Способ диагностики ретинопатии

% %щ КОМ ИДЕТЕЛ ЬСТВУ В следова им. Гел епова, Л ербато Т, Ф. Ш льскии гольца К Дуд а,И,В. евченкоо ССС ится к медицине, а и, и предназначено ии сетчатки у боль 3 О Ы 00 м.я является выше тся следующим о ости проводят с поТканеспецифические реакции пассивной А). Перед постановкость инактивируют н при 56 С) и затем и эритроцитами (18 РПГА проводяпо общепринятойиспользуют в видлизированных эрмл на 0,05 мл кажемой слезной жид ре Такачиностикум сенсибиеме 0,025исследу:16,т в микроимитат методике, диа1%-ной взвеси троцитов в обь дого раэведени кости, начиная ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Авторское свидетельстМ 1573420, 1989,(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕТИНОПАТИИ Изобретение относ именно к офтальмолог для диагностики патоло ных сахарным диабето Целью иэобретени ние точности способа,Способ осуществля разом,Забор слезной жид мощью меланжера. антитела определяют в гемагглютинации (РПГ кой РПГА слезную жид в водяной бане (30 ми адсорбируют бараньим(57) Изобретение относится к медицине, а .именно к офтальмологии, У больных сахарным диабетом иэ коньюктивы глаза осуществляют забор слезной жидкости, выявляют в ней уровень антител в реакции пассивной гемагглютинации к Я-антигену. При уровне антител 1:32-1:64 диагностируют доклиническую стадию ретинопатии, а при увеличении титров 1:128 и выше или снижении титров 1:16 и ниже - диагностируют диабетическую ретинопатию, По сравнению с известным способом точность увеличивается на 1,3; и появляется возможность выявления развития клинической формы диабетической ретинопатии,В качестве сенситина используют 5-антиген (очищенную от примесей водорастворимую фракцию наружных сегментов палочек (НСП) сетчатки, полученную иэ глаз крупного рогатого скота). НСП выделяют иэ сетчатки и очищают от примесей путем нескольких исследовательных центрифугирований в растворах сахарозы, содержащих 0,1 М КС и буфер (0,05 М - трис НС 1, рН = 7,4), Затем НСП подвергают осмотическому шоку в 10-кратном объеме дистиллированной воды и центрифугируют при 100000 9, надосадочную жидкость концентрируют диализом против 50%-ного раствора полиэтиленгликоля (м,в. 15000). Полученный раствор, содержащий водорастворимую фракцию белков НСП (1 мг/мл) - Я-антиген, используют для сенсибилизации эригроцитов, В качестве носителя антигена исполь- зуют 10 оь бараньи эритроциты, стабилизированные ацетальдегидом (в течение 20 сут, и танизированные в течение 15 мин при10 20 30 40 45 50 37 С, которые сенсибилизируют Я-антигеном в дозе 68 мкг/мл в течение 60 мин (рН среды 6,4, температура - 45 - 48 С). Сенсибилиэированные эритроциты консервирует 0,3;-ным раствором формалина, Срок хранения диагностикума - до 2-х лет, Обнаружение у больных сахарным диабетом беэ клинических признаков диабетической ретинопатии, Я-антител в слезной жидкости расценивается как показатель субклинических изменений в сетчатке, диагностируют доклиническую стадию диабетической ретинопатии (ДР). При высоких титрах антител (1:128 и выше) прогнозируют развитие ДР. При титрах 1:64 и ниже, в том числе при отрицательных результатах, исследование повторяют в динамике через 4 мес. При стабильном поддержании титров 1:32 - 1:64 прогнозируют сохранение доклинической стадии. При подьеме титров до 1;128 и выше или падении до 1:16 и ниже прогнозируют прогрессирование ДР. Стабильно отрицательные результаты в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) расценивают как показатель интактности сетчатки.П р и м е р 1, Больная С 41 год, Диагноз: сахарный диабет, инсулинзависимый, Длительность диабета 13 лет, При первичном обследовании клинически выраженных признаков патологии сетчатки при офтальмоскопии глазного дна не выявлено; при иммунологическом обследовании обнаружены высокие титры Я-антител в слезной жидкости обоих глаз (1;256), что дало основание для прогноза развития ДР, При наблюдении в динамике в течение 2 лет в обоих глазах отмечалось стабильное поддержание высокого уровня Я-антител (1;128, 1:256).При офтальмоскопии глазного дна в обоих глазах отмечались микроневриэмы; геморрагии точечные, в правом глазу - пятнистые, в ОЯ - мягкий экссудат.