Способ получения липидов

ЯО,. 102276 А СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН 4 С 12 р 7/6 72 ГОСУДАРСПО ДЕЛ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ предусматривающий выращив жей в условиях аэрации на ной среде, содержащей угл качестве источника углеро источники азота, фосфора, магния, сгущение полученн эии дрожжей, выдерживание суспенэии при нагревании с щими отделением биомассы д н экстракцией иэ нее липид л и ч а ю щ и й с я тем, целью увеличения содержани липидной фракции в липидах живание сгущенной суспенэ ствляют нри температуре 55 течение 45-180 мин. В ННЫЙ НОМИТЕТ СССРОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ВТОРСКОМ,Ф СВИДЕ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ и ФЕБ Петрольхемишес комбинат Шведт (ГДР)(56) 1. Авторское свидетельство СССР Р 273760, кл. С 12 Р 7/64, 1969.2,. Авторское свидетельство СССР ,У 362870,кл.С 12 Р 7/64, 1971. ИЯИБ.ИИ 01,;: ЛИПИДОВ, ание дрож- питательеводороды да, а така калия и ой суспенсгущенной последую рожжей ов, о тчто, с я фосфо, выдерии,осуще" -95 С в11022Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу получения липидов путем культивирования микроорганизмов.Известен способ получения липидов, обогащенных фосфолипидами, выращиванием дрожжей на углеводородах в присутствии водной питательной среды, содержащей источники азота, калия, магния, фосфора в виде сульфата аммония хлористого калия, сернокислого магния, фосфор ной кислоты. Выращивание проводят при рН среды 3-8 и температуре 27- 38 С. Удельный расход воздуха составо 15 ляет 20-200 мз/мз.ч. Регулирование соДержания фосфолипидов в биожире проводят путем поддержания в питательной среде соотношения углерода и Фосфора в интервале от 60:1 до 10: 1. Из культуральной среды выделяют биомассу центрифугироваиием. Полученные дрожжи высушивают и экстра,гируют из них липиды органическим растворителем, Содержание липидов25 в биомассе 20-403 и содержание в них фосфолипидов до 207Известен также способ получения липидов, предусматривающий выращива- ние дрожжей в условиях аэрации на питательной среде, содержащий углеводороды в качестве источника углерода, а также источники азота,. Фосфора, калия и магния, сгущение полученной суспензии дрожжей, вьщержива ние сгущенной суспензии при нагреванин с последующими отделением биомассы дрожжей и экстракцией иэ нее липидов 2 . Выдерживание сгущенной суспензии осуществляют при темпера туре 18-38 С в течение 6-24 ч. Соо.держание липидов в биомассе 207 Содержание фосфолипидов, определенное в контрольном эксперименте, воспроизводившем условия известного 45 способа, составляет 19-213,от количества липидов.Недостатком способа является низкое содержание Фосфолипидной фракции. 50Цель изобретения - увеличение содержания фосфолипндной фракции в липидах.Укаэанная цель достигается тем, что в способе получения липидов, предусматривающем выращивание дрожжей в условиях аэрации на питательной среде, содержащей углеводороды в ка 76 3честве источника углерода, а также источники азота, фосфора, калия,и магния, сгущение полученной суспенэии дрожжей, выдерживание сгущенной суспензии при нагревании с последующим отделением биомассы дрожжей и экстракцией из нее липидов, предложено выдерживание сгущенной суспен- . зии осуществлять при температуре 55-95 С в течение 45-180 мин.Способ осуществляют следующим образом.Дрожжи выращивают непрерывным или периодическим способом на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода фракции парафиновых углеводородов, выделенные из нефтей различных месторождений, а также нефтяные дистилляты парафинистых и высокопарафинистых нефтей (например дизельные фракции нефти), содержащие 10-153 парафиновых углеводородов нормального строения, Водная .среда содержит источники азота, Фосфора, калия, магния в виде сульФата аммония, фосфорной кислоты, хлористого калия, сернокислого магния, сернокислого марганца, сернокислого цинка, сернокислого железа.Культивирование дрожжей осуществляют.,в условиях интенсивного перемешивания и аэрирования среды воздухом пи рН среды 3-8 и температуре27-38 С. Удельный расход воздуха20 200. мзмз, ч.Биомассу, полученную при выращиванин, сгущают флотацией, центрифугированием, сепарацией, декантациейили каким-либо другим способом от 5 до 25% АСВ. Сгущенную биомассу нагревают до 55-95 С;:и при этой температуре выдерживают в течение 45-. 