Способ культивирования хлореллы

(5)5 С 1 ическии инс тво ССС 12,А 01 13/00, ХЛОРОВАН обиологическаякультивироваэтом составляет е на 150 ь выше,ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(57) Использование; микпромышленность, спосо Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способам культивирования одноклеточных организмов, к каким относится хлорелла,Целью изобретения является повышение выхода биомассы хлореллы,Это достигается тем, что известный способ культивирования хлореллы на питательной среде известного состава в сосудах с рабочим объемом для питательной среды в 1 л. при оптимальных условиях перемешивания воздухом, освещения и температуры, дополняется тем, что по достижении хлореллой плотности популяции (40-50) млн.кл/мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспенэии из 5 - 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме до достижения плотности популяции 210-250 млн.кл/мл,Выход биомассы придо 5,4 г/л, что по биомасс ния хлореллы. Сущность изобретения: способ культивирования состоит в засеве маточной культурой сосудов с рабочим объемом в 1 л для питательной среды, получающейся из жидких отходовпосле варки картофеля. выращивание проводят при освещении в . оптимальных условиях, после достижения хлореллой концентрации 40 - 50 млн,кл/мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе полученные культуральные жидкости иэ 5 - 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают выращивание в тех же условиях до достижения концентрации 210 - 250 млн.кл/мл. 1 табл. ем при известной технологии выращиваия хлореллы,Сущность изобретения состоит в следу. ющем. Известный способ культивирования хлореллы в нескольких сосудах с рабочим объемом в 1 л для питательной среды, содер- ф жащей минеральные соли и фильтрат жид- ОО ких отходов, образующихся при варке и С) бланшировке картофеля на картофелепере- О рабатывающих предприятиях, включающий засев маточной культурой СЫоге 11 а ЧШдагз с исходной концентрацией засева не менее, чем 8-10 млн.кл./мл, выращивание О при температуре 23+1 С, освещенности 4500+500 лк, 12-часовом чередовании светового и темнового периодов, при переме- (,) шивании воздухом в течение светового периода, дополняется тем, что по достижении плотности популяции (40 - 50) млн,кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5 - 6 таких сосудов в один более объемныйи продолжают культивирование в том же режиме до достижения плотности популяции 210 - 250 млн,кл/мл,Существенным отличием предлагаемого изобретения является то, что популяция хлореллы не проходит в своем развитии "стрессовой" фазы, и это гарантируется, вопервых, временной синхронизацией указанных действий по соединению параллельных в количестве 5 -популяций хлореллы с достижением ими указанных плотностей в (40 - 50) млн.кл/мл (при выращивании в сосудах с рабочим объемом в 1 л для питательной среды), во-вторых, временной синхронизацией момента прекращения культивирования с достижением плотности объединенной популяции (210-250) млн,кл/мл; и такая последовательность операций из литературы неизвестна.П р и м е р 1, Для приготовления филь- трата жидкие отходы, образующиеся при варке и бланшировке картофеля, направляют в емкости, где они отстаиваются в течение 30 мин, после чего надосадочную жидкость сливают и пропускают. через фильтр для получения фильтрата с концентрацией сухих веществ 1,5. В 100 мл полученного фильтрата жидких отходов вносят 0,3 г азотно-кислого калия, 0,08 г однозамещенного фосФорно-кислого калия, перемешивают и доливают указанный фильтрат до общего объема 1 л, после этого подвергают дробной стерилизации 3 раза через сутки при 0,02 Мпа в течение 30 мин.Приготовленную таким образом среду заливают в параллельные сосуды в количестве по 1 л в каждый и засевают маточной культурой СЫогеИа Чодаг 1 з с исходной концентрацией засева не менее, чем 8-10 млн.кл,/мл. Культивирование микроводоросли ведут при температуре 23+1 С, освещенности 4500 1500 лк и чередовании светового и темнового периодов 12:12, В течение светового периода культуру перемешивают воздухом. По достижении хлореллой плотности популяции (40 - 50) млн.кл,/мл в каждом иэ параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии иэ 4 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме, Один или несколько одно- литровых сосуда оставляют для контроля. Выход биомассы при этом составляет для контрольного варианта (прототип) 4,52 г/л при плотности популяции 217 млн,кл,/мл, Для сосуда, в котором происходит доращивание объединенной культуры, выход биомассы составляет 4,96 г/л при плотности популяции 278 млн,кл./мл. