Способ идентификации гибридного потомства растений

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК А 01 Н МИТЕТ СССРЙ И ОТНРЫТИЙ СУД АРСТВЕННЫ О ДЕЛАМ ИЗОБ ОБРЕТЕНИЕЛЬСТВУ(71) Отдел микробиологии АН МССР(54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИРИДНОГО ПОТОМСТВА РАСТЕНИ(57) Изобретение относится к селекцитений. Цель, изобретения - упропроцесса идентификации и возможустановления типа реакции гибриднытений. Семена пшеницы предварит тейн,ИБЙ и расщение ность х рас- ельно ОПИСАНИЕК АВТОРСКОМУ СВИ,801287796 подвергают замачиванию в воде. Семена переносят на раствор атразина партиями последовательно,начиная с начальных этапов прорастания, оставив последнюю пар, тиюв качестве контроля, т.е. опытные варианты отличаются друг от друга длительностью безгербицидной фазы набухания, Определяют динамику относительного роста проростков не менее трех раз. Сравнивая между собой соответствующие разным сортообразцам, но одинаковому варианту кривые, характеризующие динамику указанного процентного соотношения, выявляют сходство нормы реакции гибрида с одним из родителей, что и составляет суть идентификации. 1 ил. 1 табл, .287796 О 5 20 25 Изобретение относится к селекции расте- ний, к общей ботанике и может быть, использовано в сельском хозяйстве.Цель изобретения . - упрощение процесса идентификации и возможность установ. ления типа реакции гибридных растений.На чертеже представлены графики кри.вых относительной динамики роста исходныхродительских форм и их гибридов.Пример 1, Идентифицируют гибридноепотомство озимой пшеницы, Для этого используют гибриды91 и 73, выделенныепутем отбора после скрещивания сортовЭритроспермум 1,27 и Питикул и указанныеродительские сорта.Семена этих четырех форм пшеницыперебирают, удаляя больные, поврежденныеи резко отличающиеся от средних по величине,Отобранные зерцовки раскладывают дляудобства дальнейших измерений на месте фильтровальной бумаги, размеры которой соответствуют развернутой стенкестеклянного стакана диаметром 1 О см.Желательно все семена укладывать одинаково. по отношению к верхнему срезу бумаги, чтобы после накрытия вторым анало,гичцым листом, смачивация, сворачиваниясложенных листов в цилиндр и переноса.последнего в стакан все зародыши семянбыли ориентированы вниз и внутрь стакана,, Для предотвращения смещения зерновокпри сворачивании цилиндра их после смачивания бумаги приминают верхним -листом,Каждому сортообразцу отводит трцстакана по 25 - 30 зерновок на равном расстоянии в стакане. Один стакан оставляютдля контроля (подпитка водой). Другой подпитывают водой толька 1 ч, после чего водув стакане заменяют раствором технического атразина (50-ный препарат) в концентрации О,001, Аналогичную замену воды цатакой же раствор атразина проводят через4. ч в третьем стакане, Общий уровеньжидкости не менее 1/2 стакана,Таким образом, опытные варианты отличаются друг от друга длительностью безгербицидной фазы набухания.Все стаканы оставляют в условиях 16-часового фотопериода с освещенностью 12 -1 тыс. лк.На 4-е, 5-е и.6-е сут, прорастания (начало измерений может быть и более ранним взависимости от скорости прорастация, промежутки времени между измерениями могутбыть менее 1 сут, не достаточными длярегистрируемого прироста) измеряют высоту проростка от зерновки и находят еесреднюю величину внутри каждого вариантаДля каждого из двуХ опытных вариантоввычисляют процентное отношение среднейвысоты к аналогичной величине безгербнцидного контроля за каждый день измерения и откладывают такое соотношение на 2графике (см. чертеж), получая кривую.относительной динамики роста.Сравнивая между собой соответствующие разным сортообразцам, но одинаковому варианту кривые, характеризующие динамику указанного процентного соотношения, выявляют сходство нормы реакции гибрида с одним из родителей, что и составляет суть идентификации,В данном случае гибрид 73 реагирует на внешнее воздействйе так же, как и родительский сорт Эритроспермум27, а гибрид 191 - как сорт Питикул.Пример 2, Идентифицируют гибридное потомство озимой пшеницы, полученное путем скрещивания различных форм и отбора, Для этого семена отбирают и закладыва- ют в цилиндры из фильтровальцой бумаги, как описано в примере 1. Число стаканов с цилиндрами соответствует числу вариантов для дацнои комбинации. В качестве контрольного во всех случаях принимают вариант временем предварительного замачивация в воде, т.