Штамм “бк-харьков

) Заявлено 24,12.76 (21) 2434245/30.15рисоединением заявки РЙ -удврствввкье квнетвт СССР вв делам кзвбрвтвивв в открытка(088,8) лете ата опубликования описания 25.09.79 2) Автор Г. П. Черкас, С, Г. Кандыба н И ий изобретения арьковский научно. исследовательский институт микробиологии вакцин и сывороток нм, Мечникова ите) ШТАММ МУСОВАСТЕВЮМ ТОВЕВСО 10318 "БК-ХАРЬКОВ" Одним профилакт препарата дл мененне но штаммов ммы должнтаточнымнвития тубе ми свойст никновсния продолжительнои аллергии.Целью. изобретения является получение штамма микобактерий туберкулеза, отвечаюшего основным требованиям, предьявляемым к вакцинным штаммам: безвредный, достаточно иммуногенный, чтобы защитить вакцинированных от развития туберкулезного процесса.Полученный штамм микобактерий туберкулеза "БК.Харьков" имеет следующие морфоло. гнческую, культуральную и другие биологические характеристики,Морфологические признаки: слегка изогнутые, иногда с утолщениями на концах, полиморфные, грамположительные палочки, длиной 2 - 8 мк и толшиной 0,2 - 0,5 мкм, типично окрашиваются Штамм МусоЬастегщтп тоЬегсц 1 оав ("БК-Харь.ков" Х 841, вариант штамма Ча 1 ее типа Воча,предназначенный для изготовления противотуберкулеэной вакцины),Изобретение относится к ветеринарии и представляет собой новый штамм микобактерий туберкулеза, который может быть использован дляприготовления противотуберкулезных препаратов:вакцины, других антигенов, а также сывороточных препаратов,Для профилактики туберкулеза людей вовсем мире применяется живая вакцина иэ микобактерий туберкулеза штамм БЦЖ/ВСО 111В ветеринарии вакцинопрофнлактика БЦЖкак в Советском Союзе, гак и большинствестран мира, в настоящее время не осуществляется. Одной из основных причин этого, помимонедостаточной нммуногенности ЬЦЖ являетсявозникновение продолжительной аллергии у вакцинированных БЦЖ животных, сохраняюшейсяв течение года н более, и отсутствие пригодныхдля практики методов дифференциации поствакцинальных реакций на туберкулин от постннфекционных,из средств для улучшения вакцинонки туберкулеза у людей н созданияя таковой у животных является привых, более иммуногенных, вакцинных нкобактерий туберкулеза. Эти штамы быть безвредными и обладать досдля защиты вакцинированных от разркулезного процесса иммунизнруюшивами, а также не обусловливать воз.686738 ражения после длительного контакта с больными туберкулезом телятами, достигает 100%.Остаточная вирулентность: незначительная, первичные туберкулезные комплексы не форми. руются.Аллергиэирующие свойства: аллергия слабо выражена и относительно кратковременна ( у мор. ских свинок до двух, а у телят до шести месяжв). Приобретенные штаммом микобактерий туберкулеза "БК.Харьков" вирулентные свой. ства оказались стойкими, наследственно закрепленными. геверсионное пассирование в течение 10 лет не обнаружило восстановления его исходной вирулентной характеристики. Штамм "БК. Харьков" был получен из вирулентного штамма микобактерий туберкулеза Ча 1 ее, бычьего типа, который пассировали в течение 1.1,5 лет на мясо.пептонно-глицериновом бульоне, содержа. щем 3-15% препарата "Эктерицид", (водорастворимые продукты окисления рыбьего жира в физиологическом растворе хлорида натрия), причем концентрацию экстерицида в среде выращивания микобактерий туберкулеза увеличивали с 3 до 15% по мере возрастания кратности пассажей.Сравнительная характеристика штаммов мико- бактерий туберкулеза "БК-Харьков" и БЦЖ приведена в таблице,Индексзащиты Продолжительностьаллер гической реакции на туберкулин Остаточная вирулентность"БК-Харьков" У морских свинок У морских свинок и телят 100% до 2, а у телят до 6месяцев У людей 73,2 - 83,7% У телят 1 год иВакцинированные болеетелята лишь переживают контрольныхживотных, а через3 - 9 месяцев после заражения у них развивается инкапсулированный туберкулез. тельной аллергениостью - относительно кратковременной и слабо выраженной аллергическойреакцией на туберкулин, что дает возможностьв практике проводить дифференциацию междувакцинированными и инфицированными тубер.кулезом животными,по методу Циль Нильсена, стойко сохраняющие эту окраску при воздействии кислот, щелочи и спирта, не образующие спор и не имеющие кап.сулы. Цитоплазма бактерий имеет гомогенный вид и содержит гранулы, микрогранулы и вакуолн.Культуральные свойства; на поверхности жидких питательных сред формируется рыхлая, морщинистая пленка светло. желтого цвета. На плотных питательных средах (Петрова, Виногра О дова) растет в виде изолированных колоний ти. па "й" с образованием пигмента лимонно. желтого цвета. Растет в аэробных условиях, Анаэро.