Способ определения вирусной этиологии заболевания

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИК 13993 61 В 10 00. русных включенийкоэффициент порааеформулеа + 2пз+ 4 п и количество количество где моноцитовмоноцитов р-12 включениймоноцитов3-15 включенимоноцитов, ци Шубладзе А.К ы в вирусоло М,: Медицина,одержащих количест держащих количест держащих количест о льство СССР10/00, 1979. ДЕЛЕНИЯ ВИРУСВАНИЯ путем ис" т л и ч а юс целью ускои 30 вели4,0забо вматично ляют моноие в них ви вания,ги УДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТМЙ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН АВТОРСНОМЪ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54)(57) СПОСОБ ОПРЕНОЙ ЭТИОЛОГИИ ЗАБОЛЕследования крови, ощ и й с я тем, что,рения и снижения траиз венозной крови выдциты, определяют нал плазма которых полностьюзаполнена вирусными включениями,ине коэффициента пораженияпределяют,вирусную этиолоИзобретение относится к медицине,а именно к диагностике вирусныхзаболеваний.Целью изобретения является ускорение и снижение травматичности способа.Способ осуществляют следующим образом.Иэ венозной крови выделяют моноциты, Затем определяют в них наличиевирусных включений, Количество вирус"ных включений определяют путем анализа под ьякроскопом моноцитов, прокрашенных литиевым Кармином Орта.Анализ проводят следующим образом.153-5 мп венозной крови центрифугируют 5-7 мин при 1500 об/мин. Послеэтого в чашку Петри наливают 1-2 млпитательной среды ( среды 199, Иглаили Хенкса ), добавляют 0,25 мл взве-,20си верхнего слоя клеток, состоящегокз лейкоцитов, затем содержимое пе-;ремешивают и инкубируют при 37 С втечение 1 ч, После этого сливают не 25прилипшую суспензию клеток, чашкупромывают физиологическим раствором,сушат и фиксируют в парах 4%-ногоформалина в течение 20 мин. Послефиксации чашку Петри промывают водой или физиологическим растворомв течение 3 мин, а затем прокрашивают прилипшую фракцию клеток втечение 15 мин, литиевым КарминомОрта. Краску смывают и дно чашекзаливают раствором Орсеина, после 35чего промывают водой, заливают на15 мин 1%-ным спиртовым растворомсоляной кислоты, еще раз промываютпроточной водой и высушивают,После этого производят микроскопическое исследование клеток под микроскопом (ядра клеток красного цвета ).Затем рассчитывают коэффициентпоражения моноцитов по формуле 45 п 1 +2 п й +Зпз +4 пбегде и - количество (общее)моноцитов;-и - количество моноцитов содер1жащих 3-7 вирусных включений;и - количество моиоцитов, со 2держащих 8-12 вирусных вклю. чений; 55и - количество моноцитов, содер 5жащих 12-15 винусных включений: и - количество моноцитов, цитоплаэма которых полностью за.тполнена вирусными включениями,и диагностируют вирусное поражениепри коэффициенте поражения 0,9"4.В реальных условиях максимальноезначение коэффициента составило 2,52,6. Однако теоретически эта величина может быть равна 4,0.П р и м е р 1. По укаэанной методике проводят анализ содержания вирусных включений в моноциты и вироциты у больных, подозреваемых назаболевание вирусным гепатитом А иБ. В табл.1 и 2 приведены показатели вирусемии при острых гепатитах ВиАСерологическое подтверждениепри вирусном гепатите В было получено на 3 дн. позже, т.е, установле"ние вирусной этиологии заболеванияпомогло своевременной госпитализации, изоляции больных и назначениюсоответствующей терапии,Наличие заболевания острым вирусным гепатитом А во всех случаяхподтверждено клинической картинойзаболевания и отсутствием положительных результатов серологических1испытаний на гепатит В.Как видно иэ данных представленных табл.1 и 2, при вирусных гепатитах обнаруживается резкое повышение процента моноцитов, содержащих включения, а также коэффициента поражения моноцитов. Количествовироцитов и коэффициент их поражения вирусными включениями оказалисьменее показательными.П р и м е р 2. Больной М., в течение 1,5 лет страдал хроническимчасто рецидивирующим уретритом и простатитом. Неоднократно проводимаяантибактериальная терапия была неэффективной. Выпи исследованы вирусные включения в крови, которые оказались повышенными (табл.З ),В табл.З приведены показателивирусемии больного М.В результате проведенного исследования больному М.был поставлен диагноз: вирусный уретрит,вирусныйпростатит и назначено,противовирус"ное лечение.После проведенного терапевтичес"кого лечения явления уретрита и про"статита исчезли через три недели пос1 173993 Т аблица 1 Процент моноцитовсодержащих вирусныевключения 4 О 6 .С 0,05 8 еЫ 1 э 5 6 2 Коэффициент поражения .моноцитов 0,5 М,08 6 1 510 6 СО 05 12 2 4 т 06 1015,7 ) 0,05 Коэффициент поражения вироцитов 1,5+0,5 Ъ 0,05 15 ф 0,01 6 Процент моноцитов содержащих вирусывключения,05 4+О 6 Коли ство пораженроцнтов на 10 8,31 2 4 моно Коэфф циент повироцито ъ 0,05 1,6+О, 14 1,5+0,0 жен ле йачала лечения, При амбулаторном наблюдении в течение трех месяцев обострений хронического уретрита и хронического простатита не было.П р и м е р 3. Больная Н. Клинически и рентгенологически диагностирована острая очаговая пневмония в нижней доле справа (прикорневая ).Изучение показателей вирусемии позволило поставить диагноз острая очаговая пневмония вирусной этиологии. После чего было назначено проКоличество пораженных вироцитов на 100моноцитов Коэффициент пораже"ния моноцитов 12 тивовирусное лечение, которое через 12 дн. ликвидировало явленияпневмонии ( клинически и рентгенологически ). В табл.4 приведены пока-. затели вирусемии у больной Н. Изобретение позволяет быстро инадежно диагностировать наличие вирусного заболевания и обеспечивает О надлежащее лечение при достаточно широком спектре заболеваний и , снизить при этом травматичность,1173993 Таблица 3 Показателив кро ного роцент моноцитов с ирусными включения 8,5 ф 1,ажени Коэффициентмоноцитов 0 5+О 0,5+О,О Количествоклеток рушенных 711,4 абли В нор Показатели больн Процент моноцитов свирусными включениями 6,5+0,08 1,2 Количество пораженныхвироцитов на 100 моноцитов ф 0,6 Коэффициент поражениявироцитов 5 фО,апичество раэрушеных клеток на 100/3 Тираж 722 ПодписноеНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий13035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5. Заказ 5088 лиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,Составитель В.Чистяковедактор О.Черниченко Техред С.Мигунова Корректор Л.Бес