Способ диагностики аллергии

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 168 А 19) ъ) 0 1)5 6018 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН АВТОРСКО СВ ЛЬСТВУ эовано для выявлени аллергенов у больн заболеваниями, Цел ется повышение точн агностики, По метод определяют активн фат-дегидрогенаэы д крови с аллергеном 10 рМО/мл в течени личении активности исходного и более д гию к исследуемому атрическии медиСеврук ика аллеи, - ММ ициКИ АЛЛЕ ся к меди жет быть ГИИ поль чение 20-30 мин при 37 С, После инкубациделают мазки крови на предметных стеклаи высушивают. Затем готовят инкубационную смесь для выявления активности глюкоэо-б-фосфат-дегидрогенаэы, для чегохимический стаканчик последовательнвносят:Вода дистиллированная, мл 3,0О-глюкозо-фосфат-натриеваясоль, М,м = 358,2 (Яегча), мгР -Никотинамид адениндинуфосфат натриевая сольМ.м = 801,4 (Яегча), мг 57,50,2 М раствор трис-НС буФер,рН = 7,60,мл 1Натрия цианид,мг 1Декстран, М.м. = 500000(фенаэинметасульфат),дицине, а т быть ис- нно-значигичес кими я повышестики,ющим обра 00 о-фос 44,клеотид-яде рн ппап Г унологичерастворовв 199 среуются комодержащие у планшета воре Хенк- по 0,04 мл рин из расбацию в те 2,5 4,0 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Ленинградский педцинский институт(57) Изобретение относименно аллергологии, и Изобретение относится к меименно к аллергологии, и можепользовано для выявления причимых аллергенов у больных с аллерзаболеваниями,Целью изобретения являетсние точности и ускорение диагноСпособ осуществляют следузом,Выявление активности глюкфат-дегидрогеназы в полиморфнлейкоцитах проводят по методу Ф(1972),В ячейки планшета для иммских реакций вносят по 0,02 млаллергенов, разведенных до 10-зде на растворе Хенкса (использмерческие серии аллергенов, с10000 рйО/мл). В другую ячейквносят 0,02 мл 199 среды на растсаЗатем в эти ячейки вносятгепаринизированной крови (гепачета 10 ед/мл) и проводят инку я причинно-значимых ых с аллергическими ю изобретения явля- ости и ускорение диу Фтщап Г.Р. (1972) ость глюкозо-б-фосо и после инкубации в концентрации 100- 20 - 40 мин. При увефермента на 40% от иагностируют аллер- аллергенулти М. лт - 306 3) л 1 п 0,5 1 Бодд дигтиллиронднндя д) обсего обьемд, мл 25,0 14 д предметное гтекло с гухим нефиксиронднным мазком крови наносят 1,О. 1,5 мл приготовленной ех 1 егпрогае инкубдцион ной среды и помещают в термостдт на 20 мин при т:= 37"С. Затем стекла проглынают в дистиллированной воде, фикгируют мазок 2 3 мин н 10%-ном здбуференном формалин и повторно промывдк)т дистиллированной водой, Стекла выгушиндют Ядра клето докрац)ивдюг 3 мин 0,1%-ным раствором неитрдльного крас:ного нд 0,1 М ацетэтном буфере рН - 50 Г 1 ромывдют высушивают, микрог.копируют.Бысчитынэктт среднии цигохимический коэффициент (СЦК), условно принимая интенсивность образования гранул диформаэдна н неигрофилдх зэ слабо с)оложительную 1, положительну)о 2, резко положительную 3 тде СЦК срс.днии цитохимический коэффициент;ц количество неитрофилов с даннойстепенью интенсивности обрдэондния грацул,1, 2, 3 гтецень интенсивности обрдзондния гранул,100 количс)но цросмотренных в мазке клеток0 стриг)оге активности фермента судятцо разнице значений СЦК после инкубациис аллертеном и исходнс)и дктиннс)сти фс рмента, вырджнцой н г)роцс.н тдх цо с) тношетц 1 ю к игходнои 11 рирос г як тинцс)ст и фрл)н т;.),% Домдшняя г)ыль с.)рии 25Тц же серии 261То же, серии 236Е ыГ)д 1)с,кд)Яйцо ( кури)тс) стльнсМололо11 ыльца березыТсст контрс)льндя жидлосгьПо ддцньг) с)с)с; )едстм)сц ) нт ц)с ле)тд се)ссибилиздсотя к с.лдуюцсцг) юг)лет)сцдгс дс)мдн)неи пыли гсзлнт 257 г)есле, курицылтяйцам, что цодтнг с,.тнс) кс 1 жцыгят схдт)ттфт)кд.