Таким образом, обнаружение высоких титров Я-антител в слезной жидкости предшествовало развитию клинически явной патологии сетчатки и явилось ранним прогностическим признаком ДР,П р и м е р 2. Больной П., 13 лет. Диагноз: сахарный диабет, инсулинэависимый, средней степени. Длительность диабета 4 года. Клинико-лабораторные обследования в динамике проводились в течение 2,5 лет, с интервалами в 6, 7 и 8 мес. На протяжении всего периода наблюдения клинических признаков ДР не выявлено. Первичное иммунологическое обследование выявило Я-антитела в слезной жидкости обоих глаз (в правом титр 1;64, в левом - 1;32), что дало основание предполЬжить субклиническое вовлечение сетчатки в патологический процесс. При диспансерном наблюдении в динамике титры Я-антител стабильно поддерживались на уровне 1:32 - 1:64 в обоих галаэах, данные ЭФИ без изменений. Таким образом длительное поддержание умеренных титров Я-антител явилось прогностическим признаком сохранностисетчатки при СД. П р и м е р 3, Больная С 10 лет. Диагноз; сахарный диабет, длительность диабета 2 г. При первичном обследовании изменений на глазном дне не выявлено, в слезной жидкости обнаружены Я-антитела в умеренных титрах (1;64), что позволило предположить субклиническое вовлечение сетчатки в патологический процесс, уровень Я-антител в слезной жидкости правого глаза снизился до 1:16, в левом - антитела не обнаружены.Падение титров Я-антител с умеренных до минимальных позволило диагностировать состояние Я-зависимого иммунодефицита и прогнозировать развитие ДР, При контрольном обследовании через 3,5 мес. Я-антитела в слезной жидкости обоих глаз не обнаруживались, при офтальмоскопии глазного дна отмечалось умеренное расширение и извитость вен, диагностирована диабетическая ангиопатия,Таким образом, падение первоначальноумеренных титров Я-антител в слезной жидкости предшествовало развитию клинически явной патологии сетчатки и явилось ранним прогностическим признаком ДР.При стабильно отрицательных показателях или при длительном поддержании титров на уровне 1:32 - 1:64 клинически явная ДР не развивалось (Р0,001), Переход из доклинической стадии ДР в клиническую и прогрессирование ДР были сопряжены с выраженным накоплением Я-антител (титры 1:128 - 1;1024) или падением первоначально умеренных титров до минимальных(практически отрицательных).Результаты иммунологического обследования, свидетельствующие о благоприятном прогнозе, при обнаружении умеренных титров Я-антител и о признаках прогрессирования ДР при уровнях, характеризующих аутоаллергические реакции (1;128 - 1;1024) или состояние иммунодефицита (падение титров до минимальных) были подтверждены также сравнительным анализом покаэателей электрофизиологического исследования (ЗФИ) в группах больных с различными уровнями Я-антител в слезной жидкости. Преимущество предлагаемого способазаключается в простоте и доступности его1679381 95),Составитель В,ЛитовченкоТехред М,Моргентал Корректор М,Шароши Редактор А.Шандор Заказ 3210 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 проведения в широкой практике без сложного оснащения и неинвазивности исследования больных диабетом, Эти преимущества позволяют применять предлагаемый экспресс-метод при диспансерном обсле довании больных диабетом,По сравнению с прототипом предлагаемый способ значительно (в 2-2,5 раза) сокращает трудозатраты на одного больного и повышает пропускную способность при об следовании больных, возрастает точность диагностики (по прототипу точность составляет 93,3 а по предлагаемому способу -Формула изобретения Способ диагностики ретинопатии у больных диабетом путем офтальмологического исследования, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, осуществляют забор слезной жидкости, определяют в ней содержание антител к Я-антигену сетчатки в реакции пассивной гемагглютинации и при титрами 1:32 - 1.64 диагностируют субклиническую стадию диабетической ретинопатии, а при снижении титров 1;16 и ниже или их увеличении до 1:128 и выше диагностируют диабетическую ретинопатию,