Способ получения биомассы базидиомицетов

(19) (11 ОПИ ЗОБРЕТЕНИ ПАТЕНТУ о т л и ч а юЭ мицелйи гомогени.БИОМАСивирореде, ва в ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИ 1 ЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЧНРЫТИЙ(Япония)(71) Куреха Кагаку Когио КабусикиКайся (Япония)(54)(57) 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯСЫ БАЗЩИОМИЦЕТОВ путем культвания мицелия в питательной сприсутствии источника углерод ппп и /г и г/пп // п /ПППП/Пп . С 12 К 1/645 аэробных глубинных условиях, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения выхода целевого продукта,мицелий базидиомицетов, принадлежащик виду Сого 1 из, предварительно гомогенизируют до получения однородногошпамма и полученный гомогенат вносятв питательную среду в количестве0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу.2. Способ по п.1,щ и й с я тем, чтозируют до образования комков размером 50-1000 мкм,3. Способ по п,2, о т л и ч а ю - ,щ и й с я тем, что, гомогенат вносятв питательную среду в количестве0,05-0, 15 г/л среды.1090261 Табл В г 5,5 0,0 исут Комки мицелия иствовалиКомки мицелия п ствовали незнач 10,9 т 0,011 ельн Изобретение относится к микробиологической промышпенности и касаетсякультивирования бавидиомицетов, которые могут быть использованы в качестве основного материала для медицинских препаратов,Известен способ получения биомассы базидиомицетов, в частности БсЬдгорЬуИцш или Ееппс 1 пцв путем культи.10вирования мицелия в питательной средев присутствии источника углерода ваэробных глубинных условиях 11.Однако известный способ не обеспечивает высокого выхоДа целевого .про 15дукта.Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта.Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу получениябиомассы базидиомицетов путем культивирования мицелия в питательнойсреде в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях,мицелий базидиомицетов, принадлежащих, 25к виду Сого 2 цз, предварительно гомо-генизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенатвносят в питательцую среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника ЗОуглерода декстрозу.Кроме того, мицелий гомогенизируютдо образования комков размером 50 -1000 мкм.Гомогенат вносят в питательную 35среду,в количестве 0,05-0, 15 г/л,Способ осуществляют следующим образом.Посевная культура состоит из нитевидного мицелия (зернистый или 40в форме комков (гранул), образуя не.гомогенную смесь). Для гомогенизации посевной куль": туры гранулы разделяют. Получают шпам, в котором мицелий диспергирован равномерно. Иицелий гомогенизируют до тех пор, пока размер комков находится в пределах 50 - 1000 мк. Гомогенизацию посевной культуры проводят с помощью известных средств, например гомогенизатора, гомосмесителя, дисперсионного смесителя, соковыжималки или винтового смесителя.Время, необходимое для образования шпамма посевной культуры с помощью гомогенизирующнх средств, составляет от 30 с до 10 мин. Если для измельчения комков мицелия до 2-3 ;или 10-50 мк приложены чрезмерные усилия,сказывается неблагоприятный эффект на развитие грибков при последующей культивации.Количество мицелия, применяемого для эаряжения среды, для культивирования обычно составляет 0,01-0,2 г/л предпочтительно О, 05-0, 15 г/л среды.Среда, применяемая для культивирования базидиомицетов, является водной средой и к ней не предъявляют никаких специальных требований, условия культивации в отношении температуры, скорость аэрации и скорость перемешивания обычные.П р и м е р 1. 120 л среды (рН 6,5) следующего состава, г/л воды:,Декстроза 50Дрожжевой экстракт 7,5 загружают в бродильный чан емкостью 200 л и подвергают стерилизация: под давлением при 120 С по обычному методу.