Штамм микобактерий мyсовастеriuм снеlоnеi, используемый для аллергологической идентификации микроорганизмов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ 808 СПУБЛИ 12 1 ч 1/2 С 5 РЕТЕН Изоб тение относится к м ной микробиологии новый штамм Му рактеризующийся а тетической среде и т и может быть испол ческой идентифика едицинскои и представсоЬастег 1 огп ктивным ро- уберкулиноьзовано для ции микротся и ветеринарляет собойсЬеопе 1, хастом на сингенностьюаллергологиорганизмов еризующииеской среде е 1 опе . больного голу ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР (72) А.Л,Лазовская, М.Л.Тихомирова, Л,М.Пинчук, Е.М.Максимова и Д,Т.Леви (56) Вег 9 еуз пчапца ззтегпатс Ьастего 1, - В 9,С 11 гпе ( . - 1984, р. 1472-1481.Кассич Ю,Я. и др. Ветеринария, - 1985, М 2, с.29-30.(54) ШТАММ МИКОБАКТЕРИЙ МУСОВАСТЕВОМ СНЕ 1 ОИЕ 1, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ (57) Использование; медицинская и ветеринарная микробиология, штамм микобактерий, туберкулиногенность, аллергологическая идентификация микобактерий. Сущность изобретения: новый штамм МусоЬастег 1 цгп сЬе 1 опе 1 ГИСК М 424 обладает туберкулиногенностью, Штамм выделен из мокроты человека с микобактериозом легких, Морфология. Клетки имеют вид палочек длиной 2,0-3,0 мкм, Окрашиваются по Граму, по Цилю-Нильсону окрашиваются в красный цвет. Культуральные характеристики. На плотной яичной среде образует мелкие, сухие, шероховатые колонии кремового цвета, На плотной яичной среде Левенштейна-Йенсена при 37 С вырастает за 3-5 дней, На картофельно-глицериновой среде Павловского вырастает за 4-5 дней. Размножается при 22-40 С, не растет при 45 С, оптимум роста - 30-38 С, На жидкой питательной среде растет на поверхности в виде толстой морщинистой пленки кремового цвета, оставляя среду прозрачной, Через 4- 5 недель роста, среда становится светло-коричневого цвета, оставаясь прозрачной, Физиологические свойства Растет на плотной питательной среде Левенштейна-Йенсена с добавлением 5хлорисгого натрия или салицилата натрия, не ферментирует эрабинозу, рамнозу, инозит, манниг, дуль- Б цит, сорбит, не утилизирует цитрат натрия и малонат, не имеет 3-галактозидазу и нитратредуктазу, Туберкулиногенность, Накопление в среде туберкулина начинается с трех-четырехнедельного возраста, Максимальное количество сенситинэ в среде образуется через 5-6 недель роста. В 1 лд культурального фильтрата содержится 0,820-1,100 г сенсити (в среднем 0,910 г).Биологическая активность составляет 0 00003 мг в 1 ТЕ,ОО Целью изобретения явл МусоЬастегцгп сЬе 1 опе 1, хара ся активным ростом на синтет и туберкулиногенностью,Штамм МусоЬассег 1 цгп с ыделен из мокроты человек обактериозом легких, в 1981808871 Формула изобретенияШтамм микобактерий МусоЬастег 1 цв стеопе 1 М 424 ГИСК В 37, используемый для аллергологической идентификации микроорганизмов. Соста вител ь А.Л азо в ска яРедактор В,Трубченко Техред М,Моргентал Корректор М,Петрова Заказ 1258 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 Штамм МусоЬэстег 1 цв сте 1 опв М 424депонирован в коллекции государственногонаучно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им,Л.А.Тарасевича 5под М 37,Штамм МусоЬас 1 ег 1 цв стеопе Р 424характеризуется следующими свойствами.Морфологические свойства, Бактерииштамма - тонкие палочки длиной 2,0-3,0 10мкм Окрашиваются по Граму, по ЦилюНильсену окрашиваются в красный цвет,Культуральные свойства. На плотнойпитательной среде Левенштейна-Йенсенаштамм растет в виде сухих мелких шероховатых колоний кремового цвета, На жидкойсинтетической среде Линниковой-Могилевского клетки штамма образуют на поверхности толстую морщинистую пленкукремового цвета, оставляя среду прозрачной. Через 4-5 недель роста среда становится светло-коричневой, ос 1.аваясьпрозрачной,Биохимические свойства. Штамм растетна среде Левенштейна-Йенсена с добавлением 5 хлорида натрия и с сэлицилатомнатрия. Не ферментирует арабинозу, рамнозу, инозит, маннит, дульцит, сорбит, неутилиэирует цитрат натрия и мальнат натрия, обладает активной уреазой и не имеет 30- галактозидазы и нитратредуктаэы.Состав жирных кислот, определенныйметодом сопиролитической газовой хроматографии соответствует спектруМусоЬассег 1 цв с 1 те 1 опе 1. Нуклеотидный состав штамма - 650 ГЦ,Вирулентность. Внутримышечное заражение морских свинок в дозе 1,0-1,5 мг бактерийной массы (вес влажной массы) неприводит к развитию микобактериоза в течение срока наблюдения (2 месяца),Туберкулиногенность. В процессе росташтамма на синтетической среде Линниковой-Могилевского, начиная с 3-4-недельного возраста, происходит накопление 45туберкулина. Максимальное количество туберкулина в среде накапливается через 5-6недель роста. Выход сухой бактерийноймассы 0,700-0,820 на 1 литр среды. Туберкулин, полученный из культурального фильтра 50 методом осаждения трихлоруксусной кис. лоты с последующей очисткой ацетоном, зтиловым спиртом, эфиром, представляет собой порошок белого цвета, в состав которого входит белок (72,0-82,0 ) и липополисахэриды, В 1 литре культурального фильтрата содержится от 0,820 до 1,100 г туберкулина (в среднем 0,910 г/л). Биологическая активность изучена на гомологично сенсибилизированных морских свинках и составляет 0,00003 мг в 1 ТЕ,П р и м е р, Аллергологическая идентификация видом микобактерий 5 мг бактерийной массы некроматогенного свежевыделенного штамма собирают металлической лопаточкой с поверхности твердой питательной среды (например, Левенштейн-Йенсена) и помещают в коническую центрифужную пробирку с З,Ораствором фенола. Через 6 часов раствор фенола осторожно сливают, добавляют 2-3 мл изотонического раствора хлорида натрия и центрифугируют в течение 20 мин при 5000 об/мин, К осадку добавляют 0,2 мл стерильного вазелинового масла, растирают стеклянной палочкой и вводят шприцем в 2-3 места на спине морской свинки внутрикожно. Через 3 недели после сенсибилизации шерсть на обоих боках морской свинки депилируют полосой в 3 см и на следующий день вводят строго внутрикожно по 0,1 мл растворов сенситинов и туберкулинов по 5 ТЕ, На одной морской свинке одномоментно ставят 8-10 кожных проб с антигенными препаратами, изготовленными иэ некромогенных микобактерий различных видов (М.ач 1 цв, М,пегасе 1 ц 1 аге, М,Ьочз, М,тцЬегсц 1 оз 1 з, М.1 огтц 1 тцв, М,Капзаз 1, М,цаз 1 г 1, М,звецвас 1 з, М,стеопе), Наибольшая кожная проба на один из препаратов указывает на сенсибилизацию гомологичным штаммам, Чтение результатов реакций проводят через 48 часов.