Способ получения -аминокислот

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДВТВЛЬСТВУ(61) Дополнительное к авт. свнд-ву: Изобретение относится к усовершенствованному способу получения(.-аминокислот, которые находят широкое применение в раэпичных областях науки, медицины и промыщпенности, в частности в синтезе пептидов, гормонов и бепков.Известны раэпичные способы ъокучениа .Ь-аминокиспот путем асимметрического гидропиза рацемкческих И ацкпамикокислот в присутствии катализатора с ациладной ак- Е тивностцо, причем в качестве катализатора спапъэуют аципазу, нммобилиэованную на носатепе самыми раэцичнымк методами: химическими адсорбционными, ,включением в копимерный гепь. Например, известен 16 способ попучения (.-аминокислот, осуществкаемый в присутствии ацклаэы ковапентко связанной с акриповым попкмером 1. Однако использование подобных катапитичесях композиций ограничено сложностью их ав покучеиня, их неудовлетворительной фнпь рукавй способностью и рядом других приИзвестен таажкяспот путем ас способ получения 1.-амикмметрического гипаопкза ката эщйафатнюьзй аак 369 т(43) Опубликова радемических Й- вцккаминокисиог, эакпючвкФ- щийся в том, что раствор рацемическойй аципамннокиспоты пропускают через копонну, заполненную катализатором, представпя 3 э щим собой ацкпаэу, нммобкпкэнровакную на аннонообменкой смоле. Бекевой продукт покучают с выходом по 70%, активность катапкэагора в начале. цикла 1000 мкмопь 1, -метиоккна в 1 час (в пересчете на 1 г катализатора), продолжительность дикие 960 час, остаточная активность катализатора в конце цикла 10%2. Однако и этот спо соб имеет ряд особенностей, гаках как кяз кая относктепьная активность катапизатора и снаность процесса, связанная с тем, что один цккп.проводят за 960 час, зна читепьнаи потеря активности катапязатора,Цепью иэобретекиа авпяютса упроще и интенсификациа процесса.Поставпенкая цепь достигается тем, в процессе асимметрического гидропиза демическкх М-адкпаминокиспот испощъзупиэатор, состоящий из смеси сухог пороака свиных почек с двуокисью кре57343ния, покрытой фипьтруюуим мате 3 риацом с размером отверстий 10 - 10 см, при соотношении компонентов катализатора- порошка свиных почек и двуокиси кремни- равном 1:8-12.Пред.вгаемый способ заключается в том, что сухой порошок свиных почек меха яическим путем перемешивают с двуокисью .кремния, соотношение указанных компоиевтов равно 1 фяопучеиную смесь помещают в емкость из фиаьтрующего матернаула с размером отверстий 10 10 см, пос. ле этого проводят асвмметржесквй гидро- пиз рацемической М-Ъцяламииокиспоты пере. мешиванием емкости из фипьтрующего мате риапа, содержащей катанзатор, в растворе субстрата. Время проведения процесса 1 цикл за 10,час, выход цепевого продукта "75%, Остаточная аципазная активность и конце цикла - 60%. Активность катапиза я торе 8000 мкмопь Ь-метионина всечасна 1 г катапиэатора. фВ качестве фипьтрующего материапа может быть использована любая п отная хпопчатобумажная ипи синтетическая ткань с 23 достаточной прочностью и размером отверс ч -3тий 1 О - 10 см. Отверстия указанных раэ мероэ обеспечивают нужный уровень вэаимодейетвия молекул субстрата с ферментом, ввФ 4 фемеиио обеспечивая изоляцию катани майской смеси; Наличие двуокиси кремния в яатапитической смеси увепичивает контактув поверхность, пропускную способность ееого кнейкого порошка свиных почек, енаиитепьно упрощает процесс доступа суб етрата к ферменту. Креме того, двуокись кремния явпяется адсорбентом ацилаэы стабипизирующим ферментативиую активность катапизатора.эПредвагаемым способом можно попучать 40 ряд оптических аминокиспот, раэдепенне рацецатов которых происходит с достаточной скоростью, В качестве субстратов могут быть использованы, например, Й-ацетипапанин Йацетипвапин, Й -ацетинпейцин 43 й - ацетипсерин. В зависимости от используемого субстрата необходимо ипи увеличить время инкубации по сравнению с метно.