Затем мицелийСог 1 оХцз чег зьсоЙог (Рг) Яцек,культивированный в сосуде емкостью 30 л, гомогенизируют в гомосмесителе до тех пор, пока гранулы станут неразличимыми невоору" женным глазом. Гомогенизированным мицелием заражают.среду в бродильном чане емкостью 200 л и затем культивируют в течение 150 и при 25 С, скорос ти аэрирования 0,5 об ./об . в мин, и скорости перемешивания 250 об/мин. Иицелий отделяют, промывают водой, этиловым спиртом и высушивают при 80 С.Полученные результаты показаны.в табл. 1.ры, промыв тоном в ук анном порядкОСы приведеныТ а ушат при 8 Результа табл. 2 блицапо выходуконцентр Количест во мицепыт Время гомо .генизации ицелия посевнойкультуры мин лия,г/л сред еды 0,00 ,015 0,05 7 12,3 4 0,1 13,5 13,3 13,2 0,1 0,2 емьту- . Зсле-. 7 б коралдую 7 3,5 О Комки мицел ноабл. 3 Таким образом, при одинаковом выходе мицелия.для осуществления предлагаемого способа необходимо всего 1/10 ч.посевной культуры, используемой по известному способу. Культивацию осуществляют с применением посев ной культуры, гомогенизированной согласно предлагаемому способу и с2 негомогенизированной культурой. Сравнивают время, требуемое для получения выхода мицелия 11 г/л.Посевную культуру, аналогичную примеру 1, гомогенизируют по примеру25 1. Зараженную среду подвергают культивации. Для сравнения посевную куль. туру не гомогенизируют. Результаты показали, что в случае применения гомогенизированной посевной культуры время, требуемое для достижения вы 30 хода мицелия 11 г/л значительно короче при меньшем количестве посевной культуры.П р и м е р 3. В ферментерстью 200 л помещают 120 л кул 5ьной среды (рН б, 5)имеющейщий состав, г/л воды:Декстроза 50Дрожжевой экстракт 7,5 Среду стерилизуют обычным образомопод давлением при 120 С. Затем мицелий Сог 1 о 1 из чегзсо 1 ог (Рг) Яцек, предварительно выращенный в банкообразных ферментерах емкостью 30 л, гомогенизируют гомогенизатором-смесителем до тех пор, пока гранулы мицелия станут неразличимыми для невооруженного глаза. Такой гомогенизи-рованный мицелий просеивают в ферментер емкостью 200 л при соответст вующих количествах инокулята выращиЭ вают в течение 150 ч при 25 С,скорости аэрации 60 л/мин и скорости перемешивания 250 об/мин. Разросшийся ми. целий отделяют от полученной культу Сравнительные данньцелия в зависимостисевного материала Примечаниесчезали во всех опыта П р и и е р 4, Мицелий базидиоми цетов гомогенизируют в течение 7 мин до тех пор, пока размер комков мице лия не достигнет 100-1000 мкм, и и кулируют в питательную среду,Культивируют при 25 С, скорости .оаэрации 0,5 об./об. питательной сред в мин и скорости перемешивания 250 об/мин в течение 150 чВыросший мицелий выделяют из среды, промывают водой, этиловым спиртом и аце тоном и затем сушат при 80 СоРезультаты представлены в т1090261 Таблица 3Сравнительные данные по выходу биомассы при использованиигомогенизированного и негомогенизированного мицелия Разновидность грибков Депонирование Выход мицелия. через150 ч культивации,г/л культурной среды Предлагае- Сравнительмый способ ный пример Согдо 2 цв чегвсо 2 ог(Рг)Чце 1.РЕВИ-Р Ф5,4 12,8 2412 0,031 О, 030 5,6 2413 12,7 То же 5,3 1 12,8 0,031 О, 031 2414. 2711 0,031 988 0,030 11,9 2712 0 030 12,4 5 О таким образом, использованиебиомассы базидиомицетов вида Сог 1 ойв 1гомогенизированного мицелия в .Каче- что, в свою очередь, повышает выходстве посевного материала и декстрозы биологически активных препара-.в качестве источника углерода позво" 5 тов на основе данных кульчает значительно увеличить вьщод тур.Ф3 НЩЩИ Заказ 2962/56 Типаж 522ЯоущсиоеФилиал. ПОП Патеет, г.Ужгород, улЯроектйая, 4 СогдоЯця сопяогз(Вегас)шав.РЕВИ-Р НоСого 1 цв раг 8 ашепця(Рг)Раг.РЕВИ-Р о. Норма иноку- лирования, г/л0,0310,031 О, 030 0,031 О, 030 0,030 12,6 ,11, 7 11,4 10,8