Способ диагностики степени тяжести вирусного гепатита в

(54) СПОСОБ ДИГНОСТИКИ СТЕПЕНИ ТЯЖЕЕ СТИ В И РУС НОГО ГЕПАТИТА В Изобретение относится к медицине, аменно к иммунодиагностике вирусного гепатита.Цель изобретения - ранняя диагностика степени тяжести вирусного гепатита В.Способ осуществляют следующим образом. Из вены больного берут кровь(3 -5 мл), отделяют сыворотку и определяют в ней титр гомореактантов и титр й-белков.Титрование гомореактантов проводят в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), используя резус-положительные эритроциты человека 0(1) группы, сенсибилизированные Г(ав2-фрагментами антирезусного иммуноглобулина человека. Резус-положительные эритроциты человека О(1) группы отмывают три раза изотоническим раствором хлорида натрия и получают 4(-ную суспензию эритроцитов. Полученную суспенэию инкубируют с Цав2-фрагментом антирезусного иммуноглобулина человека (2 мг/мл) в течение 1 ч при комнатГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТГ 10 ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИ11 РИ ГКНТ СССР(57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике вирусного гепатита. Цель - ранняя диагностика степени тяжести вирусного гепатита В. Способ заключается в том, что в сыворотке крови больного определяют титр гомореактантов и титр й-белков и при титре гомореактантов 1:16 - 1:128 и титре В-белков 1:6400 - 1:12800 диагностируют легкую форму заболевания, при титре гомореактантов 1:256 - 1: 512 и титре й-белков 1:25600 - среднетяжелую форму, а при титре гомореактантов 1:1024 - 1;8192 и титре В-белков 1:51200 - 1:102400 - тяжелую форму вирусного гепатита В, Способ позволяет в более ранние сроки диагностировать заболевание 1 табл,нои температуре. После инкубации эритроциты четырехкратно отмывают изотоническим раствором хлорида натрия, готовят 4-ную суспензию и используют в реакции. Сыворотки крови больных инактивируют при 56 С в течение 30 мин и адсорбируют эритроцитами человека (резус-положител ьными 0(1) группы). Затем исследуемые сыворотки разводят 1 0 ь -ной нормальной кроличьей сывороткой в изотоническом растворе хлорида натрия посредством двух- кратных серийных разведений. Нормальную кроличью сыворотку перед использованием также инактивируют при 56 С в течение 30 мин и адсорбируют эритроцитами человека. 8 каждую лунку с разведениями исследуемой сыворотки добавляют 0,025 мл суспенэии эритроцитов человека, сенсибилизированных Г(ав )2-фрагментом антирезусного иммуноглобулина человека, тщательно перемешивают и45 50 55 ост н 1 ляют на 18 ч при 4"С, Реакцию учитыРаю 1 Визуапьно,Титр В-белков в сыворотке крови определяют по ингибированию реакции гемагглютинации между резус-положительными эритроцитами человека 0(1) группы и анти-В сывороткой, полученной иммунизацией кроликов й-белками человека (4). Резус-положительные эритроциты человека 0(1) группы отмывают три раза иэотоническим раствором хлорида натрия и получают 4- ную суспензию эритроцитов. В лунку агглютинационной доски вносят по 0,1 мл изотонического раствора хлорида натрия, затем в 1-ю лунку добавляют 0,1 мл сыворотки больного (в разведении 1:50) и готовят серию двухкратных разведений, В каждую лунку добавляют 0,1 мл анти-В сыворотки в разведении, превышающем рабочее в 2 раза, В каждую лунку добавляют 0,025 мл 4 оь-ной суспензии эритроцитов человека. тщательно перемешивают и оставляют на 18 ч при 4 С. Реакцию учитывают визуально. Последнее разведение сыворотки больного, которое еще дает ингибирующий эффект, принимают за титр В-белков.