вином, ини увеличить копичество катапиэатора, так как гидролиэ разных М - ациламино-Ю кислот происходит с различной скоростью.П р и м е р 1. 1 г сухого порошка свиных почек перемешивают с 10 г двуокиси кремния и загружают в мещох из фильтрующего матврнапа (хп опчато-бумажная 33 ткань). Аципаэная активность понученного катализатора 5000 мкмольметнонина в 1 час на 1 г смеси.47,8 г Й- ацетипметионина (0,5 м раствор) р:отворяют в 500 мп воды,доводят 40 рЪ до 7,2 концентрированным аммиаком.В стакан с раствором субстрата загружают катапизатор (мешок со смесью сухогоаорощка свиных почек о двуокисью крем-ния) и выдерживают при перемешнванцяи 37 С в течение час.Мешок с катапитической смесью поспепромывки 0,1 м фосфатным буфером (рН 7,2) .испопьзуют повторноПоспе выдержки доводят рН полученногораствора уксусной киспотой до 8,2 к раствору добавпяют окопа 5 г активированногоугпя и кипятят в течение 8 мин. Папученный раствор поспе фипьтрования упариваютв вакууме до сиропообразного состояния.Поспеохпаждения до комнатной температуры добавпяют 300 мп этанопа и оставпяйт на 16 час при 4 С дпя криста пизации. Выпавшие кристаплы . метионииа отфипьтровмвают промывают охпажденнымспиртом и высушивают при 80 С до постоянного веса.Допучают 14 г);метионина. выход 75%,Щ23,2 .(сщ 15 к. НС 1) содержание основного. вещества 988%П р и м е р 2. 8 г сухого порошкасвиных почек перемешивают с 50 г двуокисикремния н загружают в мешок из фипьтрующего материана (хпопчатобумажная ткань).Аципаэная активность подученного катапизаторв 8000 мкмопь -метионнна в 1 часна 1 г смеси.32,8 г И ацетнлапанина (0,5 м раствор)растворяют в 800 мп воды и доводят рНдо 7,2 концентрированным аммиаком.В стакан с раствором субстрата загружают катапизатор и выдерживают доводярН раствора уксусной кислотой до 8,2, краствору добавляют 5 г активированногоугпя и кипятят в течение 5 мин. Попученный раствор после фипьтрования упаривают вфвакууме при 80 С до сиропообразного состояния и добавляют 250 мп этипового спир-тасмесь выдерживают нри 4 С в течениеф16 час. Выпавшие кристаппы апанина фильтруют, промывают охпажденным 70%-ным спиртово-водным раствором и высушивают при50 фС до постоянного веса.Выход 8,05 г (7 Ж), С 4,)3 та+ 14,6 фо 21 н, НС 4) содержание основного вещества 99%,П р и м е р 3. 36,8 гй- ацетил-ВЬ серина растворяют в 500 мл дистиплированнойводы доводят рН до 7,2 концентрированнымаммиаком и проводят гидропиэ по методикепримера 2.Выпавшие кристаплы Ь.серина промывают100 мл охпажденного спирта и высушиваютфпри 50 С в вакуумном уыильом шкафувыход 9,4 г (71%), А 14,9 (с 2,5 нНСЙ)573470 содержание осн овного вещества Щ 8 Г. Формупа изобретения Способ попучения Ь-амынокнспот путем асимметрического гидр опиза рацемическик 5 Ю- аципаминокиспот в присутствии катапизатора с аципазной активностью, о т и ич а ющ и й с я тем, что, с цепью упрощения и интенсификации процесса, катапизатор применяют в виде смеси сухого порош а евиных почек сдвуокисью кремния, по-Ькрытой фильтрующим мктериапом о размером отверстий 10 -10 см, при соотношении компонентов катализатора - порошкасвиных почек и.двуокиси кремния, равном1-12).Источники информации, принятые во внимание прн экспертизе1. Патент США М 3536587, кп. 19563, 27.10.70.2, Патент Японии Ж 125588,кй, 36 (2), 05,12,74, Составитень С. ЙпужновРедактор О. Кузнецова Чехред Н. Бабура Корректор Е ПацпЗаказ 3706/19 Тираж 583. ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССРпо цепам изобретений и открытий113038, Москва, Ж, Раушская набд. 4/5фипиап ППП "Патент, г. Ужгород, уп. Проектная, 4