Способ синхронизации развития коловраток в культуре

(5)5 А 01 К 6 РЕТЕ И П АВТО тельский ини Н.Х. Идри АЦИИ РАЗВИТУРЕ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР МУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) СПОСОБ СИНХРОНИТИЯ КОЛОВРАТОК В КУЛЬ Изобретение относится к области прикладной и экспериментальной гидробиологии и водной токсикологии и может быть использовано при подготовке культур оловраток для биологического анализа качества водной среды, а также влияния различных химических веществ на водные биообъекты.Кель изобретения - повышение эффективности способа за счет увеличения продолжительности синхронного развития коловраток в культуре.Способ осуществляется следующим образом.Покоящиеся яйца коловраток ставят на выклев. Для этого покоящиеся яйца помещают в пробирки, заливают водопроводной дехлорированной водой и помещают под люминесцентную лампу. Через сутки происходит выклев, из емкостей удаляют оболочки яиц, отбирают одновозрастную молодь, помещают в емкости с культуральной средой и задают однократно кормовую(57) Изобретение относится к прикладной и экспериментальной гидробиологии и водной токсикологии и может быть использовано при анализе качества природных вод при подготовке культуры коловраток в качестве тест-объекта, Целью изобретения является повышение эффективности способа за счет увеличения продолжительности синхронного развития коловраток в культуре, После выклева молоди в среду вносят лизин в количестве 0,5 - 0,1 мг/мл. 1 табл. взвесь лизина из расчета 0,05 - 0,1 мг/мл.В последующие дни коловратки питаются (Я на убывающей концентрации в связи с вы- ю еданием корма.В течение 7 сут коловратки не размно- .жаются и остаются неполовозрелыми на од- Я ной стадии развития, что позволяет считать такую культуру синхронной, ааийП р и м е р 1. Покоящиеся яйца коловраток ставили на выклев. Для этого покоящиеся яйца вколичестве 0,05 мг(250 шт/мл) у помещали в микроемкости, заливали 2 мл водопроводной дехлорированной воды и фь ставили под люминесцентную лампу. Через Ы сутки произошел выклев. Выклюнувшихся ф одновозрастных коловраток помещали в емкости из расчета 10 экз/мл. В каждую емкость вносили лизин в количестве .0;01 мг/мл.В контроле 1 в качестве корма использовали суспензию в количестве 0,05 мг/мл (100 от веса коловраток), в контроле 2 - шроты хлореллы в том же количестве,1685331 ве 0,1 мг/мл. Результаты аналогичны примеру 2, гибель 1 особи произошла на 6-е сутки.П р и м е р 4. Аналогично примеру 1коловраток кормили лизином в количестве 0,24 мг/мл. На 4-е сутки началась гибель, на 7-е сутки погибло 20 коловраток,П р и м е р 5. Аналогично примеру 1коловраток кормили лизином в количестве 0,5 мг/мл. На 3-и сутки 60 коловраток по гибли.П р и м е р 6, Аналогично примеру 1количество лизина увеличили до 1,0 мг/мл в сутки, 100 околовраток погибли в первые сутки.15 Численность живых Состав популяции на 7-е сутки/мертвых коловраток,экэ/мл Исходйаяплотностьколовр.,экэ/мл Концентрация корма, мг/мл На 1-е сут- Неполовоки зрелыеособи, экз/мл На 3-и сутки Яйценосн ы еэкз/мл Амиктиче"с к иеэкз/мл Кол-во яиц на одну самку К 1Суспензияхлореллы 100,05 Не определяли 112/1 62 42 1,8 К 2Ш ротыхлореллы 100,05-- О/10 4/6 9/1 9/1 8/2 8/21010104/6О/10 Лизин 0,01 100,05 10 01 10 0,24 10 05 10 1,0 10 Как видно иэ таблицы, концентрации лизина свыше 0,1 мг/мл вызывали гибель культуры. Тот же эффект наблюдался при 45 концентрации 0,01 мг/мл, Лишь концентрации 0,05 - .0,1 мг/мл позволили сохранять в живом состоянии синхронизированную культуру на протяжении 7 сут (отход составлял на 7-е сутки не более 100 ), 50Указанные концентрации лизина обуславливали поддержание коловраток в неполовозрелом состоянии, тормозя процесс размножения.и не вызывая гибели.В контроле используемая в качестве 55 корма суспензия микроводорослей (К) в количестве 100 мас, , (0,05 мг/мл) обеспечила генеративное развитие коловраток, На 7-е сутки популяция состояла иэ самок амиктических, яйценосных и ювенильных особей,Наблюдение за состоянием культур проводили в течение 7 сут. (средняя продолжительность жизни коловраток - 7 - 8 сут).В опыте коловратки не размножались, оставаясь неполовозрелыми на одной стадии, на 3-и сутки погибли 2 коловратки, на 7-е сутки - 6 коловраток, т.е. 60,В контроле 1 на 1-е сутки было 112 экз. коловраток на разных стадиях развития, 1 погибла. В контроле 2 погибло 100% коловраток.П р и м е р 2. Аналогично примеру 1 коловраток кормили лизином в количестве 0,05 мг/мл, Коловратки оставались неполовозрелыми в течение 7 сут, 1 погибла.П р и м е р 3. Аналогично примеру 1 коловраток кормили лизином в количестВлияние различных видов и концентраций корма на состояние коловраток приведено в таблице. Плодовитость равнялась 1,8 яиц на одну самку, При использовании в качестве корма шротов (К 2) особи коловраток не размножались. но происходила 100 - ная гибель организмов на 7 - е сутки.Таким образом, культивирование беспозвоночных на неполноценном корме (лизине) приводит к задержке развития, сохранению численности и физиологического состояния особей на исходном уровне, что позволяет получать синхронизированную культуру коловраток,Формула изобретения Способ синхронизации развития коловраток в культуре, предусматривающий получение молоди коловраток из покоящихся яиц, отбор одновозрастной молоди, домещение ее в емкости с культуральной средой1685331 Составитель О. В. КорженкоТехред М. Моргентал Редактор В, Данко Корректор Т. Палий Заказ 3615 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж. Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул, Гагарина, 101 и ее кормление, отл ича ющий с я тем, что, с целью повышения эффективности способа за счет увеличения продолжительности синхронного развития коловраток в культуре, в качестве корма используют аминокислоту - лизин в количестве 0,05 - 0,1мг/мл, которую вносят однократно послевыклева молоди.