Способ выявления самрylовастеr pyloridis в слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИК 5 001 й 1/28 ИС ИЕИ Б Т К ПАТЕНТ к аскииобе еобра ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР). (71) Киевский научноисследовательский институт клинической и экспериментальной хирургии (72) Е.В.Медвецкий, Е,П,Тумасова и 3.В. Гершевикова(73) Киевский НИИ клинической и экспериментальной хирургии(56) Опагре Н. е 1 а 1., "АРаз", 1988, 96, Ь 2, р.128. . (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ СааруоЬастег руогЫз В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА Способ относится к области биологии и медицины предназначен для экспрессвыя вления микроорганизмов Савру 1 оЬас 1 ег руогЫз в биопсийном материале слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта,Известно несколько прямых и косвенных способов обнаружения СааруоЬас 1 ег руогйз в биопсий ном материале желудочно- кишечного тракта человека; выявление фермента уреаэы, как маркера колонизации бактериями слизистой оболочки желудка культуральный метод, гистологический метод и электронно-микроскопический метод,Наиболее близким по технической сущности и принятым за прототип является бак" териоскопический способ выявления Сатру 1 оЬастег руогЫз, который представляет собой модифицированную окраску по Граму включает фиксацию препарата, окрашивание и бактериоскопию.Основным недостатком этого способа является низкая точность выявления СагпруоЬастег ру 1 огЫ 1 з и техническая слож- ность исследования, обусловленная исполь.БЦ 1794245 АЗ 2(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии. Целью является повышение точности способа. Цель достигается тем, что из биоптата слизистой желудочно-кишечного тракта готовят цитологический препарат. Затем его фиксируют в течение 5-7 мин в 1 - 1,5-ном растворе фосфорно-вольфрамовой кислоты. А окрашивают в составе, содержащем азур И, глицерин и воду, Бактерии на препарате имеют вид палочковидных структур или спирилл, Способ позволяет быстро и качествен- но выявить бактерии; 1 табл. зованием многократной о р сцвечивания.Целью изобретения является повышение точности, сокращение времени и упрощение техники исследования,Указанная цель достигается тем, что вспособе выявления Савру 1 оЬастег ру 1 огЫзв слизистой оболочке желудочно-кишечноготракта; включающем фиксацию препарата,окрашивание и бактериоскопию, согласноизобретению, фиксацию осуществляют в 11,5-ном растворе фосфорновольфрамовойкислоты, окрашивание .выполняют над открытым огнем, при этом в качестве красителя используют состав содержащий Азур И иглицерин в следующих соотношениях,. мас,фАзур П 0,8-1,5Глицерин 30-40Вода ОстальноСпособ выполняют следующим зом. Готовят отпечатки биопсии слизисто оболочки желудочно-кишечного тракта н1794245чистых предметных стеклах. Высушивают. микроорганизмы СаперуоЬассег ру ог 01 з На препараты наливают 1-1 Я-ный рас- обнаруживали в препарате в виде темно-ситвор фосфорновольфрамовой кислоты, че- них изогнутых палочек или спирилл.рез 5-7 мин сливают, промывают водой. П р и м е р 2. Биопсийный материал в Покрывают препараты красящей смесью со виде кусочка слизистой оболочки кишечнистоящей из, мас.ф: ка отпечатывали на сухие предметные стекАзур И 0,8- 1,5 ла, высушивали, На препараты наливали Глицерин 30-40 1-ный раствор фосфорновольфрамовой Вода Остальное кислоты, через 5 мин сливали, промывали Проводят стекло 15-20 раз над пламе водой; Покрывали красящей смесью состоянем газовой или спиртовой горелки до появ- щей из, мас,:ления паров, Дают стеклу остыть в течение Азур И . 0,81 мин, Осторожно. держа предметноеГлицерин 30стекло горизонтально, поливают водой, Вода Остальное смывая таким образом краситель. Препа Проводили стекло над газовой горелкой 15 рат высушивают и рассматривают под раз до появления паров, 1 мин стекло осты- микроскопом.. вало, Держа стекло горизонтально, промыПриэтомсмесьпрепаратовготовятсле- вали водой, смывая краситель. Препарат дующим образом : высушивали и изучали под микроскопом.В дистиллированной воде (60 мл) рас Микроорганизмы СааруоЬастег ру 3 огсИз творяют азур И до полного растворения, за- обнаруживали в препарате в виде палочкотем добавляют глицерин, доводят обьем до вйдных структур или спирилл,100 мл дист.водой.П ри м е р 1. Предназначенный для выяв- Для доказательства возможности доления микроорганизмов Савру 1 оЬастег 25 стижения положительного эффекта был исруогбез биопеийный материал слизистойследован биопсийный материал слизистой оболочки желудка был отпечатан на сухив. оболочкижелудочно-.кишечноготрактау 220 предметные стекла, вйсушен. Фиксирован больных предлагаемым слособом и спосов 1,5-ном растворе фосфорновольфрамо-бом-прототипом, Положительный результат вой кислоты в течение 7 мин, промыт водой. 30 был получен при исследовании 205 биопсий Затем покрыт красящей смесью состоящей с помощью заявленного способа и у 183 из, мас.,:полученных способам-прототйпом.Азур П 1,5 .:, . По предложенному способу выявляеГлицерин 40. мость составила 93 фД, время одного исслеВода Остальное 35 дования 5-7 мин., в сравнении с прототипом, Проводят над газовой горелкой 20.: раз до где выявляемость 83, время одногоисслепоявления паров, 1 мин стекло остывало,: дования 15-29 мин,Держа стекло горизонтально, полиеаливо- Изобретение обладает высокой достодой, смывая краситель. Препарат высуши- верностью и позволяет сократить время одвали и рассматривали под микроскопом, 40 ногоисследования в 2-3 раза.45Ф о р мул а из обр е те н ия: . в качестве фиксатора используют 1,0-1,5- Способ выявления Саеру 1 оЬастег ный раствор фосФорно-вольфрамовой кис.ру 1 ог 1 б 1 в в слизистой оболочке желудочно- лоть, а окрааивание проводят в составе, кишечного тракта путем фиксации биоптата содержащем азур Н, глицерин и воду, в слес последующим приготовлением гистологи дующем соотношении компонентов, мас.%: ческого препарата. егб окрашиввнием и выявлением бактерий по пвлочковидным азурИ0,8-1,5;структурам, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,глицерин 30-40, с целью повышения точности способа, фик- вода . Остальное. сацию проводят в течение 5-7 мин, при этом 551794245 Зависимость качества окраски от концентрации фосфорновольфрамовой кислоты и Азура в красящем растворе.Результат изображения под микроскопом Кон ент а ия аство ов Аруз-П Фосфорно-вольфрамовая кислота1,8 2,0 1,8 2,0 Составитель Е. ТумасовТехреа М.Моргентал Корректор А,Мотыль Редактор Г. Федотов Заказ 532 Тираж Подлисное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиямпри ГКНТ СССР 113035, Москве, Ж, Раушская наб;, 4 Ю Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 1 2 3 4 5 6 7 О;5 0,6 0,7 ОЯ 1,2 1,5 1,6 0,5 0,6 0,7 1,0 1,2 1,5 1,6 Низкий контрастНизкий контрастУмеренный контрастНормальный контрастНормальный контрастНормальный контрастКонтраст 4 овышен, окрашивается окружающая микроорганизмами среда Плотность окраски высокая, выявление бактерий из-за интенсивного окрашивания окружаю ей мик оо ганизмы с е ы зат нено