Способ получения кормового белка

(51)5 С 12 ТЕНИЯ т ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТГЮ ИЭОбРНЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ИСАНИЕ ИЗО Н А ВТОРСМОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Касим-Зале И.Э.Культивированиевысших грибов нд отхолдх пинолелия.Тезисы Ч 11 сьеэлл Всег(юэного микробиологического об)(ествд, - Ллмд-Лтд,1985, т.4, с.55.Ноцгв Й.А., Мавяцго Л.Г., ЕгСо 1 а К 1. М 1 сгоЬа 1 81 ощдвя 1 п ЬдЬап(1 Ге(1 ЬасЬ сц)ангел Лрр 1. 111 сгоЬ 1 о 1 ап(1 В)оесЬпо 1. 1985, .23,) 1, р.33-37,(54) спосо 11 нолучкния кормоВоГо ГРКА Изобретение относится к биотехнологии и касается получения кормовой белковой биомассы, которая может быть использована в животноволг.тве.Пель изобретения - расширение технологических возможностей.Способ заключается в следуюшем, увлажненное сырье, в качестве которого используют яблоные выжимки, стерилизуют, вносят в него мицелий базидиальных грибов культивируют их и высушивают полученную биомассу. Перед внесением мицелия делают проб(57) Иэобр тонии отнч ит я к биотехнологии и кдгдетгя полуц иця кормовой белковй биомдс сь, котрдя можетбыть испол) эо)дд в животноводстве.11 Рлью и добр тония я ни Я ст( я рд(ч 111 нние техночогц ( кцх воэ 1 ожногт. спогобл. Спо( об эдклчд(т я ) вырдщвднии штдммц (д илдьь.( ( рнбонСог 1 о 1 ця Ь) гд 1 к ИБКили Кипд -11 а сго 811 И 1 К, цли Р;ццк (1 г 1 пик ИНК - 131, нлц 1)д(дд 1 ) л 1 цггс 1 пдИБКтвгрлодэньпч м толом нд яблочных щьж(мкдх, ( одгрждцие орг;цических кцгл т н которых цг преньвгдет6 г/кг гигжцмок, Кигнотоциижегце осушествият химиицгкги (о(двл( ниемелл) ли бгцдогичегким ьрдв(паннештдммд лрожж( и ЯгЬ) хоядЬдгопу( евд(:) )о 1 тгд) ця 4 - 540 и течение 2 супри 24 С) путем. После 10 гут куллтивирондния одного иэ предложенныхштдммон бдэициомицетов конечньв продукт содержит Ло 127 бглкл и 4,5 Х лилилов. 3 тдбл,ный его засев нд образцы сырья, в которых проведено кислотопонижение лоразличных концентраций органическихкислот, опререляют конце)г.рацию, прикоторой обеспечивается активное развитие м)(целия грибов, и проводят кислотопонижение сырья Ло этой концентрации. Оптимальное содержание органических кисгот в субстрате - не выше 6 г/кг. Нд предварительно полготовленном таким способом сырье выращивают штаммы грибов-базидиомицетовСо 1 о 1 цв Ь 1 гвцсцв ИБКили Гцпа 11 агго 8 дд ИКБ, или Рапця гдягдпцяИКБ, илиРаеда 1 да пцегсдпа ИКБ.Связьмежду воэможностью культивирования штаммон баэидиальных грибов(способностью их развития) и концентрацией органических кислот в сырьеустановлена впервые. Предельная концентрация органических кислот, до которой экономически наиболее эффективно применение способа, равна 6 г/кг.Применение кислотопонижения химическим или биологическим путем известно, например кислотопонижение ниноматериалов для повышения органолептических свойств вина.Кислотопонижение н предлагаемомспособе не может рассматриваться какустановление оптимального рН среды.При значительном изменении концентрации органицеских кислот в яблочныхвыжимках величина рН (табл.1), меняется незначительно.Такое изменение величины рН не может оказать существенного влияния 25 на рост штаммов грибов, о чем свидетельстнуют эксперименты по определению оптимальных для развития грибов-базидиомицетов значений рН яблочных ныжимок (табл.2). В этих опытах рН 2-10 получают введением в стерильный субстрат едкого натра и соляной кислоты и контролируют потек" цпометрически, " После проведения химического кислотопонижения до опти" мального уровня органических кислоткультивируют грибы-базидиомицеты,а в готовом кормовом продукте определяют содержание белка.Иэ табл.2 следует, что оптимальным,цля роста грибов-базидиомицетов является интервал рН 4-8. Исходное значение величины рН яблочной выжимки равно 5 и, следовательно, входит в этот интервал, поэтому его искусственное изменение с помощью щелочей или кислот нецелесообразноСпособ осуществляют следующим об разом.Высококислотные отходы соковой,50 безалкогольной или консервной продукции, которые в производственных условиях хранят в крафт-мешках, увлажняют водой с гидромодулем 1,0-1,5 и стерилизуют (температура 130 , время 30 мин).После этого мицелий гриба-базидиомицета высевают на чашки Петри, заполненные агаризованной выжимкой с различной концентрацией органических кислот, и через 1 сут визуально определяют образец с концентрацией кислот, при которой наблюдают активное развитие мицелия. Затем проводят химическое или биологическое кислотопонижение всего сырья до этой концентрации. 11 осевной материал в количестве 37 смешивают с сырьем, размещают в камерах-кассетах вместимостью до 1 мУ из расчета 0,5 т на одну камеру и осуществляют твердофаэное культивирова ние,в течение 7-10 сут. Полученную биомассу высушивают при 100-140 фС до постоянной массы и расфасовывают по 30-50 кг.