение аппетита, потемнение мочи,5 10 15 20 25 ЭО 35 40 45 50 55 При поступлении общее состояние средней тяжести. Кожа и видимые слизистые желтушны. Живот мягкий, безболезненный, Печень выступает иэ-под правой реберной дуги на 2 см, Моча темная.Определяют АОА мембран эритроцитов, которая у больного равна 26,0 (определение заняло 47 мин), что позволяет выставить диагноз вирусного гепатита средней степени тяжести, Концентрация общего билирубина крови равна 96,6 мкМ/л, тимоловая проба 12 ед., АлЛТ 6,8 мМ/л ч,В соответствии с выставленным диагнозом проводят необходимое лечение.Примеры, доказывающие возможность осуществления изобрегения в граничных значениях АОА у больных вирусным гепатитом тяжелой степени тяжести,П р и м е р 8. Больной М поступил в стационар с жалобами на отсутствие аппетита, тошноту, ноющие боли в правом подреберье, темную мочу, желтушность кожи и склер.Общее состояние тяжелое. Кожные покровы и видимые слизистые интенсивно желтушны, В легких везикулярное дыхание. Пульс 72 уд,/мин, АД 115/60 мм рт,ст, Сердечные тоны приглушены. Живот мягкий, болезненный в эпигастрии, печень выступает из-под правой реберной дуги на 5 см. Моча темная,АОА мембран эритроцитоо у больного составила 9.5;4 (определение эанялс 49 мин), что указывает на вирусный гепатит тяжелой степени тяжести, Концентра,ия оощего билирубина крови равна 342,0 мкМ/л, имоловая проба 5,0 ед, АлАТ 7 26 мМ/л чБольному наэначатся соответствую. щая терапия,Г р и м е р 9, Больной Гпоступил с жалобами на тошноту, рвоту, общую слабость, головную боль. желтушность кожи и склер глаз, снижение аппетита.Г 1 ри поступлении общее состояние тяжелое. Кожа и склеры глаз желтушнь:. В легких и сердце - без патологических изменений. Живот мягкий, безболезненный при пальпации. Печень выступает иэ-под правого края реберной дуги на 4 см, Моча темная,Определяют АОА мембран эритроцитов у больного, которая равна 16,6, (определение заняло 50 мин), что позволило выставить диагноз: вирусный гепатит тяжелой степени тяжести. Концентрация общего билирубина крови равна 188,1 мкМ/л, тимоловая проба 27 ед АлАТ 6,72 мМ/л ч,В соответствии с выставленным диагнозом проводят адекватную терапию.1673971 25 Составитель Н. ГуляеваТехред М. Моргентал Корректор О. Ципле Редактор А. Огар Заказ 2915 Тираж 389 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5Производств,нно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул Гагарина. 101 Предлагаемым способом произведено определение степени тяжести вирусного гепатита у 52 больных. Контролем служили показатели у 18 практически здоровых лиц. Полученные результаты сравнивали с ре зультатами при использовании известного способа, Результаты представлены в таблице.Повышение точности предлагаемого способа обусловлено тем, что соотношение 10 показателей между легкой и средней степени тяжести вирусного гепатита в предлагаемом способе на 14,4 превышает аналогичное соотношение в известном способе, а между средней и тяжелой сте пенями заболевания - на 23,67 О,Достигается также сокращение времени определения степени тяжести вирусного гепатита: при использовании известного 20 требуется не менее 1,5-2 ч, в то время как по предлагаемому способу определяют степень тяжести вирусного гепатита в пределах 40 - 50 мин, т.е. в 1,5 - 2 раза скорее. Таким образом, преимущества предлагаемого способа заключаются в том, что существенно ускоряется диагностика и повышается ее точность.Благодаря быстрому и точному установлению степени тяжести вирусного гепатита по АОА мембран эритроцитов больным своевременно назначают необходимое лечение,Формула изобретения Способ оценки степени тяжести вирусного гепатита, включающий исследование крови больных гепатитом, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения способа при одновременном повышении его точности, получают мембраны эритроцитов, определяют их антиокислительную активность в модели железоиндуцируемого окисления олеиновой кислоты по изменению быстрой вспышки хемилюминесценции и при величине антиокислительной активности более 27 степень тяжести вирусного гепатита оценивают как легкую, от 17 до 26 - как среднюю, менее 16 - как тяжелую.