Способ определения закиси азота, выделяемой почвенными микроорганизмами

(088.8) кое сви кл. 6 0 ОПРЕДЕЛ ПОЧВЕНН тельство СССР И 33/24, 1982. НИЯ ЗАКИСИ АЗОТА, О 1 МИКРООРГАНИЗМАретение относитсяяйству, в частностеления закиси азот сел спосо- выделяГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР(57) Изоб скому хоз бам опред емои почвенными микроорганизмами. Целью изобретения является повышениеточности определения. Способ заключается в следующем: отбирают пробупочвенного образца, инкубируют напитательной среде в анаэробных условиях в присутствии ацетилена, отбирают газовую фазу, иэ нее удаляют углекислый гаэ путем пропускания черезфильтрующий материал иэ гранулированного аскарита и в газовой фазе определяют закись азота гаэохроматографически. Способ позволяет повысить точность анализа и определить закисьазота, выделяемую дрожжевыми культурами. 2 табл,Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к оценке биологической активности почвенных микроорганизмов, а именно к способам определения закисц азота.Цель изобретения - повышение точности определения.Способ осуществляют следующим об 10разом.П р и м е р. Чистые культуры почвенных микроорганизмов выращивают в пенициллиновых флаконах объемом 15 мл, содержащих 5 мл соответствующей среды (Гильтая, сусло). После посева 15 флаконы закрывают резиновыми пробками, вытесняют воздух над поверхностью среды аргоном и вводят ацетилен (10 об.7). Флаконы инкубируют при 28 С в течение 3 сут. Отбор газовой 20 пробы (1 мл) проводят стандартным медицинским шприцом (прототип) и анализируют на газовом хроматографе.Для сравнения в тех же культурах отбор газовой пробы на содержание 25 Х 0 был проведен предлагаемым способом. Для этого чистые культуры почвенных микроорганизмов выращивают в пенициллиновых флаконах объемом 15 мл, содержащих 5 мл соответствующей сре ды (Гильтая, сусло), После посева флаконы закрывают резиновыми пробками, вытесняют воздух над поверхностью среды аргоном и вводят ацетилен (10 об среды аргоном и вводят ацетил (10 об.7) . 35 Флаконы инкубируют при 28 С в течение 1 сут, Газовую пробу (1 мл) отбирают шприцом с прокладкой из аскарита толщиной 1 мм, весом 0,4 г (фракция 0,3-0,5 мм) и проводят газохромато графическое определение содержания в ней Х О.Результаты анализов газовых проб, отобранных двумя способами, представлены в табл. 1 и 2.45Как следует из табл. 1 и 2 в пробах, отобранных стандартным способом (1), закись азота не обнаружена, тогда как предлагаемый способ отбора газовой пробы (11) позволяет выявить значительное выделение закиси азота бактериальными и дрожжевыми культурами.Почвенные дрожжи рр. Сгургососсцв и Ьрошусев закись азота не вьщеляют, максимальное образование М О выявлено у дрожжей рр,Напвепц 1 а и Р 1 сЬа, обладающих активными ферментами каталазой и пероксидазой : (табл. 1). Из0 2,4 0 43,2 РдсЬда Ьоч 1 в 2435 СапдЫа Кцг 11 егшопддд87 0 2,4 0 14,4 Сапдгйа геппцгв 113 Сгургососсцв 1 ацгепгдд 84 0 Ь дропусе в 1 дро Гег Л 6 0 табл, 2 следует, что активность денитрификации у почвенных бактерий Вас 111 цв вр. снижается во время инкубации, поэтому определять ее целесообразно не позднее 2-3 сут выращивания культуры на питательной среде.Таким образом, предлагаемый способ определения количества выделяемой микроорганизмами эакиси азота поэво" ляет значительно повысить точность определения ИО, а также изучать этот процесс в динамике.Формула изобретенияСпособ определения закиси азота, выделяемой почвенными микроорганизмами, предусматривающий инкубирование образца на питательной среде в анаэробных условиях в присутствии ацетилена с последующим отбором газовой фазы и гаэохроматографическим анализом эакиси азота в ней,о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения, инкубированию подвергают чистую культуру почвенных микроорганизмов, непосредственно в процессе отбора газовой фазы удаляют углекислый газ путем пропускания через фильтрующий материал из гранулированного аскарита.Таблица 1Время инкубации, сут 17,0 13,7 8,4 10 4,2 12,1 10 6,6 10,9 15 3,8 9,0 Составитель Т.ПолянскаяРедактор М.Недолуженко Техред ИеДидык Корректор ИеЭрдейи Заказ 372/23 Тира 2 к 520 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д.4/5 ПРоизвоДственно-полигРафическое пРеДпРиЯтие, г.У 2 кгоРоДр Ул.ПРоектнаЯ,4