Способ диагностики субклинической остеодистрофии у нетелей

(51)5 А Т И О ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР САНИЕ ИЗОБР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Патология обмедуктивного крупноред В.П.Шишкова,(54) СПОСОБ ДИАГЧЕСКОЙ ОСТЕОДИ овательский ветеринарноземной зоны РСФСР Г.И.Иванов и Е.В.Юрьева на веществ у высокопрого рогатого скота,/Под - М.: Колос, 1978, с. 198, НОСТИКИ СУБКЛИНИСТРОФИИ У НЕТЕЛЕЙ Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам диагностики болезней крупного рогатого скота, связанных с нарушением минерального обмена, и может быть использовано для диагностики субклинической остеодистрофии, преимущественно у нетелей второй половины стельности,Целью изобретения является повышение точности диагностики,П р и м е р 1, Кровь берут из яремной вены в обычные пробирки. Сыворотку крови получают центрифугированием после ретракции кровяного сгустка в течение 15 мин при 3000 об/мин. В сыворотке крови определяют общую активность щелочной фосфатазы по гидролизу р-нитрофенилфосфата оптимилиризованным методом с использованием наборов фирмы "Лахема" и изоферменты щелочной фосфатазы. Разделение изоферментов проводят в пластинчатом(57) Изобретение отн а именно к способам ческой формы остеод бретения является диагностики, У живот учают сыворотки, выд фатазу, проводят изоферменты.,При и щелочной фосфатаэы дения не менее 90 Е/ болевания. При этом повышается до 1000 осится к ветеринарии, диагностики субклиниистрофии. Целью изоповышение точности ных берут кровь, полеляют щелочную фосее разделение на окаэателе активности костного происхожл судят о наличии заточность диагностики 3 табл,70/,-ном полиакриламидном геле и трисглициновой буферной системе (рН 8,3) методом электрофореэа на аппарате ПЭФА с использованием камеры АВГЭ. После окончания электрофореэа изоферменты проявляют методом одновременного азосочетания, Для этого пластины геля погружают в субстратную смесь следующего состава: 12,5 мг 2-нафтилфосфата растворяют в 14 мл бидистиллированной воды, добавляют 2 мл 0,5 М раствора азотнокислого магния и 10,5 мл 0,2 М раствора трис, затем - 12,5 мг прочного синего РР, взбалтывают до полного растворения всех ингредиентов. Раствор готовят перед употреблением,Инкубируют в течение 60 мин. После инкубации пластины геля переносят в раствор 5 )ь-ной уксусной кислоты в 70-ном этаноле на 60 мин и денситометрируют для количественного определения соотноше1720637 Таблица 1 а ния изоферментов на микрофотометре МФ - 2, Исходя иэ общей активности, соотношения изоферментов пересчитывают в единицы активности - Е/л,Электрофоретическая подвижность иэаферментов (по отношению к альбуминам) ЩФ 1 0,50-0.52; ШФ 2 0,36 - 0,38; Щфэ 0,30 - 0,32.П р и м е р 2. Определение активности щелочной фосфатазы (ЩФ) и щелочной фосфатазы костного происхождения (Щфг) в зависимости от заболевания остеодистрофией,Исследования проводят на нетелях черно-пестрой породы второй половины стель- ности клинически здоровых (группы 1 - 3) и больных остеодистрофией (группы 4-6) в эимнестойловый пеоиод.Результаты представлены в табл.1.Данные, приведенные в табл,1, подтверждают специфичность показателя активности Щфг. Так, в группах 4-6 (остеодистрофия) активность ЩФ 2 составляет 90 Е/л и выше, тогда как активность ШФ в группе 3(клинически здоровые животные) практически не отличается отсоответствующего показателя в грУппах 4-6 (остеодистрофия).П р и м е р 3, Заболеваемость остеодистрофией в зависимости от активности щелочной фосфатазы костного происхождения (ЩФг). Клинически здоровых и больных остеодистрофией нетелей обследуют, как в примере 1. В зависимости от активности ШФ 2 распределяют на 5 групп; 1 группа 5,0-30,0 5 Е/л, 2 группа - 30,0 - 60,0 Е/л, 3 группа -: 60,0 - 90,0 Е/л, 4 группа - 90,0 - 120,0 Е/л,5 группа - 120,0 Е/л и выше.Результаты представлены в табл,2.Как видно иэ табл.2, при активности 10 Щфг выше 90,0 Е/л в 100 случаевдиагностируется остеодистрофия.П р и м е р 4. В табл.3 приведены сравнительные данные выявлений субклинической остеодистрофии.15 Способ позволяет повысить точностьдиагностики субклинической остеодистрофии до 100,0 благодаря специфичности показателя активности щелочной фосфатазы костного происхождения (Щфр),20 Формула изобретения Способ диагностики субклиническойостеодистрофии у нетелей, включающий взятие крови, получение сыворотки, выделе ние щелочной фосфатазы, о т л и ч а ю щ ий с я тем, что, с целью повышения точности диагностики, проводят разделение щелочной фосфатаэы на изоферменты и при показателе активности щелочной фосфатазы 30 костного происхождения не менее 90 Е/лсудят о наличии заболевания,Заказ 906 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 Количествоживотных,гол,Известный способ диаг-.ностики Предлагаемый способ диагностики