Способ выявления микроциркуляторного русла и лимфоидной ткани кишечника

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК А 1 61 В 10/00 БРЕТЕНИЯ Е В ИДЕТЕ ОМ К АВТ еенный медицинвертных, А,С. Кои Ю.В. Мякишева ическая техни итературы, 195(54) СПОСОБ ВЬЯВЛЕНИЯ МИКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА И ЛИМФОИДНОЙ ТКАНИ КИШЕЧНИКА(57) Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к морфологии, и может быть использовано для диагностики патологии желудочно-кишечного тракта у лабораторных животных в эксперименте и в ветеринарии. Цель- повышение информативности и наглядности за счет синтомической оценки и экономия сырьевой базы за счет совместной реализации способов. Через брюшную аорту проводят промывку сосудов кишечника раствором глюкозы с гепарином с предварительной перевязкой воротной вены и перерезкой ее дистальнее Изобретентальной медици может бытьки патологии жл.абораторныхветеринарии.В советскнет описанияляющих на о(препарате) по е относится к эксперименне, а именно к морфологии, спользовано для диагностилудочно-кишечного тракта у животных в эксперименте и в оциированнуюс ткань и их взаивышение инфорпутем синтетичеырьевой базы за ии способов, что осуды кишечника ркотизированношную аорту при ой и зарубежаналогичныхдном биологиследовательн и литератур тодик, позв ском объект выявлять ми ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР(71) Пермский государсский институт.Ы 216800 лигатуры. Пережимают брюшную аорту и под визуальным контролем заполняют сосуды кишечника 0,15-ным раствором аэотнокислотного серебра. Наливку производят при одновременном воздействии на кишечник ультразвука с частотой колебаний 830 кГц и помещении органа в физиологический раствор при 37 С в течение всей наливки. Инъекцию прекращают после появления раствора азотнокислого серебра в приносящих лимфатических сосудах брыжеечных лимфоуэлов, Вводят цветную массу соответствующей концентрации в зависимости от конкретных задач исследования. Кишечник отсекают. После извлечения кишечника иэ брюшной полости серебро восстанавливают на свету или с помощью кварцевой лампы. Кишечник обрабатывают 1,5-ным раствором хлористого натрия, проМывают, просветляют 1-ным раствором соляной кислоты в течение 1- 2 сут окрашивают гематоксилином Гарриса, затем повторно обрабатывают 0,1-ным раствором соляной кислоты в течение 1-2 ч для дифференцировки лимфоидной ткани (лимфоидных узелков). Анализ результатов проводят с помощью микроскопа. роциркуляторное русло, асс кишечником лимфоидную моотношение.Цель изобретения - по мативности и наглядности ской оценки и экономии с счет совместной реалиэац достигается введением в с азотнокислого серебра на му животному через брю5 10 15 20 30 35 40 4550 55 одновременном воздействии на кишечник ультразвука в теплом физрастворе и последующей обработке препаратов по модифицированому методу Гельмана: кишечник отсекают, промывают, а затем просветляют 1 -ным раствором соляной кислоты в течение 1 - 2 суток, окрашивают гематоксилином Гарриса не более 12 ч, затем дифференцируют в 0,1 о -ном растворе соляной кислоты в течение 1-2 ч.Способ осуществляют следующим образом,Посла срединной лапартомии у животного через брюшную аорту проводят промывку сосудов кишечника раствором глюкозы с гепарином с предварительной перевязкой воротной вены и перевязкой ее дистальнее лигатуры. Затем пережимают брюшную аорту и под визуальным контролем заполняют сосуды кишечника 0,150 - ным раствором азотнокислого серебра. Для снятия спазма сосудов, предохранения их разрыва, ускорения заполнения интерстиция и лимфатических сосудов наливку производят при одновременном воздействии на ки шечник ультразвука с частотой колебаний 830 кГц и помещении органа в теплый физраствор (37 С). Ультразвуком воздействуют в течение всей наливки. Инъекцию прекращают после появления раствора азотнокислого серебра в приносящих лимфатических сосудах брыжеечных пимфоузлов, С целью констрастирования того или иного звена кровеносного микроциркуляторного русла вводится цветная масса соответствующей концентрации в зависимости от конкретных задач исследования. Кишечник отсекают. После извлечения кишечника из брюшной полости серебро восстанавливают на свету или с помощью кварцевой лампы. Кишечник обрабатывают 1,5-ным раствором хлористого натрия, промывают, просветляют 1 ным раствором соляной кислоты в течение 