е, тот, где в стаканы с цилиндрами сразу заливают раствор атразина соответствующей варианту концентрации. В последней комбинации через 10 сут после закладки проводят единовременное определение содержания хлорофиллов а и б в лис тьях каждой формы по стандартной методике во всех вариантах данной комбинации. Схема вариантов опыта дана в таблице,Полученные результаты усредняют внутри каждого варианта для каждой идентифицируемой формы, затем вычисляют процентное отношение каждого опытного варианта к нулевому (коцтрольному) внутри каждой формы и для каждого срока измерения отдельно, после чего строят кривые, отражающие в динамике норму реакции каждой формы на воздействие атразина относительно контроля. Сравнивая полученные кривые внутри каждой комбинации, отмещ чают:1. В первой комбинации гцорид в ответна воздействие атразица в концентрации 0,01 мг/л проявляет норму реакции, сходную с отцовским сортом, Питикул. По уровню реакции это сходство является большим в 45 первом варианте (О мин предварительногозамачивания).2. Во второй комбинации при концентрации атразина 2,5 мг/л гибрид также показывает норму реакции, сходную с отцовским сортом Питикул, причем более точно это сходство отражено во 2 и 3 вариантах (40 и 60 мин предваритльного замачивания),3, В,третьем комбинации, включающейте же формы, но ца фоне значительно бо., лее низкой концентрации атразина0,0005.мг/л (на пять порядков ниже, чем в предыдущем случае), тот же гибрид проявляет норму реакции, сходную уже с мате128796 формула изобретения Концентрация атразина,мг/л Соответствующейфигуры Вариантыдлительности Сроки измерения Идентифицируемые Йормы Измеряемый Комбинация параметр предва- рительного замачивания вводе 1 Тарасовская 0,01 0;10;60 мин Рост, 48;72;96 ч Питикул Гибрид 2 Костюжень 3 0;10;40; Рост, 46;57;72 ч60 мии мм ринской формой Костюжень 3, и это сходство четко прослеживается по всем трем вариантам предварительного замачивания в воде,4. В четвертой комбинации, где на техже формах испытывали воздействие чрезвычайно малой концентрации (0,00005 мг/л) атразина и добавили вариант 5-минутной фазы предварительного замачивания в воде, ни в одном варианте не было получено достоверной разницы с контрольным вариан О том, вследствие чего минимальными поконцентрации атразина и длительности безгербицидной фазы замачивания были при .няты границы соответственно 0,0005 мг/ли 1 О мин.5, В пятой комбинации для идентификации был использован очень чувствительный биохимический показатель развития - содержание хлорофиллов а и б, а с целью выявления границ максимальной длитель,ности безгербицидной фазы эамачивания .добавлены варианты 7 и 8 ч; Здесь, несмотря на высокую концентрацию гербицида (а может быть, и вследствие ее), изменения оказались почти одинаковыми у всех трех форм взятой комбинации. Это послу жило основанием для того, чтобы признать длительность. безгербицидной фазы замачивания 6 ч, на которой еще возможна идентификаций, максимальной. Сравнивая пигментограммы на этом графике, отмечаем, что сходство гибрида Б - 14 с отцовской ЗО формой (Одесская 51), а гибрида Б - 36 с материнской формой (Злата Долина) заметно лишь при использовании всех четырех вариантов длительностй предварительного за: мачивания, а одного или двух вариантовдля идентификации недостаточно.г В целом полученные результаты пока- зывают, что идентификацию предлагаемым способом можно осуществлять в широком диапазоне концентраций атразина и удобном для обычного рабочего ритма диапазоне длительностей фазы предварительного замачивания семян в воде.Способ позволяет провести идентнфикв. цню на самых ранних этапах развития, сохранив при этом растения живыми. Про. стота способа и скорость его осуществления способствуют значительному ускорению и удешевлению отдельных этапов селекционного процесса. Способ идентификации гибридного потомства растений, преимущественно пшеницы, включающий воздействие на растения неблагоприятным фактором, измерение биологического показателя и сравнение его со значением данного показателя исходНых форм, отличающийся тем;,что, с целью упрощения процесса идентификации и возможности установления типа реакции гибридных растений, воздействию подвергают се. мена, в качестве неблагоприятного фактора используют раствор атразина, в качестве биологического показателя используют динамику относительного роста проростков, измеренную не менее трех раз, прн этом семена предварительно подвергают эамачиванию в воде, на раствор атразина переносят партиями последовательно, начиная с начальных этапов прорастания, оставив последнюю . партию в качестве контроля, а идентификацию осуществляют по сходству динамики относительного роста у гибридных и исходных форм.287796 5 . 1 67 Продолжение таблицы Питикул Гибрид 3 Костижень 3 0,0005 0; 10;40; То же 37;48;60 ч60 мин Питикул Питикул Гибрид 0;1 ю 2;416;7,8 ч. Варианты не показали достоверных отличий от контрольного варианта,хотя по норме реакции гибрид показал сходство с материнскойформой.ьВарианты си 8 ч предварительного замачивания не показали достоверных отличий между сравниваемыми формами. одцн час аоночцацнця- четыре часа зоначцаанцю1 Редактор А Заказ 7727/ ВНИМПИ онзвод ГибриД/4 Костюжень 3 5 Злата Долина Одесская 51 Гибрид 0,00005 0,5;10;- " - 37;4960 ч 40; 60 мин Содержа сутние хлорофиллаа и бмкг/г Составитель Е. ШкрадюПетров Техред И. ВересТираж 653осударственного комитета СССР по делам113035, Москва, Ж - 35, Раушская нтвенно-полиграфическое предприятие, г, У Корректор Л. ПилнпенкПодписноеизобретений н открытийб., д. 4/5город, ул. Проектная, 4