Наиболее эффективно использование в качестве источника кормового белка штаммов высших базидиальных грибов: Согдо 1 ця Ьдгяцтця ИБК, Рцпа 1 да гго 8 дд ИБК, апця Сд 8 гдпця ИБК, Раейа 1 да,пцегсдпда ИБК. Процесс биоконверсии сырья путем культивирования на нем грибов наиболее эффективно проходит при содержании органических кислот не более6 г/кг.П р и м е р 1. Сырьем служат сухие яблочные выжимки с концентрацией органических кислот 14 г/кг, Выжимки увлажняют при гидромодуле 1,0 ро влажности 507. Затем проводят химическое кислотопонижение ныжимок до 6,0 г/кг путем внесения мела из расчета 30 г на 1 кг выжимок и стерилиэуют н автоклаве (1 атм, 130 С,-о 30 мин). В подготовленный таким образом субстрат вносят посевной материал мицелия гриба Согдо 1 ця ЬдгяцСцяИБК.Посевной материал готовят путем пересена мицелия иэ пробирки, в которой его хранят н коллекции, на чашу Петри с агаризованным пивным суслом и последующего пересева на выжимки, по" мещенные в стеклянную банку, иэ расчета 1/4 чашки Петри на 50 г выжимок. В банке рост мицелия продолжается в течение 7 сут до полного зарастания, которое устанавливают визуально.Приготовленный посевной материал вносят в выжимки в соотношении 1:30 (по объему) и я течейие 10 сут проводят тнердод 1 аэное культивирование при 24 С, Полученную биомассу высуОшивают. Готовый продукт содержитТ а б л и ц а 1 Добавки, введен-Титруемаяные в яблочныерНкилотностьвьжимки г/кг 14,0 7,0 18,1 38,8 14,0 7,8 5 16223 10,5 Х белка и 4,07 липидов. Лминокислотный состав белка приведен в табл.3. П р и м е р 2. Штамм и условиякультивирования как н примере 1,но кислотопонижение проводят до содержания органических кислот 4,5 г/кгпутем добавления мела иэ расчета37,3 г/кг выжимок. Полученная биомасса содержит 10,57 белка и 4,57лилидов,П р и м е р 3. Штамм и условиякультивирования как в примере 1, нокислотопонижение проводят до содержания органических кислот 7,0 г/кгпутем добавления мела иэ расчета20 г/кг вьжимок. Полученная биомассасодержит 77, белка и 3,57, липидов.П р и м е р 4. Штамм гриба и условия культирования как в примере 1,но кислотопонижение проводят биологичЕским способом при помощи штамма дрожжей ясЬдховассЬагопусев асЫодеуогаГцв ВКПИ 4-450 следующим образом. С плотной питательной средыдрожжи пересевают в пробирку со стерильным яблочным суслом и после бурного эабраживания переносят в колбус 0,5 л стерильного сусла. Выращиванне осуществляют в течение 2 сутпри 27 С без аэрации до достижениябурного брожения (в 1 мл содержится 100-150 млн. клеток, из них 453делящихся).Приготовленную суспенэию дрожжейвносят в яблочные вьпкимки иэ расчета 2 Х. После 2 сут выдержинания втермостате при 24 С происходит снижение концентрации органических кис- щ 0лот в выжимках до 6 г/кг, После тверШ5,0 Мел (20 г/кг) 5,00,27, (ЯЯ) РО(, 5,0 27 (ИН)х РО 5,8 О, 27, мочевипы 4,6 Дрожжи-шиэосахаромицеты в количестве 27 5,0 88 6доАазного культивирования штамма Сог 1 о 1 цв Ьгвцгцв ИБКна полученном субстрате конечньп продукт содержит 127 белка и 47 липидов.П р и м е р 5. Условия культивирования как,в примере 1, но выращивают штамм Рцпа 11 а Сгор ИБК. Конечньп продукт содержит 10,57 белка и 47, липидов.П р и м е р 6, Условия культинирования как в примере 1, но выращивают штамм Рапцв гд 8 г 1 пцв ИБК. Конечный продукт содержит 10,57 белка и 47. липидов.П р и м е р 7. Условия культивирования как в примере 1, но выращивают штамм Пае 1 а 1 а 1 цегс 1 па ИБК, Конечный продукт содержит 121 белка и 4,57 липидов. формула изобретения Способ получения кормового белка, предусматриваюий выращивание штаммов грибов - источников кормового белка на питательной среде, содержащей в качестве основного субстрата яблочные выжимки, до максимального накопления целевого продукта, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью расширения технологических возможностей способа, в качестне источника кормового белка используют штамм гриба Сог 1 о 1 цв Ьдгвцсцв ИБК, или Рцпа 1 а гго 811 ИБК, или Рапцв 18 г 1 пцв ИБК, или Пае 1 а 11 а 1 цегсдпа ИБК, а процесс осуществляют методом твердо 1 аэно Аерметации при содержании органических кислот в субстрате, не презьшающем 6 г/кг.1622388 Т а б л и ц н 2 Содержание белка,У, при значении рН До кислотопониаения После кислотопонимения 5 2 3 4 5 6 7 8 9 10 4,5 4,5 4,8 7,2 10,5 10,5 10,3 6,5 4,5 4,5 Таблица 3 Содержание вбелке, Х Аминокислота Составитель Л.Минеева Техред Л.Олийнык Корректор С,йекмар Редактор Н. Яцола Заказ 88 Тирах ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открмтиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Рауаская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 АспарагиноваяТреонинСерииГлвтаминоваяПролинГлицинАланииВалинИетионинИзолейцинЛейцинТирозинфенилаланинГистидинЛизинАргинин 1,80 0,65 0,95 2,85 О,25 1,15 1,05 1,15 0 0,10 0,80 0 0,15 0,05 0 0,15