Способ выявления патологического состояния организма

5)5 С О 1 Ю 33/53 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 193/14(21) 4626 (22) 06.1 (46) 15.,1 (71) Моск ский инст рургии едователетской.)156) НауЬу В;А Н 1 е 1 аЬаиа Ре Не,е, ВаезесЕег Л.1., Ретегш 1 паг 1 оп оГ а 1 гегпаше рагЬпау ой сошр 1 ешепС 1 спег.1 сз ,.Ъу е 1 есггоп зр 1 п гезопапсе зресгго- .зсору. Аш. 3, С 1 па. РайЬо 1. 1983, ч. 79, 6, 673-677.(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ОРГАНИЗМА(57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для динамической характеристики и прогнозирования течения воспалительных заболеваний пу тем оценки активности системы комплемента. Целью изобретения является1 Ддя исследования кинетики актива-., Оф ь ции системы комплемента по классическому пути готовили изотоническийраствор вероналиединалового буфера(рН 7,4), состоящего иэ 2,875 г вее- ронала, 1500 мг мединалаи 42,500 гхлорида натрия в 1,0 мл дистиллированной воды, к полученному растворудобавляли 2,5 мл 1 М хлорида магнияи 0,75 мл 1 М хлорида кальция.Исследование кинетики актива-циикомплемента по альтернативномупути проводили с использованием100 мл О, 1 М этиленгликольтетрауксусИзобретение относится к медицинеа именно к иммунологии, и может бытиспользовано для динамической характеристики и прогнозирования течениявоспалительных заболеваний.Целью изобретения является повьппние точности, сокращение времени исншкение трудоемкостСпособ осуществля я следующимобразом.Кровь центрифугируют в режиме4000 е 5 мин, сыворотку сразу отделяют от сгустка и при необходимостихранят до использования при -70 С. и.етс ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР повышение точности способа, сокращение времени, снижение трудоемкостью. Для осуществления способа кровь цвнтрифугируют в режиме 4000 я 5 мин. Готовят реакционную смесь, включающую соответствующий буфер, исследуемую сыворотку и взвесь. эритроцитов кролика (альтернативный путь активации комплемента) или сенсибилиэирщванных эритроцитов барана (классический путь). Измерения производйт путем йериодической регистрации количества. эритроцитов, подвергающихся лиэису. в процессе активации системы комплемента с помощью лабораторного счетчика частиц "Рхсозса 1" при комнатной температуре, В соответствии с данньааи ф динамического измерения строят кривые лизиса эритроцитов, отражающие функциональные возможности системы комплемента у здоровых и больных де- тей. Положительный эффект способаЮ .подтверждается клиническим матерна"лом.1698780 Формула изобретения Составитель Б.Мануйлов Редактор Н.Снльнягина Техред: М.Дидык Корректор,:А ОбРучаРЗаказ 4391 , Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб;, д. 4/5М Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина,01 3ной кислоты и 50 мп 0,1 М хлорида магния (рН,7,4).Сенсибилизированные эритроциты .барана, представляющие собой иммунные комплексы антиген-антитело, использовали дляактивации классического пу" ти системы комплемента, эритроциты кролика - для активации альтернативного пути. Эритроциты разводили перед 10 использованием соответствующим буфербм до концентрации 10 клеток/мл. Все измерения производили с помощью лабораторного прибора для подсчета "частиц 11 Р 1 созса 1 М. 15К 1,5 мл. буфера .добавляли 300 мкл исследуемой сыворотки и 7,5 мкл суспензии эритроцитов. Измерение количЕства эритроцитов производили сразу жй после смешивания всех компонентов реакции и затем через 10 мин в тече-. нйе 30 мин. Реакция протекает при комнатной температуре.В соответствии. с данными динами.ческого измерения строили кривые кинетики лизиса эритроцитов, выражающиеся соотношением Я = Е(Т), где В число гемолитических единиц, соответ-: ствующее показаниям счетчика эритро; цитов "Рсозса 1" Т - время исследоФ30 вания. Способ подтверждается следующими гримерами.П р и м е р 1. Больной А. Диаг.нз: двусторонняя бронхопневмонЬя, федне-тяжелая форма.Кровь в количестве 50 мкл брали у детей в день исследования и центрифу-. ,гировали 5 мин при 4000 8. Для опре-: 40 деления кинетики активации системы комплемента по классическому пути к 1,5 мл веронал"мединалового буфера,содержащего ионы кальция и магния,добавляли 30 мкл исследуемой сыворотки и 7 5 мкл сенсибилиэированных эритФФроцитов барана в концентрации 10 клеток/мл. Измерение числа эритроцитовв смеси производили через каждые1 О мин в течение 30 мич при комнатной температуре с помощью лабораторного счетчика. частиц "Рсозса 1".Результаты кинетического исследо"вания системы, комплемента у больныхпредставлены графически. Отклонениекривой Ч. от норьы составляет+ 120 гем.ед а кривойА 180 гем.ед,что свидетельствует о нарушении ре"зернов иммунной системы у этих детейв связи с развитием у них тяжелыхвоспалительных заболеваний,Положительный эффект способа подтверждается данными, показывающимидостижение цели изобретения. Способ выявления патологического состояния организма путем определения активности. системы комплемента по лизису эритроцитов в исследуемой сыворотке, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности, сокращения времени, снижения трудоемкости способа при обследовании детей, готовят одно разведение исследуемой сыворотки, проводят прямой подсчет количества оставшихся нелизнрованных эритроцитов в течение 30 мин и оценивают патологическое состояние организма по отклонению полученной кинетической кривой от эталонной кривой здоровых доноров.