Способ количественного определения оксафенамида

6 екгз ссеетсккх Ссииелисткческих Ресл 1 сблкк(43) Опубликовано 30.11.78. Бгсллетень,Л (43) Дата опубликования о. - гя Э 1.11. 51) М.Кл.- б 01 1 Ч 21,5 Гссударстееккый ксмктет по лелем иаобретеккй и стклцтийХабаров и Л. И. Поваляевасударственный лгедиццнский институт"; Читинский 54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОКСАФЕИАМ ИЛАДЕЛЕЙ 44-Я Изобретение относится к аналцтгическоц хиииц, а имечно к способу определения оксафенамида.Известен опособ 1 количественного определения оксафенамида, закл 1 очающцйся в обработке янализируемой пробы смесью сульфата калия, сульфата, меди, селена и серной кислоты с последующим кипячением полученного раствора и определением азота методом Кьельдаля.Однако этот,сспособ имеет низкую чувствительность определения и достаточно сложен.Прототдпом изобретения является способ 2 количественного определения оксафена мида, заключающийся в обработке анализируемой пробы хлоридом окисного железа с,последующим фотоколориметриржанием полученного раствора,Однако такой опосаб имеет низкую чувствительность определения - 76 лкг.1 г.г.С целью повышения чувствительности определения предлагается опособ количественного определения оксафенамида, заключяющийоя в обработке анализируемой пробы хлоридом магния в щелочной среде с последующим измерением флуоресценццц полученного прц этом,распвора.Прим ер 1. 0,1 г (точная гнавеока) мелкоизмельченных таблеток переносят в мерную колоу емкостью 100 дгл, прцоазляют 50 - 60 лг,г этанола и энергично встряхивают 2 - 3 лин Доливают этанол до метки и перемешивают. 4 .ил полученного раство ра переносят в мерную колбу емкостью100 л.г ц доводят сбьем дзяжлы дцстпллчгрованной золой до метки. К 1 .цл полученного раствора прцбавляют 1 ц.г 1,с,-ного раствора хлорцдя магния, 8 я.г дважды ди стцллцрозанной воды, 2 каплц 3 н. раствораедкого патра, перемешгцвают и измеряют интенсивность сфлуоресценццц исследуемого ря:тзора.Содержание оксафенамцда рассчцтыва ют по,калибровочному графику, для чего врчд пробирок отмеривают 0,1, 0,3, 0,5 и 0,7 л.г стандартного раствора оксафенамида в этаноле с содержанием 100 лгкг,ил, добавляют 1,п.г 2,с 0-ного раствора хлорцда магния, все 0 растворы доводят лвяяды дистиллированной водой до 10 .илпргцбавляют 2 капли 3 н, раствора едкого натра и перемешивают. Флуорцметрцруют одновременно с растворами исследуемых образцов. При содер анпц менее 7 цкг/ц,г оксафенамцда в исследуемом растворе можно определять,по отгношенцю к одному стандарту.Результаты флуориметрического определения оксяфенамида в таблетках по 0,25 г представлены в таблице.635413 Найдено оксафеначида Навеска мелкоиагяельненнык таблеток,г/кг раскетана однутаблетку 5 Завнсимость интенсивности флуоресценции от концентрации окса(фенамида следу- следующая: 0,2620 4.0000 5,СОСО 4,6875 4,2500 0,0896 С,240 0,12 О 0,0954 0,1094 5,2366 С,2274 0,26 15 0,248 Концентрацияоксафенамида,лгкг10,00 Чувствительность реакции достаточновысокая 0,02 мкгмл, что позволяет прово дить определения препаграта в лекарспвенных формах и биологических жидкостях без отделения от сопутствующих компонентов. Чувствительность реакции в лекарспвен ных формах ОЯ 1 мкг/мл, .