Способ прогнозирования течения интегументных форм красной волчанки

СНИХ ЕСНИХ СОЮЗ СОВЕТСОЦИАЛИСТИЧРЕСПУБЛИК 9) 111) С 01 М 33ЮМ И БРЕ У СВИДЕТЕЛ АВТОРС не, а,именноможет применядлительностиформ краснойния - йовышен огли, иенияентных овене дерма ься дл емисси пре тегуельпре кий инстиродский обрете- агаемоолчанки,е точност но-ве заики 8.8)племента. Сб,н.тр.логического научного НИИ гематологии ии, М., 1988, с. 106 овыш пред ГОСУДАРСТВЕННЬЗЙ НОМИТЕП 0 ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ(56) Система комВсесоюзн. гематоцентра Кировскогпереливания кров107 4) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯТЕГУМЕНТНЫХ ФОРМ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКИ7) Изобретение относится к медициИзобретение относится к медицине, а именно к дермато-венерологии, может применяться для определения длительности ремиссии интегументных форм красной волчанки (ИКВ)Цель изобретения - п ение точности способа за счет о еления длительности ремиссии.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу, включакщему определение в сыворотки крови антител против внутриклеточных ферментов выявляют в; сыворотке крови антитела . к нейраминидазе и при их наличии прогнозируют длительность ремиссии в ,пределах 4-9 мес, а при отсутствии - более. 9 месго способа за счет определения длительности ремиссии. Для этого в сыворотке крови, взятой до начала лечения, в иммуноферментном анализе определяют антитела к нейраминидаэе. В зависимости от полученных результатовопределяют характер дальнейшего тече-ния болезни, Положительный эффект предлагаемого изобретения заключается в том, что точность определения длительности ремиссии повышается до 90,9-92,87. по сравнению с прототипом- Е определением антител к лактатдегидрогеназе.С: Способ осуществляется следукицим образом.При поступлении у больного берут, кровь из вены натощак в количестве 5-6 мл и после 15-минутной инкубации в термостате при 3.7 С центрифугируют и отделяют образовавшуюся сыворотку. Полученную таким образом сыворотку разводят сорбентом (мясопептонным бульоном и т.д.) по предварительно установленному титру. Ставят иммуноФерментный тест (ИФА). В качествевел твердофазного носителя применяют полистироловые планшеты с 96 лунками. Пластины .сенсибилизируют коммерческим препаратом нейраиинидазы, нехолерных. вибрионов, в разведении по титру вколичестве 0,2 мл, растворенным в, дистиллированной воце с последующей инкубацией в течение 18-20 ч при комнатной температуре. После трехкратного отмывания в физиологическом растворе с твиномна высушенные плашки наносят испытуемые сыворотки (по 0,2 мл), разведенные по титру в сорбенте и выдержанные в термостате при , 37 С в течение 1 ч. Плашки помещаютов термастат при 37 С на 30 мин. После зтого плашки промывают, высушивают, наносят по 0,2 мл конъюгата и инкубируют в термостате в течение 30 мин. Конъюгатом служат сухие кроличьи антитела против иммуноглобулинов человека, меченные пероксидазой хрена, растворенные в сорбенте и в изотоническом растворе 1: 1. Индикатором является 5-аминоса- лициловая кислота с 0,05 -ной ЯО. При каждой постановке реакции ставят контроли: контроль положительной сыворотки (АГ+СВ+КТ+СБ), контроль отри цательной сыворотки (АГ+СВ+КТ+СБ), контроль субстрата (АГ+ФР+ФР+СБ), конторль конъюгата (АГ+ФР+КТ+СБ).Кроме того, для определения специфичности полученных результатов. ставили следующие контроли: плашки без нейраминидазы + конъюгат + сыворотка больного; плашки без нейраминидазы + + сыворотка больного с положительной реакцией с последующим истощением препаратом нейраминидазы + конногат,1 35 плашки без нейраминидазы + нейрамини-, даз + конъюгат. После приливания субстратной смеси контроли должны быть все отрицательными.Реакцию учитывают визуально или проводят инструментальную оценку, В лунках планшета, где прошла реакция, появляется окрашивание от светло- дотемно-коричневого. В лунках, где проводилось исследование отрицательной сыворотки, цвет субстрата светлоили темно-бежевый.1При визуальной оценке результатов ИФА бесцветный и светло-бежевый суб-страт соответствует отрицательным ре зультатам, бежевый, темно-бежевый -1 кресту (отрицательный результат), .бежевый, коричневый - 2 крестам,светло-коричневый - 3 крестам, косс ричневый и темно-коричневый - 4 крес-,55гам.2"крестовые и выше результаты счи,1 али положительньви, т.е. определяли наличие антител к неираминидазе идлительность ремиссии в пределах 49 мес.П р и м е р 1. Б-й, С-в, 30 лет, находился в дерматологической клинике с 12.03 по 23.04.87 по поводудискоидной красной волчанки, В сыворотке крови обнаружены антитела против нейраминидазы, прогноэирующиедлительность ремиссии 4-9 мес. Проведено лечение. Выписан со значительаюулучшением клинических проявлений,Прогноз подтвердился дальнейшим течением болезни, Обострение наступилочерез 6 мес после первой выписки,Пример 2. Б-й Б-н, 47 лет,находился в клинике с 20.01 по16.03.87. При поступлении в сыворотлке крови зарегистрировано отсутствивантител к нейраминидазе, что прогназировало длительность ремиссии более9 мес и наличие антител к лактатдегидрогеназе. Проведено лечение. Больной выписан с исчезновением клинических проявлений. Длительность ремиссии подтвердилась катамнестическимнаблюдением, Ремиссия болезни наблюдается более 2 лет,В настоящее время предлагаемым способом прослежена, длительность ремиссии у 25 больных ИКВ (3 женщины и 22 мужчины). Длительность заболевания от 1 года до 17 лет, возраст больных от 20 до 60 лет.Исследования обработаны статистически с применением критерия Пирсона-Х (хи-квадрат) .Из 25 больных ИКВ антитела к нейраминидазе, позволяющие определять длительность ремиссии в пределах 4- 9 мес, обнаружены у 14, при дальнейшем наблюдении длительность ремиссии подтвердилась у,13 (точность способа 92,8%), в то время, как положительные результаты по выявлению антител к лактатдегидрогеназе,(прототип) былилишь у 4 больных с длительностью ре-, миссии 4-9 мес (точность способа про" тотипа 30,8 ). Следовательно, точность определения длительности ремиссии с помощью предлагаемого способа повышается (Х = 7,6 р ( 0,01).Отрицательные результаты по выявлению антител к нейраминидазе, поэволяющие прогнозировать длительностьремиссии более 9 мес, были у 11 больнЫх. Продблжительность такой ремиссии подтвердилась у 10 больных ИКВ1698779 Составитель П.БонарцевРедактор Л,Веселовская Техред М.Дидык Корректор Л.Обручар Заказ 4391 Тираж . ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по.изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР113035, Москва, 3-35, Рауаская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101(точность способа 90,9%). Отрицательные результаты прототипа зарегистрн 4рованы.у этих больных лишь в 2 случаях (точнссть прототипа 20,0%),Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить точность при опре делении длительности ремиссии более 9 мес (Х = 7,1, р (0,01). Формула изобретения,10Способ прогнозирования течения ин тегументных форм красной волчанки путем иммунологического исследованиясыворотки и выявления антител к ферменту с последукзцим анализом, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности за счет определения длительности ремиссии, выявляют антитела к ферменту нейраминидазе и при их наличии определяют длительность ремиссии в пределах 4"9 мес, а при их отсутствии - более9 мес.