1 - 2 суток, окрашивают гематоксилином Гарриса, затем повторно обрабатывают 0,1 о -ным раствором соляной кислоты е течение 1 - 2 ч для дифференцировки лимфоидной ткани (лимфоидных узелков), Анализ результатов проводят с помощью микроскопа,П р и м е р . Под эфирным наркозом у крысы проводят срединную лапаротомию, препарируют брюшную аорту, В область бифуркации аорты вводят иглу с пластиковым катетером и фиксируют ее с помощью лигатуры, Выделяют структуры ворот печени, накладывают зажим на воротную вену, ниже зажима пересекают ее. Промывают сосуды 5-ным раствором глюкозы (37 С) с гепарином (5000 ЕД на 0,5 мл глюкозы) через катетер в брюшной аорте. Пережимают брошную аорту ниже диафрагмы, Крысу помещают в чашку с теплым физиологическим раствором (37 С) и воздействуют на кишечник ультразвуком с помощью аппарата УТП - 1 е непрерывном режиме с частотой колебаний 830 гКц, Через тот же катетер заполняют сосудистое русло 0,15-ным раствором азотнокислого серебра, Затем с целью контрастирования того или иного звена кровеносного микроциркуляторного русла вводят цветную массу соответствующей концентрации в зависимости от конкретных задач исследования, Извлекают органы желудочно-кишечного тракта из брюшной полости, промывают их проточной водой. С помощью солнечного луча или кварцевой лампы восстанавливают серебро в сосудах в течение 5 мин. Заполняют кишечник водой и исследуют сосудистое русло серозной и мышечной оболочек под бинокулярной лупой. Кишечник разрезают по линии пэикрепления брыжейки, отделяют брыжеечные лимфоузлы, помещают кишечник на 1 ч в 1,5-ный раствор хлористого натрия, кратковременно промывают, а затем на 24 ч в 1 -ный раствор соляной кислоты, Промывают препараты в проточной воде 3 ч, затем обрабатывают гематоксилином Гарриса, После сильного прокрашивания помещают препараты с целью дифференцировки лимфоидной ткани (лимфоидных узелков) на 1 ч в 0,1 -ную соляную кислоту, Вновь исследуют препараты, но уже со стороны слизистой оболочки кишечника под бинокулярной лупой с целью изучения одиночных и групповых фолликулов и их взаимоотношений с сосудистым руслом, Расслаивают стенку кишечника, послойно изучают те же структуры, а также микроциркуляторное русло лимфоидных фолликулов. Одновременно забирают часть кусочков кишечника на гистологическое исследование. Для консервации используют раствор Кайзерлинга.Результаты окраски: все звенья микроциркупяторного русла и лимфоидная ткань кишечника выявляются одновременно. Звенья сосудистого русла хорошо диференцируются, лимфоидные узелки четко контурируют на фоне неокрашенной окружающей ткани, всегда видны взаимоотношения микроциркуляторного русла с лимфоидной тканью кишечника.Положительный эффект состоит в повышении информативности способа, когда все звенья микроциркуляторного русла и лимфоидная ткань кишечника выявляются одновременно. Повышается достоверность результатов эа счет суправитально инъекЗаказ 3252 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород,.ул.Гагарина, 101 ции сосудов, дифференцирования звеньев сосудистого русла и четкого контурирования лимфоидных узелков на фоне неокрашенной окружающей ткани, Увеличивается наглядность, когда возникает воэможность рассмотреть структуру микроциркуляторного русла и его взаимосвязи с лимфоидной тканью кишечника. Одновременно сокращается вдвое число лабораторных животных и время исследований за счет использования одного и того же препарата (а не двух различных для одновременного выявления микроциркуляторного русла и лимфоидной ткани; кишечника,Формула изобретения Способ выявления микроциркуляторного русла и.лимфоидной ткани кишечника путем инъекции его сосудов раствором. азотнокислого серебра и выявлением лимфоидной ткани по методу Гельмана, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения информативности и наглядности путем син тетической оценки и экономии сырьевой базы за счет совместной реализации способов, наливку сосудов кишечника азотнокислым серебром производят через брюшную аортуи ч 1 го, одновременно воз действуют на кишечник, помещенный в теплый физиологический раствор, ультразвуком, затем кишечник отсекают, промывают, просветляют 1-ным раствором соляной кислоты в течение 1-2 суток, окрашивают 15 гематоксилином Гарриса не более 12 ч, затем дифференцируют лимфоидную ткань путем повторной обработки 0,1 -ным раствором соляной кислоты в течение 1-2 ч