биотические свойства не отмечаются. Оптималь.иые параметры температуры 37,8 - 38,0 С рН 4,5 - 15 8,0.Биохимические свойства: снижена активность каталаэы, уреазы и дегидразы.Иммуногенные свойства: индекс защиты "БК-Харьков в эксперименте на морских свин 20 ках после однократного подкожного введения им 5 мг "БК-Харьков" и последующего зараже.ния 0,01 мг вирулентной культуры микобактерий туберкулеза штамм Ча 11 ее, а также на телятах после двукратной внутрикожной вакци нации по 2 мг/кг или трехкратной подкожной вакцинации в дозах 0,4 - 0,6 - 0,8 мг/кг веса те.ленка с интервалом 5 суток и экспериментального заражения 15 мг подкажно вирулентной культурой штамма У 8, либо естественного за- ЗО Как видно иэ таблицы, штамм "БК-Харьков" отличается от производственного штамма55 БЦЖ высокой иммуногенной активностью (индекс защиты 100%), почти полной алатогенностью, (не формируется первичный туберкулезный комплекс), ареактогенностью, а также незначи. Первичные туберкулезныекомплексы не формируются Формируются первичные туберкулезные комплексыОни инкапсулируются, азатем рассасываются (сроки исчезновения от 100 днейдо 4 лет)686738 Формула изобретения 35 Составитель В. ЗавьянцевТехред Л.Алферова Корректор М. Шароши Редактор Д. Пинчук Тираж 672 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5 Заказ 5588/6 Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Отмеченные преимущества штамма БК. Харьков" по сравнению с БЦЖ были установлены на ла лабораторных животных и на 300 телятах. Штамм "БК.Харьков" безвреден для телят и обладает иммуногенностью. 5В лабораторных опытах по определению иммунитета у 60 телят, вакцинированных различными методами - внутрикожно, подкожно и перорально - установлен иммунитет, соответст. венно методу прививки, у 100 - 40% животных 1 О при искусственном заражении, (отсутствие иммунитета отмечалось у телят, которым вакцина бы ла применена перорально).В производственных условиях из 489 телят, привитых вакциной внутрикожно и исследованных аллергическим методом после прививки, не реагировали на туберкулин от 20 до 70 % живот. ных (по группам), а у трех телят из пяти, положительно реагировавших при туберкулинизации и убитых для исследования через 6 - 9 мес. после вакцинации, обнаружены патоморфологичес. кие изменения во внутреннихорганах и лимфа. тических узлах, типичные для туберкулеза,Экономический эффект от использования вакцины "БК.Харьков" для профилактики туберкулеза только крупного рогатого скота в масштабах страны может достигнуть сотен миллионов рублей в год, так как гибель одного теленка в возрасте до двух лет обходится в 350 - 500 руб,30 колеблясь в зависимости от его породы, веса, себестоимости и других показателей в каждом хозяйстве. Штамм МусоЬастегцгп тцЬегсц 1 оа 1 а "БК-Харьков", вариант штамма ЧаНее типа Войа, предназначенный для приготовления противотубер. кулезной вакцины, хранится в коллекции Харьковского научно-исследовательского института микробиологии, вакцин и сывороток им. Меч.никона.Морфоло ические признаки: слегка изогнутые, иногда с утолщениями на концах, полиморфные, грамположительные палочки длиной 2 - 8 мкм и толщиной 0,2 - 0,5 мкм, типично окрашиваюшиеся по методу Циль. Нильсена, стойко сохраня.ющие эту окраску при воздействии кислот, ше. лочи и спирта, не образующие спор и не имеющие капсулы. Цитоплазма бактерий имеет го могенный вид и содержит гранулы, микрогра.нулы и вакуоли.Культуральные свойства: на поверхности жид. ких питательных сред формируется рыхлая, мор. шинистая пленка светло-желтого цвета.На плотных питательных средах (Петрова, Виноградова) растет в виде изолированных ко- лоний типа В, с образованием пигмента лимонно-желтого цвета, Растет в аэробных условиях, анаэробиотические свойства не отмечаются. Оптимальные параметры температуры 37,8-38,0 С, рН - 4,5 - 8,0.Биохимические свойства: активность каталаэы, уреазы и дегидраэы снижена.Иммуногенные свойства: индекс защиты мор. ских свинок и телят достигает 100%.Остаточная вирулентность: незначительная, Первичные туберкулезные комплексы не формируются.Аллергиэирующие свойства: аллергия слабо- выражена и относительно кратковременна (у мор. ских свинок до двух, а у телят до шести меся. цев).Источники информации, принятые во внима. ние при экспертизе1. Вейсфейлер Ю. К. Руководство по сывороточному и вакцинному делу - М., 1943, с. 241- 253.