Способ диспергирования биомассы бактерий

72) Авторы нзобретенн Н, Лазаренко, Ю.В. Медведев и Коэн ут особо Всесоюзный научночистых) Заявятел скин инстит сследовате опрепарато) СПОСОБ ДИСПЕРГИРОВАНИЯ БИОМАССЫ БАКТЕРИЙ Изобретени биологической именно к спос биомассь, оса тионактивных относится к промышленност обам диспергир денной с помощ локулянтов.икроа вания ью ка полиметакрил ве 0,5-10 мо Улучшение сы обусловле и полиметакр анионактивны образующими катионактивн Приме со 11, осажде кости (объем полиэтиленим стакане на маван ги ер ешивае обесвностио отриледующем ный способчной эффекбиомассы,Однако извепечивает достадиспергированияцательно сказывысеве микроорг ается при поанизмов. емешиван массу вводягатора - пол из расчета нкулянта 0,5диспергатора 20 15 мин. Цел фектив осажде тами. Ука что по массы переме мешиваизобретения - повышение эфости диспергирования биомасс ной катионактивными флокулян достигается тем, спергирования био редусматриваюцему биомассу при пере полиакриловую или анная цел способу д актерий, ивание, в ии вводят диспергирования на плотные пита Эффективностьенивают высевамльные среды, а кже по измене Известен способ дисиомассы бактерий путеия 1 11. овую кислоту в количестль на 1 моль флокулянта.диспергирования биомасно тем, что полиакриловаяиловая кислоты являютсями полиэлектролитами,полимерные комплексы с ыми флокулянтами.р 1. Клетки Езсйегс 61 а нные из культуральной жидпробы - 20 мл) с помощью ина (ПЭИ), помещают вгнитную мешалку. При пев сфлокулированную биоводный раствор диспериакриловой кислоты (ПАК) а 1 моль введенного фло- (1 2 3 5, 1 О) мольПробу перемешивают975793 Таблица 1 Соотношение ПЭИ:ПМАК, моль Конт 1:0 1:0,51:1 1:2 1:3 1:5 1:10 Концентрация ПЭИмкгклетокмлрд Эффективностьдиспергирования 0 0,8 1,0 1,0 1,2 1,2 . 1,1 Биологическаяконцентрация,(КОЕ/мл) х 10 3,1 4,9 Процент КОЕ от контроля 100 92 Эффективностьдиспергирования 0 0,5 1) 1,2 1,2 1,1 0,9 30 Биологическаяконцентрация, (КОЕ/мл) х 101 6,0 0,1 Процент КОЕ от контроля 17 - 40 100 3оптической плотности надосадочной жидкости спустя 24 ч с момента введе ния полиакриловой кислоты. Измерив оптическую плотность надосадочной жидкости и определив по калибровочно" му графику. концентрацию микроЬных клеток, эффективность диспергирования (Я) рассчитывают по следующей формуле." игде и. - концентрация микробных клеток в надосадочной жидкостипосле обработки пробы диспергатором, кл/мл; Приведенные экспериментальные дан 45ные показывают, что в результате перемешивания Гез использования диспергатора концентрация микробных клетокв надосадочной жидкости не увеличивается и, следовательно, не происхо- Одит распад флокул микроорганизмов,При дополнительной обработке сфлокулированной биомассы с помощью ПАКконцентрация клеток в надосадочнойжидкости увеличивается до величиныисходной концентрации микроорганизмов в культуральной жидкости (что соответствует и -пс /и " 1),и " концентрация микробных клеток в контроле, кл/мл;и - конЦентрация микробных клеток в надосадочной жидкости после осаждения биомассы с помощью флокулянта, кл/мл. В качестве контроля используют исходную культуральную жидкость. Результаты по эффективности редис- пергирования Ьиомассы, осажденной 10 и 30 мкг/млрд клеток ПЭИ, полиакриловой кислотой, определенные 2"я методами, приведены в табл, 1. Высевы на пйлотные питательные среды также показывают, что число колониеобразуащих единиц (КОЕ) увеличивается при введении диспергатора по сравнению с обычно используемым способом перемешивания.П р и м е р 2. В биомассу бактерий ЕзсИег 1 сЬа со 11, сфлокулированную с помощью полиэтиленимина (обьем пробы 20 мл), при перемешивании на магнитной мешалке вводят водный раствор диспергатора - полиметакриловой кислоты (ПИАК) из расчета на 1 моль введенного Флокулянта 1 (5,10) моль975793 4ческой плотности надосадочной жидкости спустя 24 ц с момента введения ПИАК, приведены в табл. 2 (для разныхРезультаты эффективности дисперги- молярных соотношений флокулянта и дис". рования, оцененные по изменению опти.З пергатора). 5диспергатора. Пробу перемешивают15 мин..Таблица 2 Эффективность диспергирования при соотношении ПЭИ:ПИАК, моль Концентра"ция ПЭИ,мкгклетокмлрд(КОЕ/мл) к 10 1 1,43 0,63 3,0 100 Процент КОЕ от контроля 93,5 21 Формула изобретения Способ диспергирования биомассыбактерий путем перемешивания, о тВНИИПИ Заказ 8936/43 Тираж 505 Подписное Филиал ППП,"Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 П р и м е р 3. В биомассу Е 5 сЬег 1 сЬ 1 а со 1, сфлокулированную с помощью полупромышленного катионактивного флокулянта ВПКв количестве 20 мкг/млрд клеток (обьем пробы 10 мл), при перемешивании на магнитной мешалке вводят водный раствор Таким образом, введение в биомассу микроорганизмов, сфлокулированную с помощью катионактивных Флокулянтов, полиакриловой и полиметакриловой кислот улучшает диспергирование, что способствует повышению достоверности результатов, получаемых при последующих высевах биомассы на твердые питательные среды,. например при определении токсичности Флокулянтов. Зф ПАК из расчета на 1 моль введенногофлокулянта 1(5) моль диспергатора.Пробу перемешивают 15 мин.Результаты э(рфективности диспер"гирования, оцененные по высевам на фф плотные питательные среды, представлены в табл. 3. л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения эффективности диспергирования биомассы, осажденной катионактивными флокулянтами, в биомассу43 при перемешивании вводят полиакриловую или полиметакриловую кислоту вколичестве 0,5- 10 моль на 1 моль Фло"кулянта.Источники информации,1 щ принятые во внимание при экспертизе1. Бабаева И.П., Агре Н.С. Практическое руководство по биологии почв,И., ИГУ, 1971, с. 44-45