Способ определения активности оксидаз смешанной функции печени

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИН 01 б 8, 33/5 151)5 6 01 ИЕ ИЗОБ ОПИС ТЕН КОМУ СВИДЕТЕ К 8 У. Ко тария и сится к биохимии, а му анализу, и может оценки активности мических и клиниче - повышение чувст ют следующим обра м чит ма ой тема крив нх,типи прин бавля ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И СТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Львовский государственный мский институт(56) Попов Т.АМоненко О,Б. - Сангигиена, 1977, М 9, с. 58 - 59,Изобретение отно именно к биохимическ быть использовано дл оксидаз печени в биох ских лабораториях. Цель изобретения вительности способа. Способ осуществляАнализируемую пробу мочи, полученной после нагрузки амидопирином, подкисляют раствором соляной кислоты, прибавляют водные растворы нитрита кал ия и 3-(а,/3, -дикарбоксиэтил)роданина, последний в конечной концентрации 2,5 10 - 2,5 10 М), хорошо смешивают и доводят раствор гидроксида калия до рН ".2, фотоколориметрируют при 440 нм.П р и м е р 1, Для определения 4-аминоантипирина 1 мл разведенной(1:10)мочи животных, принимавших внутрибрюшинную нагрузку амидопирина по 100 мг/кг(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ОКСИДАЗ СМЕШАННОЙ ФУНКЦИИ ПЕЧЕНИ(57) Использование: биохимия, биохимический анализ, медицина, оценка активности оксидаз печени. Сущность изобретения: анализируемую пробу мочи, полученной после нагрузки амидопирином, подкисляют раствором соляной кислоты, прибавляют нитрит калия и 3-(а,/3, -дикарбоксиэтил)роданин в конечной концентрации(2,5 10 ) -(2,5 10 ) М, смесь доводят до рН 12 и более, колориметрируют при 440 нм, Изобретение позволяет повысить чувствительность определения на 2 порядка. 3 табл. массы, подкисляют 1 мл 2 М раствора соляной кислоты, прибавляют 1 мл 0,1 О/о-ного раствора нитрита калия, 1 мл 4 10М раствора 3-(а, р, -дикарбоксизтил)роданина (конечная концентрация 10 М), хорошо смешивают и через 3 - 5 мин прибавляют около 2 мл 20 О/,-ного раствора гидроксида калия рН 12. Полученный окрашенный раствор колориметрируют на фотоколориметре КФКпри А = 440 нм в кювете толщиной слоя 10 мм, В качестве раствора сравнения используют холостой опыт,С содержание 4-аминоантипирина раО - аывают по формуле: С=Ьптическая плотность на основаниитической обработки калибровочной методов наименьших квадратов.ля определения М-ацетил-аминоарина 1 мл разведенной мочи животньимавших аналогичную нагрузку, прют 0,2 мл концентрированной солян,94+ 2,71 кислоты, нагревают на кипящей водяной бане на протяжении 15 мин и после охлаждения проводят аналогичные операции как при определении 4-аминоантипирина, Результаты определения приведены в табл, 1.П р и м е р 2. Для определения 4-аминоантипирина 1 мл разведенной (1:10) мочи животных, принимавших внутрибрюшинную нагрузку амидопирина по 100 мг/кг массы, подкисляют 1 мл 2 М раствора соляной кислоты, прибавляют 1 мл 0,1%-ного раствора нитрита калия, 1 мл 10 М раствора 3-( а, Р, -дикарбоксиэтил)роданина (конечная концентрация 2,5 10 М) и дальше поступают так, как описано в примере 1.Результаты определения приведены в табл, 2,П р и м е р 3. Определение метаболитов амидопирина в моче при максимальной концентрации цветореагентэ, Для определения 4-аминоантипирина 1 мл разведенной (1:10) мочи животных, принимавших внутрибрюшинную нагрузку амидопирина по 100 мг/кг массы, подкисляют 1 мл 2 М раствора соляной кислоты, прибавляют 1 мл 0,10/-ного раствора нитрита калия, 1 мл 10 М раствора 3-(а,3, -дикарбоксиэтил)роданинэ (конечная концентрация 2,5 10 М) и дальше поступают аналогично примеру 1. Результаты определения приведены в табл, 3, 5 Чувствительность по предлагаемомуспособу составляет 10 мкг метаболита амидопирина в 10 мкг конечного объема, что в 77 раз выше чем по прототипу. 10 Формула изобретенияСпособ определения активности оксидаз смешанной функции печени, включающий нагрузку амидопирином, отбор пробы мочи, добавление к ней цветообразующего 15 реагента и колориметрическое определениепродукта реакции реагента с метаболитами амидопирина,отл и чаю щийся тем,что, с целью повышения чувствительности способа, анализируемую пробу подкисляют со ляной кислотой, добавляют нитрит калия, вкачестве цветообразующего реагента используют 3-(а, Р, -дикарбоксизтил)роданин в конечной концентрации 2,5 10 - 2,5 10 з М, затем рН реакционной смеси доводят до 25 12 и более, а колориметрирование проводятпри 440 нм.