Способ определения пирокатехина

, 1755137 А ОЮЗ СОВЕТСКИХОцИАЛИСТИЧЕСКИХЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО.ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР(5)5 6 01 И 21/ ПОПИСАНИЕ ИЗКАВТОРСКОМУ СВИДЕТЕ БРЕТ 1,(71) Научно-исследовательский институт би- тывают резоологйи при Иркутском государственном в присутствиуниверситете . и измеряют(56) Ууве Кирсо Определение различнйх фенолов реакцией с 4-амино-антипиридином,изв. АН ЗСС, хим, геол., 1977, 26. 22.Коренман И. М. Фотометрический"айал, М. Химия, 1970, с. 174 - 182. РЕДЕЛЕНИЯ ПИРОКАТЕгретения: пробу ои перекисью восйдазыпри рН 7,ние оптической ирежиме. 2 табл,ь изоб рцином и перок измере ческом брабадорода 5 - 8,0 лотноиз ФОъГИзобретение относится к аналитиче- предназначен для определения индивидуской химии или прикладной биологии, а альныхфенолови разныефенолыдаютодиименно к способам определения йирокате- наково окрашенные продукты конденсации,хина в смеси, и может быть использовано Цель изобретения - повышение селекпри анализе сточных вод, при определенйй" " тивности"определения,. , Бсодержания пирокатехина в резорцине.: Поставленная цель достигается тем, чтоИзвестен способ определения микроко- в способе, основанном на обработке анали- - фличеств фенолов в воде, основанный на ре- зируемой пробы химическим реагентом иакции конденсации 4 -аминоантипирина с . фотометрирование, анализируемую пробу (Лфенолами, обрабатывают резорцином; перекисью во- (ЛНедостатком известного способа явля- дорода в присутствйи пероксидазы при рНется невозможность определить отдельно, 7,5 - 8,0 и измеряют изменение оптическойпирокатехин, если он находится в смеси с плотности в кинетическомрежиме.другими фенолами, так как с разными фено- Способосуществляютследующимобразом.лами образуются одинаково окрашенные Определяют концентрацию пирокате- впродукты конденсации хина. К анализируемой пробе добавляют ф. Наиболее близким к изобретению по фосфатный буфер,:водные растворы резортехнической сущности и достигаемому ре- цина, пероксидазы и пероксида водорода,зультату является способ определенйя пи- Смесь быстро перемешивают и измеряют еерокатехина, основанный на обработке оптическую плотность (А) через определенанализируемой пробы химическим реаген= ные промежутки времени Т в течение 1 - 2том, содержащим фенолы с последующйМ"- мин. По рассчитываемому отнОшению измефотометрированием полученного раствора, нения оптической плотности ( Ь А ) во вреНедостатком известного способа явля- мени (ЛТ) судят о концентрации резорцинается низкая селективность, так как способ в пробе,Пример 1,В кювету вносят 1,6 мл фосфатного буфера рН 7,75; 1,0 мл резорцина 20 мМоль;1,0 мл пирокатехина, содержащего 1 мкгвещества; 0,2 мл пероксидазы с концентрацией 5 мкг/мл, 0,2 мл 140 м Моль/л растворапероксида водорода, быстро перемешивают смесь и измеряют изменение оптическойплотности во времени при Л= 460 нм.Т 1 = 15 с, Т 2 = 45 с, Ь Т = 45. с - 15 с = 30 с 10А 1 = 0,014, А 2 = 0,053 Л А = 0,053 - 0,014 =-Г 100 = 7,8ЛАП р и м е р 2. Определяют концентрацию пирокатехина. В кювету вносят 1,6 млфосфатного буфера рН 7,75; 1,0 мл резорцина 20 мМоль/л; 1,0 мл пирокатехина, содержащего 1 мкг вещества; 0,2 мл пероксидазыс концентрацией 5 мкг/мл; 0,2 мл 140 20мМоль/л раствор пероксида водорода; быстро перемешивают смесь и измеряют изменение оптической плотности во временипри Л=460 нм.