ционныгт) и," )" ,; с ц тццыг;и д",леогс нд)де Кт значение СЦК исходное;К) значение СЦК после инкубации крони с дллергеномДидгностически зндчимым считаетсяприрост активности фермента нэ 40% отисходного и больше,Способ подтверждается следующимипримерами,П р и м е р 1. Больная Л., 11 лет. Диагноз; астматический бронхит, атопический(сенсибилиэация к пыли), легкое течение,ннецриступный период. Сопутствующий диагноз аллергический ринит. Пищевая аллергия (сенсибилизация к группе облигат)тых аллергенов) Из днамнезэ известно, что у ребенка сзтягощенной агопической наследственно- )Остью первые проявления пищевой аллергии тдблюдались с 2-месячного возраста в виде себоррейной экземы, которая в дальнеишем трансформировалась в нейродермит )Эбострегтие кожных проявлений отмечалогь при употреблении в пищу цитрусовых.нтоколада, фруктовых соков, яиц, рыбы,С 7 лет отмечалась заложен ность носа спериодическими приступами многократного чихания. С 9 лет появились явления бронхидльной обструкции впервые после работы в школьной библиотеке, которые купировались эуфиллином солутдном, С 11 лет типичные приступы затрудненного дыхания.Проведено обследование согласноцредлдгдемому способу.Получены следук)щие результаты: исходная активность глюкозо-фосфат-дег идрогенаэы - СЦК - 2,14.тс) Активность фермента после стимуляцииэллерт енами; СЦК % прироста активности3,58 67,22,64 23,42,81 31,33,32 55,13,2 1 55,02,31 7,92,37 10,72.29 7.0П р и м е р 2. Больная Л, 7 лет. Диагноз. оронхиэльнэя астма тиг)ичндя, атопическая )генсибилиздция к домашней пыли). среднеяжелое течение. Внеприступный период,Из анамнеза известно, что у ребенка с зтягощенной аоцической наследственноэлции с эллергенами домашней пыли ОгмечЛЛСЯ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЗффЕК 1,Было проведено обследованис ПОЛ; лны следующие результаты. исходная лкп 1 лность глюкозо-фосфат-дегидрогенлэыСЦК = 1,21, активность фермента после стимуляции аллергенами: О прироста активности87,672,724,822.3 СЦК 2,27 2,09 1,51 1.48 Домашняя пыль серии 257То же, серии 261То же, серии 236Тест-контрольная жидкОсть МятликТимофеевкаОвсяницаБерезаСоставитель Л АлександроваРедактор А, Маковская Техред М.Моргентал Корректор С. Черни Заказ 3503 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент". г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 стью впервые явления брон иэльнои Об струкции появились в возраст 1 года на фоне ОРВИ. Типичные приступы удушья стали возникать с 1,5 лет на фоне полного благополучия дома во время игры г. игрушками, часто в ночное время, Приступы возникают с предвестников в виде зуда слизистой носа. чихания После проведения двух курсов специфическои гипосенсибили По данным обследования выявлена сснсибилизация к следующим аллергенэм домашней пыли серии 257 и домашнеи пыли Всерии 261, что подтверждено кожными снэрификационными пробами с данными эллергенами.П р и м е р 3, Больной Я, 13 лет, Диагноз: поллиноз, риноконьюнктивальный синдром. Из анамнеза известно, что у мальчика По данным обследования выявлена сенсибилизация к аллергенам пыльцы мятлика, тимофеевки, овсяницы; не выявлена сенсибилизация к аллергену пыльцы березы, что подтверждено кожными скарификационными пробами с данными аллергенамиФормула изобретения Способ диагностики аллергии по изменению цитохимических характеристик с 9 лет в летние месяцы, начиная с июня,; отмечаются риниты, коньюнктивиты, В лесу, за городом - ухудшение; на одуванчикотмечался отек КвинкеПроведено обследование согласно способу,Получены следующие результаты, исходная активность глюкозо-фосфл г-до 25гидрогеназы - СЦК = 1,16, после стимуляцииаллергенами пыльцы;СЦК % прироста активности2,46 1122,60 1242,91 150,81,49 28,4 нейтрофилов крови в присутствии аллерге на, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности и ускорения диагностики, определяют активность глюкозо- фосфат-дегидрогенаэы до и после инкубации крови с аллергеном, и при увели О чении активности фермента на 40 от исходного и более диагностируют аллергию к исследуемому аллергену