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 П р и м е р 2. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой СЫогеИа Чо 1 Чаг 1 з, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.По достижении хлореллой плотности популяции (40-50) млн.кл,/мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме. Вы-, ход биомассы составляет 5,31 г/л при плотности популяции 252 млн.кл,/мл.П р и м е р 3. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой СЫогеИа Чц 19 аг 1 з, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.По достижении хлореллой плотности популяции (40-50) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспенэии из 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме,Выход биомассы составляет 5,44 г/л при плотности популяции 212 млн.кл,/мл.П р и м е р 4. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой СЫогеИа Чо 9 аг 1 з, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.По достижении хлореллой плотности популяции (40 - 50) млн,кл,/мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливанп вместе выращенные суспенэии из 7 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме.Выход биомассы составляет 5,02 г/л при плотности популяции 192 млн.кл./мл.П р и м е р 5, Приготовление фильтрата иэ жидких отходов, засев маточной культурой СЫогеИа Ни 19 агз, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такие же, как это описано в примере 1,По достижении хлореллой плотности популяции (30+3) млн.кл,/мл в каждом иэ параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме,Выход биомассы составляет 4,33 г/л при плотности популяции 176 млн,кл,/мл,П р и м е р 6. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой СЫогеИа Чоцаг 1 з, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1,По достижении хлореллой плотности популяции (30+3) млн.кл,/мл в каждом иэ1806185 Выход биомассы через двое суток, г/лЧисло сливаемых сосудов Плотность популяции в момент соединения, млн,кл,/мл Плотность популяции через двое суток, млн.кл,/мл(контрольный прототип)4 5 6 7 5 6 5 6 217 4,52 40 - 50) 40-50 40-50 40-50 30-ф 3 30+3 60+5 60+5 278 250 210 192 176 184 245 210 4,96 5,31 5.44 5,02 4,33 4,48 5,12 5,08Числа в третьей графе таблицы указывают интервал, который перекрывает как разбросплотностей параллельных популяций к моменту слива, так и точность их определения. Составитель А, ЕгоровТехред М,Моргентал Корректор Н. Милюкова Редактор Заказ 965 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Рауаская наб., 4/5 Производственно-иэдательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспенэии иэ 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме, Выход биомассы составляет 4,48 г/л при 5 плотности популяции 184 млн,кл,/мл,П р и м е р 7, Приготовление фильтрата из жидких отходов, завес маточной культурой СЫогеИа ЧЫцагз, а также температура, яркость и режим освещенности остаются 10 такими же, как это описано в примере 1.При достижении хлореллой плотности популяции (60+5) млн,кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5 таких 15 сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме,Выход биомассы составляет 5,12 г/л при плотности популяции 245 млн.кл,/мл.П р и м е р 8, Приготовление фильтрата 20 из жидких отходов, засев маточной культурой СЫогеИа Чо 9 агз, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1,По достижении хлореллой плотности 25 популяции (60+5) млн,кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии иэ 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме. 30 Выход биомассы составляет 5,08 г/л при плотности популяции 210 млн,кл,/мл.Результаты эксперимента приведены в таблице.Результаты опыта по выращиванию культуры СЫоге 1 з Чоцагз на субстрате. содержащем 0,3 г/л азотнокислого калия, 0,08 г/л однозамещенного фосфорно-кислого калия, 1,5 мас,сухих веществ,Из таблицы видно, что во втором и третьем опытах получены наибольшие выходы биомассы,Таким образом, предлагаемый способ культивирования хлореллы позволяет повысить выход биомассы примерно на 15,формула изобретения Способ культивирования хлореллы, включающий выращивание ее на питательной среде при освещении в оптимальных условиях до максимального накопления биомассы, отл ича ю щи йс я тем, что, с целью повышения выхода биомассы хлореллы, выращивание проводят в 5 - 6 параллельно работающих сосудах до достижения концентрации 40 - 50 млн, кл./мл в каждом сосуде. затем полученные культуральные жидкости сливают в один более объемный сосуд и продолжают культивирование в тех же условиях до достижения концентрации 210 - 250 млн.кл./мл.