П р и м е р 1. Больная Л. поступила в гематологическое отделение на 6-й день болезни с жалобами на общую слабость, недомогание. Обьективно: состояние удовлетворительное, легкая желтушность кожи и склер, печень на 2 сл ниже края реберной дуги, мягкая, при пальпации чувствительна, Со стороны других органов патологии не в- явлено. Билирубин общий 79,2 мкмоль/л (прямой 72,0; непрямой 7,2); АлАТ 5,5 ммоль/(ч.л.); тимоловая проба 5 ед. протромбиновый индекс 85, Обнаружен НВЯАц, Длительность желтухи 11 дн,Диагноз; Вирусный гепатит В(НВЯАц+), легкая форма. Титр гомореактантов в сыворотке крови 1:64, титр В-белков 1:12800.Изменения у данной больной значений иммунохимических показателей соответствуют таковым при легкой форме заболевания.П р и м е р 2. Больной А., 41 год. В анамнезе - протезирование зубов, Пред- желтушный период 10 дн, Предъявлял жалобы на тошноту, отсутствие аппетита, боли в животе, кожный зуд, сонливость. Обьективно: кожа и склеры интенсивно желтушны.Печень на 3 см ниже края реберной дуги.мягкой консистенции, селезенка не увеличена. В крови: лейкоциты 4,4 х 10 /л; СОЭ9 3 мм/ч; билирубин 316,4 мкмоль/л (прямой 248,5; непрямой 67,9): АлАТ 5,8 ммоль/(ч.л,); тимоловая проба 18 ед; протромбиновый индекс 57;, Длительность желтухи 56 дн,5 10 15 20 25 30 35 40 Диагноз: вирусный гепатит В(НВЯА 9+), тяжелая форма. Титр гомореактантов у больного 1:1024, титр В-белков 1;52100, что соответствует изменениям, характерным для тяжелой формы вирусного гепатита В.Результаты обследования 79 больных острым вирусным гепатитом представлены в таблице.Как видно иэ приведенных данных, титры гомореактантов и титры В-белков находятся в прямой зависимости от степени тяжести вирусного гепатита В и достоверно отличаются при легкой, среднетяжелой и тяжелой форме заболевания (р0,01 - 0;001).Уровень гомореактантов и В-белков при различных формах тяжести вирусного гепатита В показан в таблице.Предлагаемый способ позволяет диагностировать степень тяжести вирусного гепатита В уже на 2 - 3-й день желтушного периода, когда еще не происходит разрушение лизосом клеток печени и не наблюдается существенного увеличения активности тканевых ферментов в сыворотке крови, в то время как нарушения метаболизма гепатоцитов в этот период сопровождаются повышением в сыворотке крови уровня фрагментов клеточных рецепторов (В-белков) и их комплексов с иммуноглобулинами - гомореактантов.Предлагаемый способ может быть использован в практической работе инфекционных и гематологических отделений. Правильная и своевременная диагностика степени тяжести вирусного гепатита В позволит выбрать адекватную лечебную тактику, что сократит пребывание больного в стационаре и предотвратит летальный исход. Формула изобретения Способ диагностики степени тяжести вирусного гепатита В, включающий исследование сыворотки крови, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ранней диагностики, в сыворотке крови определяют титр гомореактантов и титр В-белков и при титре гомореактантов 1:16 - 1 128 и титре В-белков 1;6400 - 1:12800 диагностируют легкую форму вирусного гепатита В, при титре гемореактантов 1:256 - 1:512 и титре В-белков 1;25600 - средне-. тяжелую форму, а при титре гомореактантов 1;1024 - 1;8192 и при титре В-белков 1:51200 - 1:102400 - тяжелую форму.1672367 Составитель И,БашкаевТехред М,Моргентал Корректор В.Гирняк Редактор А,Козориз Производственно-издательский комбинат "Патент". г, Ужгород, ул,Гагарина 101 Заказ 2836 Тираж 391 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035. Москва, Ж, Раушская наб 4/5