в биологичесгкихжидкостях - 0,01 мкгlмл для предложенного способа, тогда как для известного 76 мкг/мл. 55 Опрегделения проводят на электронном флуориметре ЗФ - ЗМА. Концентрация раствора хлористого магнияиопользуемого,для обработки аналгизи руемой пробы,", составляет 0,000001 -0,1 гглг,г. Оппимальные значения 0,01 - 0,03 гггмл.,Завгсимость интенснвгности флуореоценцггн от концентрации хлорида магния 65 следующая. П р и,м е р 2. Определение ок афена.мида з крови. 1 мл цельной венозной крови разбавляют до 10 гпл зтанолом, хорошо перемешивают, центрифугируют 3 - 4 ггин при 3000 обглгин, К 1 мл центрифугата добавляют 1 мл 2%- ного водного растгвора хлорида магния, 8 мл дистиллированной воды и 2,капли 3 н. распвора едкого натра. Измеряют интенонвность флуоресценции исследуемого растзо. ра. Содержание оксафенамида рассчитывают по калибровочному графику, для чего а рягд пробирок отмеривают 0,1,0,3,0,5, 0,7 мл стандартного раствора оксафенамида в зтаноле с садержанием 100 мкгглгл, добавляют 1 мл 2%-,ного раствора хлориеда магния, до. водят объемы всех пробирок до 10 мл дис. тиллированной водой, добавляют в каждую пробирку по 2 ка 1 пли 3 н. раствора едкого патра, флуориметрируют одновременно с растворами образцов. По результатам измерений строят калггброзочньи 1 графнк,1 мл мочи разбавляют до 10 мл дважды дистиллированной водой. К 1 лгл раствора приба 1 вляют 1 мл 2%-ного распвора хлори. да магния, 8 мл дистиллированной воль: и 2 ка 1 пли З,н. раствора едкого патра, измеряют интенсивность флуореоценции. (.;одержание оксафенамида рассчитывают по калибровочному прафнку, для чего в ряд,пробирок отмеривают 0,1, 0,3, 0.5 и 0,7 мл стандартного раствора оксафенамида в зганоле с содержанием 100 1 гкгг,гггг, добазляют 1 мл 2%-ного водного раствора хлорида,мапния, доводят объемы всех,пробирок до 10 мл дистиллированчюй водой, добавляют в каждую пробиргку 1 по 2 каплн 3 н, распвара едкого патра. Флуориметргируют одновременно с распворами и 1 сследуемых образцоз. Пс результатам этих .измерений строят калибровоч,ный график.,При изучении оптимальных условий проведения флуоресценпной,реакции на окса. фенамид установлено, что прямая зависи. мости интенслвности флуореоценцни от кон. центрации аксафенамнда лежит в пределахот 0,01 до 9,0 лгкг/мл, прямолинейная - от0,01 до 7,0 лгкглгл.Относительная интенсивность флуорссцеиции Концентрация клорида магния,г/,и,г0,001 95 0,01 0,02 10 Источники информации, гпринятые во внимание пр 1 экспеотизе: 0,03 9 Е 0,04 Составитель Л. СоломенцеваРедактор В. Ыирзаджаиова Техред С. Антипенко Корректор И, Симкина Заказ 164/1163 11 зд.710 Тираж 100 Подписное НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Тнп. Харьк. фнл. пред. сПатент Формула изобретенияСпособ количественного оаределения оксафенамхда путем обработки анализируемой пробь 1 неорганическим реагентом, от- Л И Ч а Ю Щьи й С Я тЕМ, ЧтО, С ЦЕЛЬЮ ПОВЬ 1 ШЕ- наля чузствительности определения, в качестве неорганичеакого реагента иапользуют клорид магнпя,и ооработку ведут в щелочной среде с последующим измерением флуоресценцип полученного при этом раствора. 1. Государственная фармакопея СССР,сЖоия, 19 б 8 с 504 505 2. Государственная фармакопея СССР.Жвания, 968, с 505.