Т 1 = 15 с, Т 2 = 45 с, 25ЛТ = 45 с - 15 с = 30 с = 0,5 минА 1 = 0,014, А 2 = 0,053,Ь А = 0,053 - 0,014 = 0,039ХТ100 =- 7,830П р и м е р 3. Определение проводят аналогично примеру 1, за исключением того, что рН 8,0, концентрация пероксида водорода 180 мМоль/л, резорцина 50 З 5 мМоль/л и кинетику снимают при Л= 470 нм,Т 1=15 с, Т 2=45 с, ЬТ=ЗОс=05 мин А 1 = 0,012, А 2 = 0,050, Ь А = 0,038ХТ100 = 7,6П р и м е р 4. Определение проводят аналогично примеру 1, за исключением того, что рН = 7,5, концентрация пероксида водорода 100 мМоль/л и резорцина 15 45 мМоль/л, измерения проводят при Л=450 нм.Т 1 = 15 с, Т 2 = 45 с ЛТ = 0,5 минА 1 = 0,012, А 2 = 0 047 Ь А = 0,03550100=7,0ЬАЛТ в минутах, ЛА - в ед, оптической плотности (ЛАЮТ) 100 - вусловныхединицах.Последовательность операций при внесении компонентов реакционной. смеси растворов пробы, резорцина, буфера не имеет значения. Пероксидазу и пероксид водорода вносят последними, Пероксид водорода запускает реакцию, и с момента его введения начинают отсчет времени,П р и м е р 5. Все значения, как в примере 1, но содержание пирокатехина б мкг. Последовательность внесения компонентов реакционной смеси: растворы буфера, резорцина, пробы пирокатехина, пероксидазы, пероксида водорода.Т 1 = 15 с, Т 2 = 75 с, Л Т = 60 с = 1 мин А 1=0,026,А 2=0,178 ЬА=А 2 - А 1= = 0,178 - 0,026 = 0,152(ЛА/ ЛТ) 100 = 15,2П р и м е р 6. Все значения, как в примере 4, но последовательность внесения компонентов смеси другая; растворы пробы, резорцина, буфера, пероксидазы, пероксида водорода,Т 1=15 с, Т 2=75 сЛ Т=60 с=1 мин А 1 = 0,026, А 2 = 0,179, Л А = 0,179 - 0,026 = =0,153( Л А/ ЛТ) 100 = 15,3В данном способе реакцию окисления. смеси фенолов катализирует пероксидазная система (пероксидаза плюс пероксид водорода). Результаты представленные в таблицах и примерах, получены в опытах, где одним из компонентов реакционной смеси - 0,2 мл раствора пероксидазы с концентрацией 5 мкг/мл,Для способа это оптимальная концентрация пероксидазы, При более низких концентрациях падает чувствительность метода, при более высоких концентрациях уменьшается линейнйй участок кинетической кривой нарастания окраски, При увеличении концентрации пероксидазы 5 мкг/мл, линейный участок кинетической кривой становился менее 25 сек (для пирокатехина с концентрацией 1 - 2 мкг/мл) и ухудшалась воспроизводимость опытов.Предложенный способ позволяет провести прямое определение микроколичества пирокатехина в присутствии высоких концентраций резорцина (при соотношении пирокатехин: резорцин до 1: 1000). Данные по преимуществу предложенного способа - высокая селективность определения пирокатехина - представлены в табл. 2.Формула изобретения Способ определения пирокатехина, включающий обработку анализируемой пробы химическим реагентом и фотометрированием, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения селективности определения, анализируемую пробу обрабатывают резорцином и перекисью водорода в.присутствии пероксидазы при рН 7,5 - 8,0 и измеряют изменение оптической плотности в кинетическом режиме.;,;. Таблица 1 Зависимость скорости .индикаторной реакции от концентрации пирокатехина Кон ент а ия пи окатехина мкг/мл 1 2 4 6 8 18 1 16 Кон ент а ия езо ина, мкг/мл 0 0 0 0 0 0 1000 1000 7,8 10,8 13,8 15;4. 16,8 19,6 7,6 19,8,: Таблица 2 Составитель С.ХованскаяРедактор М.Товтин Техред М,Моргентал Корректор Т.Вашков Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 2887 . Тираж: Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открцтиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5