Стимулятор митоза

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскинСоциалистическиеРеспублик(26)Приоритет аа делам нзобретеннй и отнрытнй: . С "1 Ялтинский научно-исследовательский инст методов лечения и медицинской климатолоим. И.М,Сеченова(54) СТИМУЛЯТОР МИТОЗА ОН 52,7 фС Т пл. - 10,3 С, т Ъ плотность 1,066 г/см Испытание острой т нола на белых мышах( 20 С 3"; оксичности эвге весом 15-18 г ызывающая гиД д ) при внут равна 353 мг/к1Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть ис-пользовано в эксперименте на животных и изолированной культуре клеток для,стимуляции митоза,Известны средства для ускоренияпроцессов восстановления тканей,такие как метацил, френолон, ретаболил, сиренар 11.Однако известные средства стимулируют, в основном, только гипертрофию клеток резацированного и поврежденного органа,Целью изобретения является расширение ассортимента высокоэффективныхстимуляторов митоза.Поставленная цель достигаетсяприменением в качестве стимуляторамитоза эвгенола (1-окси-метоксиаллилбензола) - известного компонента гоэфирного масла многолетнего полукустарникового растения рода Ос мое9 гай 1551 еОв (базилика эвгенольного)семейства 2 аЬ 1 аса 1 (губоцветных). 2Эвганол (1-окси-метокси-аллилбензол), полученный из эфирного масла базилика эвгенольного, желтоватая жидкость с запахом гвоздики, растворимая в спирте, эфире и других органических растворителях, ограничен"но в воде.Хймическая структура эвганолаИнтенсивность счета Куль,тура,У Концентрацияэмульсииэвгенола,3 Показателидостоверностиразличий каждаякультура в среднем на концентрацию 0,5 196,5 + 23,5 220 Р0,05 173 0,05 659,5 + 99,0 р с 0,05, 4 0,05 560 1487 0,0050,0050,00050,0005 1411,5 + 76,2 р г 0,001 855 481 й 19,0 р)0,05 360 Контроль С гепарином 210 240 10 225+1 5,0 С физиологическим раствором 143 н -100 121 5+21 3 95039Экспериментами установлено,чтоэвгенол может быть введен в организмразличннми путями: внутрибрюшинно,внутримышечно, перорально, ингаляционно, интратрахеально, подкожно, накожно (хорошо проникает внутрь черезкожные покровы). Применение эвгенолавозможно в Различных формах, например в виде водной эмульсии, спиртового раствора, масляного раствора (мас вло какао и другие растительные масла) .Средство проверено в лабораторныхусловиях на культуре фибробластов.Для этого в среду 199, содержащуютелячью сыворотку, добавляют воднуюэмульсию эвгенола в концентрации 0,5- 50 мг/100 мл.При этом содержание всех указанных ингредиентов находится в следую вщих соотношениях: среда 199-80 мл,телячья сыворотка 20 мл, эвгенол 0)5-50 мг.Культуру клеток фибробластов легкого плода человека (посевная доза ф15 000 клеток в 2 мл среды 199 сдобавлением 20 сыворотки крупногорогатого скота) помещают в пробирки в асептических условиях. Пробирки устанавливают в наклонном положении и ставят в термастат при 37 С. Через 72 ч проводят микроскопический контроль монослоя фибробластов. 0,5 Ф- ную водную эмульсию эвгенола, приготовленную с помощью ультразвукового дезинтегратора, разводят до концентрации соответственно 0,5; 0,05;0,005; 0,00051.Вопытные культуры клеток добавляют по 0,1 мл эмульсии эвгенола указанных концентраций, Каждая концентрация эмульсии изучается на двух параллельных культурах фибробластов.В контрольные культуры добавляют по 0,1 мл физиологического раствора, в контрольные культуры - 0,014 гепарина. Во все опытные и контрольные культуры клеток добавляют по 2 мкК и Н -тимидина и вновь инкубируют 18 ч в термостате, Через 18 ч культуры изучают в световом микроскопе, затем сливают в среду, отмывают от несвязавшейся матки и готовят с счету импульсов на- счетчике.В таблице приведены результатыопытов.950392 формула изобретения О Составитель Т. ЖуравкинаРедактор Т. Веселова Техред К. Мыцьо Корректор С.Шекмар Заказ 5801/10 Тираж 714 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5ВМВЕЕ Е Е Е Е Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, уп. Проектная, 4 Полученные данные показывают,что , 0,005-ная эмульсия эвгенола способствует значительному повышению включения изотопа Н в клетки. Зто свиЭдетельствует о повышении интенсивности метаболической и митотической активности клеток ( р0,001), Аналогичные данные получают при изучении культур в световом микроскопе: количество клеток в поле зрения при добавлении в культуру фибробластов О,1 мл 0,005-ной эмульсии звгенола в 4-6 раз превышает аналогичные показатели в контрольных культурах.Приведенные данные показывают, что эвгенол является высокоэффективным стимулятором митозаСредство может использоваться для ускорения регенерации тканей при проведении экспериментов, размножения культур клеток, необходимых для постановки опытов; получения данных для выявления скрыть 1 х нарушений в 5 генетическом аппарате клеток приих делении. Применение эвгенола 11-окси-метокеи-аллилбензола) в качестве стимулятора митоза.Источники информации,принятые во внимвние при экспертизе1. Полуденный Л.В., Сотник В,фХлапуев Е.Е. Зфирномасляничные илекарственные растения. И., "Колос",1979 с, 32-33.