Способ получения биомассы

(51)5 С 12 К 1 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ПЮТ СССР(71) Институт микробиологии и вирусологии АН КазССР(56) Авторское свидетельство СССРВ 732387, кл. С 12 К 1/16, 1978,Авторское свидетельство СССРУ 1317704, кл. С 12 Б 1/16, 1986.Березина Г.О. Пентоэосбраживающиемолочнокислые бактерии и их роль вповьппении продуктивности кормовыхдрожжей. Автореф. дис, на соиск,учен. степени канд, биологическихнаук. Алма-Ата, 1973. Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в гидролизно-дрожжевой промышленностй.Цель изобретения - повьппение выхода биомассы,Способ осуществляют следующим образом.Монокультуры дрожжей гсЬоврогоп сцйапеиш 13 (ЦМПБ-У) и молочно- кислых бактерий 1.асоЬасйегдап репСоасеНсцш В/б/-23 (ЦМПБ-В) выращивают в оптимальных для них условиях, Гидролизную среду инкубируют этими микроорганизмами и осуществляюткультивирование в полунепрерывных условиях при регулярном по мере ис". черпания источника углерода удзле 2(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ (5 Изобретение относится к биотехноло, ли и представляет собой способ получения биомассы на гидролизных средах. Цель изобретения - повышение выхода биомассы. Биомассу получают путем культивирования на пентозных, гексоэных и смешанных средах консорциума дрожжей ТгсЬоэрогоп спапецш РШМ Уи бактерий 1 асоЪасетхцш репгоасе 1 дспш ЦМПМ В, полученного путем взаимной адаптации микроорганизмов к продуцируемым метаболитам с последующей автоселекцией смешанной симбиотической культуры в непрерывных условиях культивирования, 3 табл. 4нии части отработанной среды и замене ее свежей питательной средой. Культивирование проводят до тех пор, пска не устанавливается устойчивое соотношение культур. Этот прием позволяет провести адаптацию микроорганизмов друг к другу путем повьппения эффективности взаимного использования метаболитов и частично осуществить автоселекцию адаптированных вариантов, Смешанную симбиотическую культуру помещают в условия непрерывного культивирования в режиме рН-стата, проводят автоселекцию симбиотической популяции в полунепрерывных условиях культивирования до получения устойчивого и продуктивногоконсорциума, который затем используют для получения биомассы на гидролизных средах.П р и м е р 1, Пентозный гидролиэат, содержащий 0,7 редуцирующихвеществ (РВ), инокулируют дрожжамиТгдсЬозрогоп сцтапецш 13 и гетероферментативными пентоэосбраживающими молочнокислыми бактериями Ьас 1;оЪасГегпцп репоасеГ 1 сцш В/б/"23 вколичестве 10 мл дрожжевой суспензии при концентрации 28 10" кл/мли 20 мл бактериальной суспензии2 10 кл/мл. Инкубацию осуществляютв течение 16 ч при 30 С, рН 4,5 иаэрации на качалке с 160 об/мин дополной ассимиляции сахара и органических кислот, после чего 80 отработанной среды удаляют, заменяютсвежей питательной средой и продолжают культивирование. Ассоциацию воспроизводят в описанных условияхежедневно в течение 16 сут, Параллельно ведут наблюдения за изменениями концентрации биомассы, кислотности; рН среды, утилизацией сахара иорганических кислот, количествомклеток дрожжей и бактерий и их соотношением, Уже через 5 сут устанавливается равновесие в соотношениикультур в смешанной популяции, да. - ющее максимальное накопление и выход биомассы. С целью. закреплениясимбиотического взаимодействия дрожжей и бактерий смешанную популяциюподдерживают в тех же условиях ещев течение 11 сут. Затем полученнуюсимбиотическую популяцию культивируют В протоке В режиме рН с тата с 40целью автоселекции уже сложившейся ассоциации в условиях культивирования, оптимальных для дрожжей. В смешанной культуре не происходит вымывания молочнокислых бактерий и оптимальное соотношение дрожжевых ибактериальных клеток остается беэ . изменения при длительном сроке культивирования, т.е. получен устойчивый консорциум. Полученный консорциум выращивают на пентозной гидролизной50 среде, содержащей 0,7 Ж РВ,Результаты культивирования отдельных и смешанных культур представлены в табл. 1.Таким образом, получен устойчивый и продуктивный консорциум дрожжей и и молочнокислых бактерий, способныйс максимальной эффективностью перерабатывать пентозные гидролиэаты.П р и м е р 2, Способ осуществля",ют согласно примеру 1, но используют гексоэный гидролизат (0,7 РВ).Результаты культивирования представлены в табл. 2,Результаты табл. 2 аналогичны результатам, приведенным в табл, 1,Однако показатели накопления биомас.сы и выход ее от использованных РВнесколько вьппе данных, приведенныхв примере 1, В этих условиях получена также устойчивая, продуктивная,симбиотическая ассоциация дрожжейи бактерий, способных с максимальнойэффективностью перерабатьвать гексозный гидролизат.П р и м е р 3. Способ осуществляют согласно примеру 1, но используют смешанный гексозно-пентозный гидролизат (0,7 РВ) .Результаты культивирования приведены в табл. 3.Из данных табл. 3 видно, что насмешанном гидролиэате,продуктивностьсмешанной культуры также вьппе, чему монокультур дрожжей, но ниже показателей, приведенных в примерах 1 и2, Получена симбиотическая, продуктивная ассоциация дрожжей и бактерий, способная с высокой эффективностью перерабатывать и смешанный гидролизат.Таким образом, предлагаемый способ позволяет увеличить выход биомассы с 70-72 по известному способу до 94-117%. Формула нз обретенияСпособ получения биомассы, предусматривающий культивирование смешанных культур микроорганизмов на гидролизных средах, о т л и ч а ю щ и й - с я тем, что, с целью повьппения выхода биомассы, в качестве смешанной культуры используют консорциум дрожжей ТгхсЬозрогоп сцйапецш ЦИПИ Уи бактерий ЬасйоЬасгегцш репСоасе 1- сцш ЦМПМ В, полученный путем взаимной адаптации микроорганизмов к продуцируемым метаболитам с последующей автоселекцией смешанной симбиотической культуры в непрерывных условиях культивирования.1585326 Т а б л и ц а 1 Адаптированные культуры Показатели Исходные культуры В/6/-23 13 В/6/ 13+8/6/,28 О,75,4 Таблица 2 Адаптированные культуры казател Исходные культуры 3 В/6/ 13+В/6/ 13 В/б/ 13+В/ СБ, г/л 5 0,32 6,0,32,3 4 88 6,0 4,7 Таблиц Исходные культуры в/ Показатели Адаптированные культуры. Шевкун Тираа 494 Подписноемитета.по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС сква, Ж, Раущская наб., д. 4/5 Заказ 2304 ВНИИПИ Государственного 113035, Производственно-издательский комбинат "Патент", г.узгород, ул. Гагарина,101 Абсолютно сухаябиомасса (АСБ),г/л Выход АСБ отРВ, Я ыход АСБт РВ, 3 од АСБРВ, Х Составитель Т. МелентьеваТехред Л.Сердюкова Корректор