180 мин единовременно илй в несколько приемов.После тепловой обработки биомассу высушивают и экстрагируют из неелипиды органическим растворителем,Из полученного экстракта отгоняют растворитель и получают до 133.ли".пидов с содержанием фосфолипидов до493 (см. таблицу). П р и м е р 1 (контрольный).Дрожжи СаМИа рцэр.11 з:егшопдЫ выращивали непрерывным способом на очищенных жидких парафинах в присутствии водной минеральной среды, содержащей источники азота, Фосфора, калия, магния.70%-ная Фосфорнаякислота 175 90 4,43 8,86 8,86 0,86 Медь сернокислая 920 10 Я 6 10 1 О Содержание липидов в обработанной биомассе составило 13, 1%, а количества н вних .фосфопипидной фракции 38,4%,3 1102276 4Состав питательной среды, мг/л массе 11,5%, количество в них фосПарафин 15000 Фолипидной фракции 45,6%.В контроле .(без обработки) вбиомассе было 9,6% липидов, содержа 5щий 26,6% фосфолипидной фракции.0,6, П р и м е р 3. Дрожжи Сапс 1 Иарц 11 еппопйЫ выращивали в условиях,аналогичных приведенным в примере 1,Хлористый калийСульфат магния вФерментере. объемом 800 м . Дрожжевую суснензию отбирали из ферментера и сгущали сепарированием. ПолуЖелезо сернокислоеМарганец сернокислый .ченную сгущенную дрожжевую суспензию нагревали при температуре,95 Св течение 45 мин и высушивали, ИзЦинк сернокислыйсухой биомассы бензином экстрагировали липицы. Сухая биомасса содержала 11,7% липидов, количество в нихДрожжи выращивали в ферментереобъемом 30 л в условиях аэрации и . Фосфолипидной фракции 48,7%.пеРемешиваниЯ СРеды. ТемпеРатУРа В к нт ол /б б бб -Ферментации 31 -32 С, рН. среды 4-4,5,омассе было 9,6 липидов, содержащихкоэффициент разбавления среды 0,2 ч20фосфолипидной фракции.Полученную суспензию дрожжей сгущар и м е р 4. Дрожжи СапаЫали сепарацией. Содержание липидов вза аогпсо а выращивали непрерывнымбиомассе 13%, в сгущенной суспензии.способом на питательной среде, со 21% фосфолипидов.держащей в качестве источника углероСгущенную суспензию выдерживали в 25отечение 24 ч при 31 С и затем эк-,(Фр.240 -360 аС), включающий й -алканыстрагировали из нее липиды. Содер- С -С колйч т 4.,87,жание липидов в биомассе 15%, вних 19% фосфолипидов. . Состав минеральной питательнойПр и м е р 2. Дрожжи СапйЫа 30 среды, мг/л,8 ц 111 хепвопйЫ выращивали непрерыв 2600ным способом на питательной среде, : 4 2 4держащей 2% 1 парафинов Сю С , 70% НРО 4 1000Состав мннеральноч питательной КС 1среды, мг/л 35МГЯО 4 УН 0 , 244Аммофос (467 Р 05) 1720РеЯО 4. 7 Н 20(ЮН, ) ЯО 4650ЕпЯО 47 Н ОМИЯО 4 7 Н 20, 430МпЯО, 7 Н 0750СцЯО 4" 5 Н ОРеЯ 04 7 Н О . 86,5Дрожжи выращивали в ферментереЕпЯ 04 7 Н 20 375 . объемом 30 л в условиях аэрации иМпЯО 7 Н О перемешивания среды при температуре2 35-37 С, рН среды 4,0-4,2. Интен"Дрожжи выращивали в аппарате объ- сивность аэрации 20 нмз /кг ч, скоемом 30 л в условиях аэрации и пере- рость разбавления среды 0,2 ч.мешивания среды при .температуре 3234 С и рН 4,0-4,2. Интенсивность 50 Суспензво выращенных дрожжейаэрации 130 нм/л ч, скорость раз- . сгущали сепарированием. Сгущеннуюбавления среды 0,2 ч-,. Суспензию вы- дрожжевую суспеизию в течениеращенных дрожжей сгущали на сепара мин нагревали при 55 С и экстрааторе. Сгущенную дрожжевую суспензию гировали из нее бензином липиды,нагревали при 70 С в течение 120 мин, 55высушивали и из сухой биомассы бензином экстрагировали липиды, Содержание липидов в обработанной биоФ 1102276В контроле (без обработки) в биомассе было 13,0% липидов, содержащих 21,8% фосфолипидной фракции. гВлияние условий тепловой обработки биомассы на,содержание в липидах фракции фосфолипидовВ Содержание в липидах фосфолипидов, %после обработки до обра- послеботки обработки до.обработки время,мин26,6 180 24,3 40 13,1 21,8 38,4 12,9 180 26,6 45,6 9,6 120 70 49,0 26,6 11,7 9,6 26,6 34,1 9,3 100 Корректор В. Гирняк Редактор П.Горькова Техред Т. Фанта Заказ 1667/1 Тираж 525Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская набд. 4/5И 1Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Условия обработкисгущенной дрожжевойсуспензия Таким образом, описанный способполучения липидов обеспечивает увеличение в 1,5-2 раза содержания влипидах фосфолипидной фракции. е ее аеи щ Содержание линидов, % АСВ