Способ определения иммунокомпетентных клеток

(я)5 0 0 НИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ОП ВИДЕТЕЛЬСТВ АВТОРСКО е,а Изобретение о именно к иммуно предназначено для ческих и исследов быть использовано рии.Цель изобрете сти и упрощение сСпособ осущес цине, а ологии, в клинии может етеринаносится к мед огии и аллер использования ельских целях в биологии и в ия - повышенособа.вляют следующ чно имобра А В -где К - соотношение ных и теофиллин-чу тов; А - количество00 теофиллин-резистент твительных лимфоци имфоцитов в опьп ной ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР(71) Всесоюзный научный центр радиационной медицины(56) Унифицированные иммунологическиеметоды обследования больных на стационарном и амбулаторном этапах лечения, Метод, рекоменд. Киев, 1988, с. 19.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОКОМП ЕТЕ НТН ЫХ КЛ ЕТОК(57) Изобретение относится к медицинименно к иммунологии и аллергологии, и эом,В лунки круглодонного плейта вносят по 0,05 мл 0,5 ф-ного раствора хлорида хрома и инкубйруют 5 мин при комнатной температуре, после чего полностью удаляют хлорид хрома путем встряхивания плейта резким движением. В лунки вносят по 0,05 мл 0,5 ф-ной суспензии эритроцитов барана и центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин для осаждения и фиксации эритроцитов. В опытные лунки вносят по 0,05 мл теофиллина в концентрации 1 мг/мл, в контрольные по 0,05 мл 0,9 раствора натрия хлорида на фосфатном буфере (рН 7,2-7,4) и 1711078 может быть использовано в биологии и ветеринарии. Цель изобретения - повышение точности и упрощение способа. Исследование популяционного состава лимфоцитов проводят по количеству клеток, соединившихся с фиксированными в лунке плойта эритроцитами, в среде, содержащей теафиллин, влияющий на экспрессию рецепторного аппарата лимфоцитов к эритроцитам барана в зависимости от функциональных характеристик клеток, Использование заявленного способа позволяет повысить точность при трудоемкости, уменьшить расход дефицитных реактивов для проведения исследований, 1 табл. по 0,05 мл суспензии лимфоцитов в концентрации 5 1 О клеток/мл, Инкубируют 305мин при 37 С, затем помещают в холодильник на 1 ч при 4 С. После инкубации ресуспендируют неприкрепившиеся лимфоциты и удаляют надосадочную жидкость. В лунки добавляют по 0,1 мл гемолитической жидкости, содержащей 0,8 г/л хлорида аммония и 0,04 г/л этилендиаминотетраацетата (рН 7,2-7,4), на 1 мин, Переносят иэ каждой лунки по 0,1 мл содержимого в стаканчик с 6,25 мл 0,9-ного раствора натрия хлорида и подсчитывают число клеток в суспензии на проточном кондуктометрическом цитоанализаторе "Лаборскаль" ПСА-ПСЛили аналогич нам. Соотношение регул я торн ы к субпопуляций Т-лимфоцитов определяют по формуле.1711078 Формула изобретения Сравнительный анализ выявления соотношения регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов у больного Н-ва, 33 года, диагноз: хронический гепатохолеци- стит пробе; В - количество лимфоцитов в контрольной пробе.Способ был использован при проведении комплексного иммунологического исследования 170 больных, находившихся на лечении в клиниках Всесоюзного научного центра радиационной медицины, Сравнительный анализ результатов по известному и предлагаемому способам приведены в таблице.Как видно иэ таблицы,при использовании предлагаемого способа отмечена достаточная корреляция показателей при сравнении с известным способом как в области низких, нормальных, так и повышенных значений соотношения субпопуляций. Способ подтверждается следующим примером.П р и м е р, Больной НЭЗ года, диагноз: хронический гепатохолецистит, Кровь больного 0,05 мл инкубируют 5 мин при комнатной температуре, 8 опытные лунки добавляют теофиллин, а в контрольные физический раствор, Количество клеток подсчитывают в цитоанализаторе "Лаборскаль" (табл.),5 Технико-экономическая эффективностьизобретения. использование заявленного способа позволяет повысить точность при снижении трудоемкости способа, уменьшить расход дефицитных реактивов для 10 проведения исследований. Способ определения иммунокомпетен тных клеток путем выявления количестватеофиллин-чувствительных и теофиллин-нечувствительных клеток, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, субпопуляции лимфо цитов определяют по количеству клеток,присоединен:ых к фиксированным на поверхности лунки эритроцитам барана в среде, содержащей 1 мг/мл теофиллина,1711078 Продолжение таблицы Составитель Б,МануйловРедактор Е, Савина Техред М,Моргентал Корректор Н. Корол Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгоажкомитета поМосква, ЖПодписноеобретениям и открытиям при ГКНТ ССРаушская наб., 4/5